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Sistema per PCR GC-RICH

sufficient for ≤50 reactions, pkg of 100 U, optimum reaction temp. 72 °C

• Sinonimo/i: Sistema per PCR GC-RICH, PCR / elevato contenuto in GC
• Codice UNSPSC: 41106300

Proprietà

• impiego: sufficient for ≤50 reactions
• Livello qualitativo: 100
• Confezionamento: pkg of 100 U
• Produttore/marchio commerciale: Roche
• Parametri: 72 °C optimum reaction temp.
• tecniche: PCR: suitable
• Temperatura di conservazione: −20°C

Descrizione

Descrizione generale

Il sistema GC-RICH PCR è composto da una miscela enzimatica di Taq DNA polimerasi termostabile e di Tgo DNA polimerasi, un enzima termostabile dotato attività di correzione 3′-5′ esonucleasica. Questa miscela di polimerasi supera la Taq DNA Polymerase in termini di resa, fedeltà e specificità e consente l′amplificazione di frammenti di lunghezza fino a 5 kb. Il tampone di reazione per PCR GC-RICH, in combinazione con la soluzione GC-RICH resolution, inclusa separatamente, consente di amplificare, in modo efficiente, anche DNA stampo difficili come quelli ricchi in GC. Si consiglia il clonaggio TA. La miscela dei due enzimi produce più frammenti a estremità piatte (blunt-ended) rispetto alla Taq DNA Polimerasi da sola. La maggior parte dei frammenti prodotti ha estremità sporgenti di singole A. Utilizzare 2U per una PCR standard da 50 μl.

Contenuto

• Miscela enzimatica GC-RICH, in tampone di conservazione
• Tampone di reazione GC-RICH, a concentrazione 5X, con 7,5 mM MgCl2 e DMSO
• Soluzione GC-RICH resolution, 5 M
• MgCl2, soluzione madre 25 mM
• Acqua di grado PCR

Applicazioni

Il sistema GC-RICH PCR consiste in una miscela di Taq DNA polimerasi con una polimerasi dotata di attività proofreading che consente l'amplificazione di DNA stampo che risulterebbero difficili o impossibili da amplificare con altre polimerasi o con altre miscele di polimerasi. L′avanzata processività della miscela insieme all'esclusiva soluzione GC-RICH Resolution si combinano per fornire prestazioni eccezionali, soprattutto nel caso di DNA stampo problematici.
Il sistema GC-RICH PCR può essere utilizzato anche nel caso di PCR standard, fornendo risultati migliori (maggiore resa, maggiore accuratezza) rispetto alla sola Taq DNA polimerasi.

Vantaggi del sistema GC-Rich PCR:

• elevate prestazioni nel caso di DNA stampo difficili, inclusi quelli ricchi di GC o contenenti sequenze ripetute.
• Fornito con tutti i reagenti, inclusa la soluzione di risoluzione GC-RICH e l'acqua da PCR.
• Amplifica frammenti di DNA fino a 5 kb.

Il sistema GC-RICH PCR è stato utilizzato nell'analisi semi ‐ quantitativa, nella genotipizzazione, nel retrieval e nel clonaggio di sequenze di geni ad alto contenuto di GC.

Caratteristiche e vantaggi

Il sistema GC-RICH PCR consiste in una miscela di Taq DNA polimerasi e di una polimerasi dotata di attività proofreading per l'amplificazione dei frammenti di acidi nucleici più lunghi. Il sistema GC-Rich rappresenta la soluzione per ottenere l'amplificazione anche dei prodotti di PCR più difficili.
Utilizzando il tampone contenente magnesio fornito nel kit, si ottiene una concentrazione finale 1,5 mM MgCl2.

La miscela di Taq DNA polimerasi con una polimerasi dotata di attività di correzione degli errori consente l′amplificazione dei DNA stampo più difficili. La processività avanzata e l'esclusiva soluzione GC-RICH Resolution consentono di ottenere prestazioni superiori.

• PCR
• DNA stampo di difficile amplificazione fino a 5 Kb

Utilizzare il GC-Rich PCR System, dNTPack con miscela di nucleotidi per PCR pronta all′uso.

Confezionamento

1 kit comprendente 5 componenti

Qualità

Il sistema GC-RICH PCR è testato funzionalmente amplificando un frammento genomico di ApoE umano da 284 bp utilizzando i protocolli allegati.

Definizione di unità

Attività per volume: 2 U/μL

Nota sulla preparazione

Concentrazione di lavoro: concentrazione enzimatica
La concentrazione enzimatica ottimale per ogni saggio è compresa tra 0,5 e 5U Per una PCR standard da 50 μL, si consiglia di utilizzare 2 U di miscela enzimatica.

Altre note

Esclusivamente per ricerche di life science. Non usare a scopo diagnostico.

Note legali

L'utilizzo di questo prodotto è coperto dal brevetto USA n. 6.127.155 e dalle corrispondenti rivendicazioni di brevetto al di fuori degli Stati Uniti.  L′acquisto di questo prodotto include un'immunità limitata e non trasferibile dalle azioni giudiziarie ai sensi delle suddette rivendicazioni di brevetto per l'utilizzo limitato a questa quantità di prodotto per la ricerca interna dell'acquirente.  Non è espresso esplicitamente, implicitamente o per malafede alcun diritto a qualsiasi altra rivendicazione di brevetto e alcun diritto a prestare servizi commerciali di qualsiasi tipo, inclusa senza limitazioni la comunicazione dei risultati delle attività degli acquirenti dietro pagamento o altro corrispettivo commerciale.  Prodotto destinato esclusivamente a scopi di ricerca. Gli usi diagnostici in campo umano e veterinario sotto rivendicazione di brevetto da parte di Roche richiedono una licenza separata da parte di Roche.  Tutti gli usi diversi dalla ricerca interna e gli usi diagnostici in campo umano e veterinario sotto rivendicazione di brevetto da parte di Roche, richiedono una licenza aggiuntiva da parte di Thermo Fisher Scientific. Ulteriori informazioni sull'acquisto di licenze da Roche possono essere ottenute contattando il Licensing Department of Roche Molecular Systems, Inc., 4300 Hacienda Drive, Pleasanton, California 94588, USA o Roche Diagnostics GmbH, Sandhofer Strasse 116, 68305 Mannheim, Germania.  Ulteriori informazioni sull'acquisto di licenze da Thermo Fisher Scientific possono essere ottenute contattando il Dipartimento Licenze  di Thermo Fisher Scientific, 5791 Van Allen Way, Carlsbad, California 92008, USA.

Solo come componenti del kit

• GC-RICH Enzyme Mix, in storage buffer
• GC-RICH PCR Reaction Buffer, with 7.5 mM MgCl₂ and DMSO 5x concentrated
• GC-RICH Resolution Solution 5 M
• MgCl₂ Stock Solution 25 mM
• Water, PCR Grade

Informazioni sulla sicurezza

• Indicazioni di pericolo: H412
• Consigli di prudenza: P273 - P501
• Classi di pericolo: Aquatic Chronic 3
• Codice della classe di stoccaggio: 12 - Non Combustible Liquids
• Classe di pericolosità dell'acqua (WGK): WGK 2
• Punto d’infiammabilità (°F): does not flash
• Punto d’infiammabilità (°C): does not flash