TAQ-RO

Taq DNA Polimerasi, 5 U/μL

optimum pH ~9.0 (20 °C), optimum reaction temp. 72 °C

• Sinonimo/i: Polimerasi, PCR, estensione del primer, amplificazione DNA, amplificazione del DNA, estensione dei primer, pcr
• Classificazione EC (Enzyme Commission): 2.7.7.7 (BRENDA, IUBMB)
• Codice UNSPSC: 41106300

Proprietà

• Origine biologica: bacterial (Thermus aquaticus)
• Livello qualitativo: 100
• Ricombinante: expressed in E. coli
• Grado: Molecular Biology
• Forma fisica: liquid
• impiego: sufficient for ≤1,000 reactions (11146173001); sufficient for ≤10,000 reactions (11435094001); sufficient for ≤2,000 reactions (11418432001); sufficient for ≤5,000 reactions (11596594001); sufficient for ≤200 reactions (11146165001)
• Attività specifica: 5 U/μL
• PM: 95 kDa
• Confezionamento: pkg of 1,000 U (11418432001 [4 x 250 U]); pkg of 2,500 U (11596594001 [10 x 250 U]); pkg of 5,000 U (11435094001 [20 x 250 U]); pkg of 100 U (11146165001); pkg of 500 U (11146173001 [1 x 500 U])
• Produttore/marchio commerciale: Roche
• Parametri: 72 °C optimum reaction temp.
• tecniche: DNA sequencing: suitable; PCR: suitable
• Colore: colorless
• pH ottimale: ~9.0 (20 °C)
• Solubilità: water: miscible
• Compatibilità: suitable for molecular biology
• N° accesso NCBI: AAA27507
• N° accesso UniProt: P19821
• applicazioni: genomic analysis; life science and biopharma
• Attività estranea: Nicking activity 30 units, none detected; Ribonuclease 30 units, none detected; Unspecific endonucleases 30 units, none detected
• Temperatura di conservazione: −20°C

Descrizione

Descrizione generale

La Taq DNA polimerasi è una DNA polimerasi 5′→3′ fortemente attiva priva di attività esonucleasica 3′→5′ . È una catena polipeptidica singola con un peso molecolare di circa 95 kDa.
La Taq DNA polimerasi fu isolata in origine dall′eubatterio termofilo Thermus aquaticus BM, un ceppo privo di endonucleasi di restrizione Taq I. L′enzima è stato clonato in E.coli.

Applicazioni

La Taq DNA Polimerasi può essere usata in semplici PCR di routine. La Taq DNA Polimerasi Roche Applied Science è mantenuta ad alti livelli di purezza e qualità. Questa preparazione di Taq DNA Polimerasi ricombinante si applica a:

• PCR
• RT-PCR
• qPCR
• Altre reazioni di estensione dell′innesco, come sequenziamento e marcatura

Caratteristiche e vantaggi

Risultati affidabili e riproducibili:
elevata uniformità fra lotti diversi.
Nessun bisogno di testare ogni lotto:
la Taq DNA polimerasi è testata in modo rigoroso.
Previene la contaminazione da carryover nella PCR:
l′incorporazione di dUTP in combinazione con l′uracil-DNA glicosilasi previene la contaminazione crociata nella PCR.

Confezionamento

1 kit con 2 componenti

Qualità

I saggi di routine hanno ampliconi di medie dimensioni e un contenuto in GC del 50%. La Taq DNA polimerasi non svolge attività di proofreading e non ha caratteristiche “hot start”. L′attività ottimale si esplica a +75 °C e pH 9.
Priva di endonucleasi di restrizione
L′enzima isolato originariamente da T. aquaticus BM è privo di attività dell′endonucleasi di restrizione Taq I. Ogni lotto è testato per la PCR usando λDNA. Ciascun lotto è anche analizzato per l′assenza di eso/endonucleasi e attività di incisione seguendo le attuali procedure di Controllo della Qualità.

Definizione di unità

Una unità di Taq DNA polimerasi è definita come la quantità di enzima che incorpora 10 nmoli di desossiribonucleosidetrifosfati totali in DNA precipitabile in acido entro 60 minuti a +65 °C nelle condizioni analitiche citate.

Saggio dell′attività enzimatica Tampone di incubazione:
Tris/HCl 67 mM, pH 8,3/25 °C, MgCl₂ 5 mM, mercaptoetanolo 10 mM, polidocanolo 0,2%, gelatina 0,2 mg/mL, dATP, dGTP, dTTP ognuno 0,2 mM e dCTP 0,1 mM.

Procedura di incubazione:
M13mp9ss, primer M13 (17mer) e 1 μCi (α^-32P) dCTP sono incubati con Taq DNA polimerasi alle diluizione idonee in 50 μL di tampone d′incubazione a +65 °C per 60 minuti. La quantità di dNTP incorporati viene determinata per precipitazione con acido tricloroacetico.

Attività per volume: 5 U/μL

Altre note

Esclusivamente per ricerche life science. Non usare in procedure diagnostiche.

Note legali

L'utilizzo di questo prodotto è coperto da rivendicazioni di brevetto USA e dalle corrispondenti rivendicazioni al di fuori degli USA. L′acquisto di questo prodotto include un'immunità limitata e non trasferibile contro le azioni legali ai sensi delle suddette rivendicazioni di brevetto per l'esclusivo impiego di questa quantità di prodotto ai fini della ricerca interna dell'acquirente. Non è conferito espressamente, implicitamente o per preclusione alcun diritto ai sensi di qualsiasi altra rivendicazione di brevetto, alcun diritto a eseguire metodi brevettati e alcun diritto a prestare servizi commerciali di qualsiasi tipo, inclusa, ma non solo, la comunicazione dei risultati delle attività degli acquirenti a fronte di un pagamento o di altro corrispettivo commerciale. Questo prodotto è destinato esclusivamente a scopi di ricerca. Gli usi diagnostici coperti da rivendicazione di brevetto Roche richiedono una licenza separata da parte di Roche. Per ulteriori informazioni sull′acquisto di licenze, contattare il Responsabile delle Licenze, Applied Biosystems, 850 Lincoln Centre Drive, Foster City, California, 94404, USA.

Solo come componenti del kit

• Taq DNA Polymerase 5 U/μl
• PCR Buffer with MgCl₂ 10x concentrated
• MgCl₂ Stock Solution
• PCR Buffer without MgCl₂

Informazioni sulla sicurezza

• Indicazioni di pericolo: H412
• Consigli di prudenza: P273 - P501
• Classi di pericolo: Aquatic Chronic 3
• Codice della classe di stoccaggio: 12 - Non Combustible Liquids
• Classe di pericolosità dell'acqua (WGK): WGK 2
• Punto d’infiammabilità (°F): does not flash
• Punto d’infiammabilità (°C): does not flash