11465007001
Roche
Kit I per la proliferazione cellulare (MTT)
Sinonimo/i:
mtt
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About This Item
Codice UNSPSC:
12352200
Prodotti consigliati
Forma fisica
liquid
Livello qualitativo
impiego
sufficient for ≤2,500 tests
Confezionamento
pkg of 1 kit
Produttore/marchio commerciale
Roche
Condizioni di stoccaggio
protect from light
tecniche
tissue culture: suitable
λmax
550-600 nm
applicazioni
cell analysis
detection
Metodo di rivelazione
colorimetric
Temperatura di conservazione
−20°C
Descrizione generale
Il kit I per la proliferazione cellulare (MTT) è un saggio colorimetrico per la quantificazione non radioattiva della proliferazione e della vitalità cellulare e della citotossicità. Il materiale del campione è costituito da cellule aderenti o in sospensione coltivate in micropiastre da 96 pozzetti.
I saggi colorimetrici analizzano il numero di cellule vitali in base alla scissione dei sali di tetrazolio aggiunti al terreno di coltura. Questa tecnica non richiede né il lavaggio né la raccolta delle cellule e il saggio completo, dalla microcoltura all′analisi dei dati con un lettore ELISA, si esegue nella stessa micropiastra.
MTT è stato il primo sale di tetrazolio descritto. Enzimi del reticolo endoplasmatico lo scindono dando luogo a formazano. Questa bioriduzione ha luogo soltanto nelle cellule vitali ed è correlata alla produzione di NAD(P)H attraverso la glicolisi. Dunque, la quantità di colorante formazano che si forma correla direttamente con il numero di cellule metabolicamente attive nella coltura.
Saggio colorimetrico, basato su MTT, per la quantificazione non radioattiva della proliferazione e la vitalità cellulare, e della citotossicità.
I saggi colorimetrici analizzano il numero di cellule vitali in base alla scissione dei sali di tetrazolio aggiunti al terreno di coltura. Questa tecnica non richiede né il lavaggio né la raccolta delle cellule e il saggio completo, dalla microcoltura all′analisi dei dati con un lettore ELISA, si esegue nella stessa micropiastra.
MTT è stato il primo sale di tetrazolio descritto. Enzimi del reticolo endoplasmatico lo scindono dando luogo a formazano. Questa bioriduzione ha luogo soltanto nelle cellule vitali ed è correlata alla produzione di NAD(P)H attraverso la glicolisi. Dunque, la quantità di colorante formazano che si forma correla direttamente con il numero di cellule metabolicamente attive nella coltura.
Saggio colorimetrico, basato su MTT, per la quantificazione non radioattiva della proliferazione e la vitalità cellulare, e della citotossicità.
Applicazioni
Il kit I per la proliferazione cellulare (MTT) è usato per la quantificazione spettrofotometrica non radioattiva della proliferazione e della vitalità della popolazione cellulare con il formato della piastra a 96 pozzetti. Può essere usato per:
- Misurare la proliferazione cellulare in risposta a fattori di crescita, citochine, mitogeni e nutrienti.
- Analisi di composti citotossici e citostatici come i farmaci contro il cancro e altri composti farmaceutici.
- Valutare anticorpi inibitori della crescita e mediatori fisiologici.
- Test di biocompatibilità di vari scaffold impiegati nell′ingegneria dei tessuti per la crescita delle cellule ossee
Caratteristiche e vantaggi
- Facile e sicuro: elimina isotopi radioattivi, stadi di lavaggio e reagenti addizionali.
- Accurato: l′assorbanza misurata correla strettamente con il numero delle cellule.
- Sensibile: rileva un basso numero di cellule.
- Rapido: processa un ampio numero di campioni usando un lettore ELISA multi-pozzetto.
Il saggio si basa sulla scissione del sale di tetrazolio MTT in presenza di un reagente per l′accoppiamento degli elettroni. Il sale di formazano non idrosolubile che viene prodotto deve essere solubilizzato in un ulteriore passaggio. Le cellule cresciute in una piastra a 96 pozzetti per la coltura di tessuti sono incubate con la soluzione MTT per 4 ore circa. Dopo questo periodo di incubazione, si forma il colorante formazano non idrosolubile. Dopo la solubilizzazione, si quantifica il colorante formazano con uno spettrofotometro a scansione multipozzetto (lettore ELISA). L′assorbanza misurata correla direttamente con il numero di cellule vitali.
I saggi di proliferazione e vitalità cellulari sono particolarmente importanti per applicazioni di routine in biologia cellulare. I sali di tetrazolio (per es. MTT, XTT, WST-1) sono particolarmente utili per questo tipo di analisi. I sali di tetrazolio vengono scissi generando formazano dal sistema di reduttasi succinato-tetrazolio (EC 1.3.99.1) che fa parte della catena respiratoria dei mitocondri ed è attivo soltanto in cellule con metabolismo intatto (vedere più sotto).
I saggi di proliferazione e vitalità cellulari sono particolarmente importanti per applicazioni di routine in biologia cellulare. I sali di tetrazolio (per es. MTT, XTT, WST-1) sono particolarmente utili per questo tipo di analisi. I sali di tetrazolio vengono scissi generando formazano dal sistema di reduttasi succinato-tetrazolio (EC 1.3.99.1) che fa parte della catena respiratoria dei mitocondri ed è attivo soltanto in cellule con metabolismo intatto (vedere più sotto).
Confezionamento
1 kit con 2 componenti.
Nota sulla preparazione
Condizioni di conservazione (soluzione di lavoro): 2-8 °C
Dopo lo scongelamento è possibile conservare i reagenti di marcatura dell′MTT al riparo dalla luce a 2-8 °C per un massimo di 4 settimane; in tal caso si consiglia di filtrare il reagente con una membrana con pori da 0,2 μm.
Dopo lo scongelamento è possibile conservare i reagenti di marcatura dell′MTT al riparo dalla luce a 2-8 °C per un massimo di 4 settimane; in tal caso si consiglia di filtrare il reagente con una membrana con pori da 0,2 μm.
Solo come componenti del kit
N° Catalogo
Descrizione
- MTT Labeling Reagent
- Solubilization Solution
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N° Catalogo
Descrizione
Determinazione del prezzo
Codice della classe di stoccaggio
12 - Non Combustible Liquids
Classe di pericolosità dell'acqua (WGK)
WGK 2
Punto d’infiammabilità (°F)
does not flash
Punto d’infiammabilità (°C)
does not flash
Certificati d'analisi (COA)
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