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Merck

2GRKB

Roche

KAPA2G Robust PCR 试剂盒

别名:

PCR

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About This Item

分類程式碼代碼:
41106300
NACRES:
NA.55

用途

sufficient for 200 reactions
sufficient for 500 reactions

品質等級

儲存期限

≤12 mo.

特點

Difficult Templates/Specialty Enzymes PCR
dNTPs included
hotstart: no

包裝

pkg of 100 U (KK5023)
pkg of 250 U (KK5024)

製造商/商標名

Roche

技術

PCR: suitable

輸入

crude DNA

儲存溫度

−20°C

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一般說明

第二代 KAPA2G Robust DNA 聚合酶研发用于解决多种扩增子类型(富含GC和AT的扩增子)扩增不一致的问题。KAPA2G Robust PCR试剂盒表现更高的持续合成能力和特异性,从而可实现稳定的PCR性能、高灵敏度和改善的常见抑制剂耐受性。KAPA2G Robust DNA 聚合酶的高性能非常适合挑战性 PCR 应用和样本,避免了使用多种酶和方案进行优化。
该酶配有三种反应缓冲液,以及一种高GC含量PCR专用增强剂。KAPA2G缓冲液A针对KAPA2G改良酶特性专门配制。KAPA2G缓冲液B推荐用于被PCR抑制剂污染的模板样品。KAPA2G缓冲液GC推荐用于高GC含量PCR。KAPA增强剂1是专有的DNA去稳定剂,可与KAPA2G缓冲液A或B共同用于高GC含量检测,或复杂二级结构检测。

應用

KAPA2G 稳健 PCR 试剂盒已用于:
  • 富含 GC 或 AT 模板的扩增和基因扩增
  • 含有常见 PCR 抑制剂(例如,盐、尿素、SDS 或乙醇)的模板
  • 粗制样本 PCR,例如口腔拭子,培养的哺乳动物、酵母或细菌细胞
  • 菌落 PCR
  • 常规PCR
  • PCR扩增
  • 禽痘病毒特异性PCR
  • 单重PCR
  • 半定量PCR

生化/生理作用

KAPA2G Robust聚合酶的保真度近似于野生型Taq聚合酶,错配率为每1.7 x 105核苷酸约有1个错误。KAPA2G Robust DNA聚合酶产生的DNA片段与野生型Taq DNA聚合酶产生的DNA片段的性质相同,可用于限制性内切酶消化、克隆和测序应用。同野生型Taq聚合酶一样,KAPA2G Robust聚合酶具有5′→3′聚合酶和5′→3′外切酶活性,但不具有3′→5′外切酶(校正)活性。

特點和優勢

高效扩增富含 GC 和 AT 的靶标
  • 在广泛的 GC 和 AT 富集模板中表现稳健
  • 提高 PCR 成功率

提高对普通 PCR 抑制剂的耐受性
  • 从粗样品中高效扩增
  • 单位酶的产量和灵敏度更高

菌落 PCR 中无与伦比的性能
  • 大肠杆菌和酵母细胞直接 PCR 的高产率和一致性

快速注释:
  • KAPA2G Robust PCR 试剂盒包含 KAPA2G Robust DNA 聚合酶,设计用于高处理能力和抑制剂耐受性。
  • 纯化的基因组 DNA 和粗样品(例如菌落 PCR)均可用作模板。
  • 每 25 μL 反应使用 0.5 UKAPA2G 耐用 DNA 聚合酶。更具挑战性的 PCR(GCrich,粗品)可能需要更高的酶浓度。
  • 每个循环使用 15 s/kb 的延伸时间,对于困难的扩增子或模板则增加到 30-60 s/kb。
  • 1X 时,KAPA2G 缓冲液含 1.5 mM MgCl2
  • 可使用试剂盒中提供的 25 mM MgCl 2溶液添加额外的 MgCl 2
  • KAPA2G 缓冲液 A 针对高产量、高特异性和高灵敏度进行了优化。
  • 推荐将 KAPA2G 缓冲液 B 用于抑制剂污染的模板样品。
  • KAPA2G GC 缓冲液推荐用于富含 GC 的 PCR (> 70%GC)。
  • KAPA 增强剂 1 可与 KAPA2G 缓冲液 A 或 B 一起使用,尤其是用于富含 GC 的检测。
  • 反应产物为 3′-dA-尾,可克隆至 TA 克隆载体。

品質

每批 KAPA2G 耐用 DNA 聚合酶经确认含 < 2% 污染蛋白 (Agilent protein 230 Assay)。 KAPA2G 耐用 PCR 试剂盒经过严格的质量控制测试,没有污染外源和内切酶活性,符合 DNA 污染水平的严格要求。

準備報告

使用前务必确保产品已完全解冻并混合。试剂可在 4℃ 条件下保存,供短期使用(最长 1 个月)。放回 -20℃ 条件下长期保存。如果所有组件均已小心处理且未被污染,则如果在室温下(无意中)短时间(长达 3 天)放置,试剂盒预期不会受损。不建议在室温和 4℃ 条件下长期保存。请注意,在-20°C 以上温度下储存的试剂在使用过程中受到污染时更容易发生降解,因此在这种温度下储存由用户自行承担风险。

其他說明

仅用于研究目的。不用于诊断程序。

仅试剂盒组分

产品编号
说明

  • KAPA2G Robust Standard or HotStart® DNA Polymerase 5 U/μL

  • 5X KAPA2G Buffer A with MgCl2

  • 5X KAPA2G Buffer B with MgCl2

  • 5X KAPA2G GC Buffer with MgCl2

  • 5X KAPA Enhancer 1

  • MgCl2 25 mM

象形圖

Exclamation markHealth hazard

訊號詞

Warning

危險聲明

危險分類

Acute Tox. 4 Oral - Aquatic Chronic 3 - STOT SE 2

儲存類別代碼

12 - Non Combustible Liquids

水污染物質分類(WGK)

WGK 1

閃點(°F)

does not flash

閃點(°C)

does not flash


分析证书(COA)

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