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Merck
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文件

MAB5266

Sigma-Aldrich

抗-神经丝200 kDa抗体,克隆N52

clone N52, Chemicon®, from mouse

别名:

Anti-CMT2CC, Anti-NFH

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About This Item

分類程式碼代碼:
12352203
eCl@ss:
32160702
NACRES:
NA.41

生物源

mouse

品質等級

100
300

抗體表格

purified immunoglobulin

抗體產品種類

primary antibodies

無性繁殖

N52, monoclonal

物種活性

human, mouse, monkey, rat, pig

製造商/商標名

Chemicon®

技術

immunohistochemistry: suitable
western blot: suitable

同型

IgG1

NCBI登錄號

UniProt登錄號

運輸包裝

wet ice

目標翻譯後修改

unmodified

基因資訊

human ... NEFH(4744)
mouse ... Nefh(380684)
pig ... Nefh(100156492)
rat ... Nefh(24587)
rhesus monkey ... Nefh(717705)

一般說明

神经丝是一种中间丝,可作为支持轴突细胞质的细胞骨架的主要元素。 它们是轴突中最丰富的原纤维成分,平均频率是轴突微管的3-10倍。 神经丝(直径10nm)由三个相互缠绕的原纤维构建而成,原纤维本身由单体蛋白质的两个四聚体原丝复合物组成。神经丝三联体蛋白(68/70、160和200 kDa)同时存在于中枢神经系统和周围神经系统中,通常是神经元特异性的。68/70 kDa NF-L蛋白可以自组装成丝状结构,但是160 kDa NF-M和200 kDa NF-H蛋白需要68/70 kDa NF-L蛋白的存在才能共组装。 神经瘤、神经节瘤、神经节神经胶质瘤、神经节神经母细胞瘤和神经母细胞瘤的神经丝染色呈阳性。 尽管通常仅限于神经元,但已在神经节旁瘤以及肾上腺和肾上腺嗜铬细胞瘤中检测到神经丝。类癌、皮肤神经内分泌癌和肺燕麦细胞癌也表达神经丝。 有关更多神经丝信息,请参见CHEMICON技术支持部分下的在线神经系统细胞类型特定标志物图。

特異性

MAB5266与正常组织/提取物中神经丝200kDa(NF-H)的磷酸化和去磷酸化H链反应(Shaw,1986)。MAB5266可用于通过免疫组织化学和蛋白质印迹检测起源神经元的细胞。据报道,MAB5266与NF-H的反应性在cdk-5过表达细胞中被阻断(Guidato,1996)。

免疫原

酶促去磷酸化猪H链的羧基末端尾段。

應用

研究子类别
神经丝&神经元代谢

神经元&神经胶质标志物
研究类别
神经科学
经验证,该抗神经丝200 kDa抗体(克隆N52)可用于WB、IH中检测神经丝200 kDa。
蛋白质印迹:5-10 μg/mL

免疫组织化学:5-10 μg/mL

最佳工作稀释度必须由最终用户确定。

免疫组织化学:抗体N52与位于MPR KSP结构域末端并含有共有cdk-5磷酸化位点的NF-200侧臂片段反应,但是如果NF-200片段被cdk-5磷酸化,则该反应性被消除{Guidato et al,1996}。 因此,对于包括蛋白质印迹在内的最全面的染色和反应性,建议在抗体染色之前用碱性磷酸酶处理样品。 建议采用以下处理方案:



溶液的制备方案:

I. TBS: Tris-HCl,0.1 mol/L;NaCl,0.1 mol/L′ pH 8.0。

II.将碱性磷酸酶,1 mg/ml与1 mol/l ZnSO4、1mol/L MgCl2和1mmol/L PMSF混合;并在TBS中溶解。

注释: 使用前需将碱性磷酸酶对溶液I进行透析。

步骤:

将来自休克冷冻组织样品的冷冻切片风干,然后在-20°C下用丙酮固定10分钟。 使过量的丙酮在室温下蒸发。 将切片在溶液II中于+30°C下孵育4小时,然后在TBS中洗涤3次,每次5分钟。 阴性对照切片在不含碱性磷酸酶的溶液II中孵育。进一步处理如下:

- 用10-20 μl抗体溶液覆盖制备物,并在潮湿箱中孵育1小时。

- 将载玻片浸入TBS中,并在TBS中洗涤3次,每次5分钟。

- 用10-20 μl用异硫氰酸氟标记的抗小鼠Ig抗体溶液覆盖制备物,并在37°C的潮湿箱中孵育1小时。

- 在TBS中清洗载玻片3次,每次5分钟。

外觀

形式:纯化
纯化的免疫球蛋白(离子交换色谱法)。 液体形式,溶于0.02 M磷酸盐缓冲液、0.25 M NaCl和0.1%叠氮化钠(pH 7.6)中

儲存和穩定性

以未稀释的等分试样在2-8°C下保存长达6个月。应避免反复冻/融循环。

其他說明

浓度:关于批次特定浓度请参见检验报告。

法律資訊

CHEMICON is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

免責聲明

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儲存類別代碼

10 - Combustible liquids

水污染物質分類(WGK)

WGK 2

閃點(°F)

Not applicable

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Not applicable


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