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Merck

10786357001

Roche

Ribonucleasa H (RNasa H)

from Escherichia coli H 560 pol A1

Sinónimos:

rnasa h

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About This Item

Código UNSPSC:
12352204

origen biológico

Escherichia coli ( H 560 pol A1)

Nivel de calidad

Análisis

100%

formulario

solution

actividad específica

~40000 units/mg protein

envase

pkg of 100 U

fabricante / nombre comercial

Roche

técnicas

cDNA synthesis: suitable

color

colorless

pH óptimo

7.5-9.1

solubilidad

water: miscible

idoneidad

suitable for molecular biology

Nº de acceso NCBI

aplicaciones

life science and biopharma

actividad extraña

RNase, none detected (up to 10 U with MS- II- RNA)
endonuclease ~10 units, none detected (using lambda-DNA)
nicking activity 10 units, none detected

Condiciones de envío

dry ice

temp. de almacenamiento

−20°C (−15°C to −25°C)

Información sobre el gen

Escherichia coli ... rnhA(946955)

Descripción general

Endorribonucleasa inespecífica que escinde de manera específica el ARN de los híbridos ARN: ADN. Requiere un mínimo de cuatro pares de bases continuas (ARN:ADN) para su actividad. La RNasa H rompe el ARN para liberar 5′-oligorribonucleótidos.

Origen: E. coli H560 pol A1
Tampón de almacenamiento: Tris-HCl 25 mM, KCl 50 mM, ditiotreitol 1 mM, EDTA 0,1 mM, glicerol al 50 % (v/v), pH 8,0 (+4°C)
Volumen de actividad: 1 x 103 U/ml analizadas según Hillenbrand y Staudenbauer.
La ribonucleasa H (RNasa H) es una endorribonucleasa inespecífica, localizada en el núcleo y el citoplasma. Es ubicua y está ampliamente presente entre muchos organismos, entre ellos los virus y los seres humanos.

Aplicación

La ribonucleasa H (RNasa H) se ha utilizado para:
  • Inicio de la síntesis de ADN cebado con ARN in vivo
  • Eliminación del ARNm durante la síntesis de la segunda cadena de ADNc
  • Escisión específica de sitio del ARN
  • Detección de regiones ARN:ADN en el ADN bicatenario de origen natural
  • Eliminación de secuencias poli (A) del ARNm si hay oligo (dT) presentes
  • Extracción de ARN y reacción en cadena de la polimerasa cuantitativa con transcriptasa inversa (RT-PCR)

Acciones bioquímicas o fisiológicas

La ribonucleasa H (RNasa H) escinde de manera específica el ARN en los híbridos ARN:ADN. Requiere un mínimo de cuatro pares de bases continuas (ARN:ADN) para su actividad. La RNasa H rompe el ARN para liberar 5′-oligorribonucleótidos. La RNasa H se asocia con la inmunidad a los ácidos nucleicos. La utilización de RNasa H para degradar el ARNm tiene como consecuencia la reducción del 80% del ARNm y la expresión de proteínas. La RNasa H reconoce el codón de inicio y las regiones 3′ y 5′ no traducidas. Esta enzima participa en la replicación del ADN.

Características y beneficios

  • Elimina posibles fuentes de errores de la PCR.
  • Aumenta la accesibilidad de los cebadores durante la PCR subsiguiente.

Calidad

Ausencia de endonucleasas, actividades melladoras (nicking) y ribonucleasas.

Definición de unidad

La RNasa H se analiza según Hillenbrand y Staudenbauer. Una unidad de RNasa H es la cantidad de enzima que produce 1 nmol de ribonucleótidos solubles en ácido a partir de [3H] poli(A) x poli(dT) en 20 minutos a +37 °C en las condiciones de análisis establecidas.

Volumen de actividad: aproximadamente 1 U/μl

Nota de preparación

Activador: La enzima tiene su máxima actividad en presencia de reactivos SH

Almacenamiento y estabilidad

Guardar a -15–-25 °C. (Sin abrir)

Otras notas

Sólo para investigación en ciencias de la vida. No indicada para procedimientos diagnósticos. La utilización de la RNasa H después de la etapa de síntesis del ADNc puede aumentar la sensibilidad de una retro-PCR en dos etapas.

Código de clase de almacenamiento

12 - Non Combustible Liquids

Clase de riesgo para el agua (WGK)

WGK 1

Punto de inflamabilidad (°F)

does not flash

Punto de inflamabilidad (°C)

does not flash


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