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FLAG® Aufreinigung

FLAG® Tags ermöglichen einen hervorragenden Nachweis und eine robuste Aufreinigung rekombinanter Fusionsproteine und haben sich in zahlreichen Downstream-Anwendungen von Bindungs- und Aktivitätsassays bis hin zur Strukturanalyse bewährt. Das FLAG® Epitop-Tag ist ein kurzes, hydrophiles Peptid mit acht Aminosäuren (DYKDDDDK-Tag), das leicht durch Enterokinase (EK) gespalten werden kann. Aufgrund seiner geringen Größe und hydrophilen Beschaffenheit befindet sich das FLAG® Tag in der Regel auf der Oberfläche des Fusionsproteins, wodurch die Auswirkungen auf Funktion, Sekretion oder Transport des Fusionsproteins minimiert werden. Unabhängig von Ihrer Endanwendung verfügen wir über die erforderlichen Werkzeuge für die Expression, Aufreinigung und den Nachweis von FLAG® Fusionsproteinen.

FLAG® Tag Proteinexpression

Unser FLAG® Tag Portfolio für die Proteinexpression umfasst Vektoren für die effiziente Expression rekombinanter Fusionsproteine in bakteriellen und Säugersystemen. Die SnapFast™ Vektortechnologie ermöglicht es Ihnen, das gewünschte Gen einfach von einem Vektor in einen anderen zu verschieben, um die Klonierung effizienter und kostengünstiger zu gestalten.

  • Das Standard FLAG® Peptid (Sequenz: DYKDDDDK) ist ein kleines Tag, das mit minimalem Risiko einer sterischen Hinderung oder einer negativen Auswirkung auf die Proteinlöslichkeit eingebaut werden kann
  • Die 3xFLAG® Tag-Sequenz fusioniert drei Tandem-FLAG® Epitope zum verbesserten (bis zu 200X) Nachweis von Fusionsproteinen

FLAG® Tag Proteinaufreinigung

Wir bieten eine Vielzahl von Agarose-Affinitäts-Aufreinigungsgelen, magnetische Beads, Aufreinigungskits und beschichtete Platten für die Isolierung und Aufreinigung von FLAG® markierten Proteinen.

  • Agarose-Affinitätsgele ermöglichen die Aufreinigung von mit Fusionsmarkierungen versehenen Proteinen unter Verwendung von anti-FLAG® Antikörpern, die mit Agarose-Beads vernetzt sind, und eignen sich für die Aufreinigung in kleinem bis großem Maßstab. Diese Harze können darüber hinaus für die Aufreinigung in Schwerkraftflusssäulen eingesetzt werden.
  • Anti-FLAG® M2 Magnetische Beads werden zur Aufreinigung rekombinanter fusionsmarkierter Proteine verwendet, wobei ein magnetisches Gestell oder eine Plattform zur Trennung der Beads und zur Isolierung des Proteins für eine schnelle Verarbeitung verwendet wird.
  • Anti-FLAG® High Sensitivity M2-beschichtete 96-Well-Platten eignen sich für das Expressionsscreening, die Untersuchung von Protein-Protein-Interaktionen und ELISA-Assays.

FLAG® Tag Nachweis

FLAG® und 3xFLAG™ Tags enthalten Bindungsstellen für hochspezifische monoklonale Anti-FLAG® Antikörper sowie polyklonale Antikörper und Konjugate für ELISA, Blotting-Anwendungen, Immunfluoreszenz, Immunzytochemie, Immunhistochemie (IHC), Blotting und Durchflusszytometrie.

  • Durch den M2 anti-FLAG® Antikörper werden N-Terminus FLAG®, C-Terminus FLAG® und Met-FLAG® Fusionsproteine gebunden.
  • Die Bindung des M1 anti-FLAG® Antikörpers ist kalziumabhängig und spezifisch für den N-Terminus des FLAG® Tags.
  • Durch den M5 anti-FLAG® Antikörper werden N-Terminus FLAG® und Met-FLAG® Fusionsproteine gebunden.
*IP = Immunpräzipitation; IC = Immunchemie, WB = Western Blot, EIA = Enzymgekoppelter Immunabsorptionsassay (ELISA)

Weitere Produktinformationen

Broschüre: Refine Protein Preparation
Bedienungsanleitung: FLAG - Proven System for Detection and Purification of Proteins
Anwendungshinweis: EZviewTM Red Protein A and ANTI-FLAG® M2 Affinity Gels - Immunoprecipitation with Enhanced Visibility Affinity Beads

Zugehörige Produktkategorien
Antikörper-Proteinaufreinigung
Antikörper-Aufreinigungsharze und vorgepackte Säulen für Arbeitsabläufe im Labor-, Prozess- und Industriemaßstab.
Rekombinante/Fusions-Tag-Proteinaufreinigung
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Gele & Puffer für die Proteinelektrophorese
Vorgegossene Polyacrylamid-Proteingele, Laufpuffer und Handgussreagenzien für Polyacrylamid-Gele für die PAGE- und SDS-PAGE-Proteingelelektrophorese.
Proteinelektrophoresegel-Färbemittel
Hochempfindliche kolorimetrische und fluoreszierende Proteingelfärbungen, Fixierlösungen und Entfärbungsreagenzien für Polyacrylamidgele, Agarosegele sowie PVDF- und Nitrocellulosemembranen.
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Streptavidin- und Avidinharze und vorgepackte Säulen für die Aufreinigung von biotinylierten Proteinen und Antikörpern im kleinen bis großem Maßstab.
Reagenzien zur subzellulären Fraktionierung, Anreicherung und Abreicherung
Subzelluläre Fraktionierung und Proteinanreicherung ermöglichen die Identifizierung und Untersuchung von Proteinen in der Proteomforschung. Es steht eine große Auswahl an Kits für die Verarbeitung von Proben aus Zellen, Geweben, Bakterien, Pflanzen und anderen Probentypen für die subzelluläre Fraktionierung, Proteinextraktion, -abreicherung und -anreicherung zur Verfügung.
Ganzzell-Lysereagenzien & Verstärker
Proteinextraktionskits, Zelllysepuffer und Reagenzien für die Solubilisierung von Proteinen aus Bakterien-, Hefe- und Insektenkulturen sowie aus Pflanzen- und Säugerzellkulturen und Gewebeproben.
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Protease- und Phosphataseinhibitoren und -Cocktails zur Vermeidung von Proteolyse und Proteindephosphorylierung und zur Erhaltung des aktiven Zustands von Proteinen während der Zelllyse, Proteinextraktion und Probenvorbereitung.
Zugehörige Anwendungen
Proteinaufreinigung
Proteinaufreinigungsverfahren, Reagenzien und Protokolle zur Aufreinigung rekombinanter Proteine unter Anwendung von Methoden wie Ionenaustausch, Größenausschluss und Proteinaffinitätschromatographie.
Proteinexpression
Technologien zur Expression rekombinanter Proteine in E. coli-, Insekten-, Hefen- und Säuger-Expressionssystemen für die Grundlagenforschung und zur Unterstützung der Therapeutika- und Impfstoffproduktion.
Lyse & Proteinextraktion
Ein Überblick über Zelllyse- und Proteinextraktionsmethoden einschließlich Solubilisierung mittels Detergenzien, Gefrier-/Auftau-Lyse, osmotischer Schock, Ultraschall, enzymatische Zelllyse und mechanische Homogenisierungsmethoden wie Dounce, Polytron und Mörser und Pistille.
Protein-Pulldown
Pulldown-Assays, Reagenzien und Protokolle zur Untersuchung von in vitro Protein-Protein-Interaktionen unter Verwendung von Affinitäts- oder GST-Pulldown, Tandem Affinity Purification (TAP) und Co-Immunpräzipitationsmethoden.
Proteinkonzentration & Pufferaustausch
Überblick über Methoden zur Konzentrierung und Klärung von Proteinproben für Aufreinigungs-, Bioprocessing- und Analyseverfahren. Mit Protokollen und Videos zu Filtrations- und Ultrafiltrationstechniken, Proteinanreicherung, Entsalzung und Pufferaustausch mittels Dialyse, Diafiltration und Chromatographiemethoden.
Gelelektrophorese
Die Protein-Gelelektrophorese dient zur Trennung von Proteinen für die Aufreinigung, Charakterisierung und den Nachweis. Methoden wie native PAGE, SDS-PAGE, 2D-PAGE und isoelektrische Fokussierung (IEF) werden in Vorbereitung für Downstream-Anwendungen wie Western Blots, Massenspektrometrie und Proteomanalyse eingesetzt.
Western Blotting
Ein Überblick über die Grundsätze und Anwendungen des Western Blotting zum Nachweis von Proteinen. Enthält Links zu detaillierten Protokollen, Videos und anderen Ressourcen für die Proteinextraktion, die Gelelektrophorese, den Transfer auf PVDF- oder Nitrozellulose-Membranen sowie chemilumineszente, kolorimetrische und Fluoreszenznachweisverfahren.
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