P6140
Peroxidase aus Meerrettich
Type X, ammonium sulfate suspension
Synonym(e):
Donor:hydrogen-peroxide oxidoreductase, Meerrettichperoxidase
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About This Item
Empfohlene Produkte
Biologische Quelle
horseradish
Qualitätsniveau
Typ
Type X
Form
ammonium sulfate suspension
Spezifische Aktivität
≥225 units/mg protein (biuret, using pyrogallol)
Mol-Gew.
~44 kDa
Konzentration
≥1.0 mg/mL
Extinktionsverhältnis
RZ 2.5-3.5
Lagertemp.
2-8°C
InChI
1S/H2O3/c1-3-2/h1-2H
InChIKey
JSPLKZUTYZBBKA-UHFFFAOYSA-N
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Allgemeine Beschreibung
Horseradish peroxidase (HRP) wird aus Meerrettich (Amoracia rusticana) Wurzeln isoliert und ist innerhalb der Peroxidasen der Gruppe der Ferroprotoporpyhrine zuzuordnen. HRP besteht aus einer einzelnen Polypeptidkette und entält vier Disulfidbrücken. Sie ist ein Glykoprotein mit einem Kohlenhydratanteil von 18%. Der Kohlenhydratanteil besteht aus Galactose, Arabinose, Xylose, Fucose, Mannose, Mannosamin und Galactosamin - in Mengenverhältnissen abhängig vom Isoenzym. Ihr Molekulargewicht (~44 kDa) setzt sich aus der Polypeptidkette (33,890 Daltons), dem Hemin plus Ca2+ (~700 Daltons) und der Glykosylierung (~9,400 Daltons) zusammen. Es existieren zumindest sieben Isoenzyme von HRP. Der isoelektrische Punkt von HRP ist in einem Bereich von pH 3 3.0 - 9.0.
Anwendung
Horseradish peroxidase (HRP) is isolated from horseradish roots (Amoracia rusticana). It is used in biochemistry applications such as western blots, ELISA and Immunohistochemistry. Horseradish peroxidase is used to amplify a weak signal and increase detectability of a target molecule, such as a protein. Product P6140 has been used to detect low density lipoprotein (LDL).
The enzyme from Sigma has been used while assessing the skin sensitization potential of pro-haptens. It has also been used to show that peroxidase (PO) activity and its heat stability correlate with the availability of free Ca2+ ions.
Biochem./physiol. Wirkung
HRP readily combines with hydrogen peroxide (H2O2) and the resultant [HRP-H2O2] complex can oxidize a wide variety of hydrogen donors. The optimal pH is 6.0-6.5 and the enzyme is most stable in the pH range of 5.0-9.0. HRP can be conjugated to antibodies by several different methods that include the use of glutaraldehyde, periodate oxidation, disulfide bonds, and also via amino- and thiol-directed cross-linkers. It is smaller and more stable than the enzyme labels, β-galactosidase and alkaline phosphatase. Hence, it is the most desired label. Also, its glycosylation leads to lower non-specific binding. It is also used for the determination of glucose and peroxides in solution. Sodium azide, cyanide, L-cystine, dichromate, ethylenethiourea, hydroxylamine, sulfide, vanadate, p-aminobenzoic acid, and Cd2+, Co2+, Cu2+, Fe3+, Mn2+, Ni2+, Pb2+ ions are found to inhibit its enzyme activity.
When incubated with a substrate, horseradish peroxidase produces a coloured, fluorimetric, or luminescent derivative of the labeled molecule, allowing quantification. Horseradish peroxidase has been shown to slightly reduce the level of inhibition in a cydAB mutant.
Einheitendefinition
Eine Pyrogalloleinheit bildet in 20 s bei einem pH-Wert von 6,0 und 20 °C 1 mg Purpurogallin aus Pyrogallol.
Physikalische Form
Crystalline suspension in 3.2 M (NH4)2SO4 solution containing potassium phosphate buffer, pH 6.0
Angaben zur Herstellung
Water may be used to dilute suspension if needed.
Hinweis zur Analyse
Die RZ (Reinheitszahl) ist das Absorptionsratio A403/A275 bestimmt bei 0.5-1.0 mg/ml in deionisiertem Wasser. Es ist ein Mass für den Hämingehalt, nicht für die Enzymaktivität. Selbst Zubereitungen mit hoher RZ können eine tiefe Enzymaktivität haben.
Preliminary studies indicate the presence of two basic and no acidic isoenzymes
Sonstige Hinweise
Weitere Informationen über Peroxidase finden Sie unter www.sigma-aldrich.com/enzymeexplorer.
Inhibitor
Produkt-Nr.
Beschreibung
Preisangaben
Substrat
Produkt-Nr.
Beschreibung
Preisangaben
Signalwort
Danger
H-Sätze
P-Sätze
Gefahreneinstufungen
Resp. Sens. 1
Lagerklassenschlüssel
11 - Combustible Solids
WGK
WGK 1
Persönliche Schutzausrüstung
Eyeshields, Gloves, type N95 (US)
Analysenzertifikate (COA)
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Artikel
Instructions for working with enzymes supplied as ammonium sulfate suspensions
Protokolle
Reinheitszahl (RZ) is the ratio of absorbance due to hemin (A403, Soret region) to absorbance due to protein (A275).
To standardize a procedure for the assay of Peroxidase using 2,2'-Azino-bis(3-Ethylbenzthiazoline-6-Sulfonic Acid) as a substrate.
This procedure is for the determination of Peroxidase enzymatic activity using Pyrogallol as the substrate.
Unser Team von Wissenschaftlern verfügt über Erfahrung in allen Forschungsbereichen einschließlich Life Science, Materialwissenschaften, chemischer Synthese, Chromatographie, Analytik und vielen mehr..
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