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DIG-High Prime DNA-Markierungs- und Detektions-Starterkit I

sufficient for 12 labeling reactions, sufficient for 24 blots, suitable for hybridization, suitable for Northern blotting, suitable for Southern blotting

• Synonym(e): DIG-System, DNA-Markierung
• UNSPSC-Code: 41105500

Eigenschaften

• Verwendung: sufficient for 12 labeling reactions; sufficient for 24 blots
• Qualitätsniveau: 100
• Verpackung: kit of 1 (7 components)
• Hersteller/Markenname: Roche
• Grünere Alternativprodukt-Eigenschaften: Designing Safer Chemicals; Learn more about the Principles of Green Chemistry.
• sustainability: Greener Alternative Product
• Methode(n): Northern blotting: suitable; Southern blotting: suitable; hybridization: suitable
• Grünere Alternativprodukt-Kategorie: , Aligned
• Lagertemp.: −20°C

Beschreibung

Allgemeine Beschreibung

Im DIG-High Prime DNA-Markierungs- und Detektions-Starterkit I wird Digoxigenin (DIG), ein Steroid-Hapten, zum Markieren von DNA-Sonden für die Hybridisierung und den anschließenden Farbnachweis durch ein Enzym-Immunoassay verwendet. Dieses Kit enthält eine gebrauchsfertige Blockierlösung, eine kombinierte Stammlösung von Nitroblau-Tetrazolium (NBT)/5-Brom-4-chlor-3-indolylphosphat (BCIP) und DIG Easy Hyb-Granulat. Die DIG-High Prime-Mischung enthält das stabilisierte Klenow-Fragment, Nukleotide, Primer und den Reaktionspuffer in einem einzigen, praktischen Reagenz. Das Probenmaterial kann bestehen aus: DNA-Fragmenten von mindestens 100 bp, linearisiertem Plasmid, Cosmid oder λ-DNA oder superspiralisierter DNA. Die ursprünglich von Feinberg und Vogelstein entwickelte DNA-Markierungsmethode „Random-Priming“ basiert auf der Hybridisierung von Oligonukleotiden aller möglichen Sequenzen zu der zu markierenden denaturierten DNA. Die eingesetzte DNA dient als Template für die Synthese von markierter DNA und wird während der Reaktion nicht abgebaut, sodass mit dieser Methode minimale Mengen der DNA (10 ng) markiert werden können. Bei dieser Methode wird der komplementäre DNA-Strang mittels der Klenow-Polymerase unter Verwendung der 3′-OH-Enden der zufälligen Oligonukleotide als Primer synthetisiert. Mit in der Reaktion vorhandenem Digoxigenin markierte, modifizierte Desoxyribonukleosidtriphosphate werden in den neu synthetisierten komplementären DNA-Strang integriert. Dies ist ein praktisches Kit für die Random-Priming-Markierung von DNA-Templates mit DIG-11-dUTP, alkalilabil, und für den Farbnachweis der DIG-markierten Hybride. Wir verpflichten uns, Ihnen umweltfreundlichere Alternativprodukte anzubieten, die mit einem oder mehreren der „12 Prinzipien der Grünen Chemie“ im Einklang stehen. Dieses Produkt wurde als sicherere Chemikalie entwickelt.  Das DIG-System wurde als empfindliche und kostengünstige Alternative zur radioaktiven Markierung im Nachweis von Nukleinsäuren entwickelt. Die Vielseitigkeit des DIG-Systems ist in zahlreichen Publikationen belegt. Die radioaktive Markierung stellt daher nicht mehr die einzige Option für die DNA-Markierung zur Hybridisierung dar.

Anwendung

Das DIG-High Prime DNA-Markierungs- und Detektions-Starterkit I wird in vielen verschiedenen Hybridisierungsmethoden eingesetzt:

• in Southern Blots
• in Northern Blots
• in Dot Blots
• in Kolonie- und Plaque-Hybridisierungen
• für alle Arten der Filter-Hybridisierung
• für den Nachweis von Genen in einfacher Kopienzahl in der genomischen Gesamt-DNA, selbst von Organismen von hoher Komplexität, z. B. von menschlichen, Gersten- und Weizenorganismen

DIG-markierte Sonden werden mit hoher Ausbeute innerhalb von einer Stunde bzw. nach der Inkubation über Nacht erzeugt.

Leistungsmerkmale und Vorteile

Wir verpflichten uns, Ihnen umweltfreundlichere Alternativprodukte anzubieten, die mit einem oder mehreren der „12 Prinzipien der Grünen Chemie“ im Einklang stehen. Dieses Produkt wurde als eine sicherere Chemikalie entwickelt. Das DIG-System wurde als eine empfindliche und kosteneffektive Alternative zur Nutzung von Radioaktivität für die Markierung und den Nachweis von Nukleinsäuren entwickelt. Die Vielseitigkeit des DIG-Systems ist in zahlreichen Publikationen belegt. Die radioaktive Markierung stellt daher nicht mehr die einzige Option für die Markierung von DNA zur Hybridisierung dar.

Verpackung

1 Kit mit 7 Komponenten.

Qualität

Funktion wurde in einem Dot Blot getestet.

Sonstige Hinweise

Nur für die Life-Science-Forschung. Nicht für den Einsatz in diagnostischen Verfahren vorgesehen.

Nur Kit-Komponenten

• DIG-High Prime 5x concentrated
• DIG-labeled Control DNA, pBR328 (linearized with Bam HI) 5 μg/ml
• DNA Dilution Buffer
• Anti-Digoxigenin-AP Conjugate antibody
• NBT/BCIP Stock Solution, concentrated
• Blocking Solution 10x concentrated
• DIG Easy Hyb Granules

Sicherheitshinweise

• Piktogramme: GHS07
• Signalwort: Warning
• H-Sätze: H315,H319
• P-Sätze: P264 - P280 - P302 + P352 - P332 + P313 - P337 + P313 - P362 + P364
• Gefahreneinstufungen: Eye Irrit. 2 - Skin Irrit. 2
• Lagerklassenschlüssel: 12 - Non Combustible Liquids
• WGK: WGK 3
• Flammpunkt (°F): does not flash
• Flammpunkt (°C): does not flash