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D4184

Sigma-Aldrich

Taq DNA polimerasi JumpStart™

without MgCl2

Sinonimo/i:

hot start DNA polymerase, hot start PCR

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About This Item

Numero MDL:
MFCD00166026
Codice UNSPSC:
12352204
NACRES:
NA.55

Livello qualitativo

300

Stato

liquid

impiego

sufficient for 1500 reactions
 sufficient for 250 reactions
 sufficient for 50 reactions

Caratteristiche

dNTPs included: no
hotstart

Concentrazione

2.5 units/μL

tecniche

PCR: suitable

Colore

colorless

input

purified DNA

Compatibilità

suitable for PCR

applicazioni

agriculture

Condizioni di spedizione

wet ice

Temperatura di conservazione

−20°C

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Descrizione generale

L′attività della Taq DNA polimerasi è inattivata dall′unione di tale enzima con JumpStart™ Taq, un anticorpo monoclonale che neutralizza la Taq DNA polimerasi. Grazie all′inattivazione esercitata dall′anticorpo, la procedura della reazione a catena della polimerasi (PCR) hot start risulta semplice ed efficiente. La PCR hot start può migliorare significativamente i risultati dell′amplificazione del DNA perché riduce la generazione di prodotti di amplificazione aspecifici e di artefatti dovuti a dimeri di primer. Quando usato nella PCR, il complesso JumpStart Taq DNA polimerasi è inattivo a bassa temperatura (ambiente). Quando la temperatura viene portata oltre i 70 °C, nella prima fase di denaturazione del processo di ciclizzazione, il complesso si dissocia e la polimerasi diviene completamente attiva.

Applicazioni

  • Per le amplificazioni della PCR che richiedono amplificazione aspecifica ridotta
  • Per PCR Multiplex
  • Per la riduzione dei dimeri dei primer
Il complesso JumpStart™ Taq DNA polimerasi è stato usato nelle seguenti applicazioni:
  • per l′amplificazione con PCR di DNA isolato da campioni di erbario
  • nella miscela di reazione della PCR per amplificazione casuale di DNA polimorfico (RAPD PCR)
  • per amplificare e rilevare una mutazione puntiforme nell'esone 19 di EGFR utilizzando specifiche linee cellulari tumorali
  • nella real-time PCR quantitativa
  • per l′amplificazione con PCR di stampi genomici complessi o di cDNA
  • per l′amplificazione con PCR di sequenze bersaglio a numero di copie molto basso
  • per amplificazioni con molti cicli termici (>35) di PCR e più coppie di primer nella stessa provetta di reazione

Caratteristiche e vantaggi

  • Riduce l′amplificazione aspecifica
  • Aumenta la specificità e la resa della PCR
  • Riduce le problematiche relative al tempo di allestimento associate ai metodi manuali o con cera Hot Start
  • Tempo di attivazione inferiore a un minuto

Confezionamento

Fornito con tampone di reazione 10× senza MgCl2. Include una provetta separata di 25 mM di MgCl2.
La Taq DNA polimerasi JumpStart è fornita con un tampone di reazione 10× disponibile con e senza MgCl2. Il tampone 10× senza magnesio include anche una provetta separata di 25 mM di MgCl2 per l′ottimizzazione.

Altre note

La Taq DNA polimerasi JumpStart di Sigma è un enzima hot start inattivato dall′anticorpo progettato per ridurre al minimo l′amplificazione aspecifica aumentando il rendimento target. Non appena la temperatura di reazione raggiunge i 70 °C, l′attività della Taq DNA polimerasi viene ripristinata e la PCR risultante presenta una specificità e una resa più elevate. Questo complesso anticorpo-enzima consente un semplice e pratico allestimento con un minore rischio di contaminazione rispetto alle tecniche hot-start manuali. L′enzima può essere incluso anche nella preparazione della miscela madre per ottenere una maggiore coerenza tra le reazioni.
Informazioni più dettagliate sugli enzimi JumpStart Taq sono disponibili all′indirizzo www.sigma-aldrich.com/hotstart.

Definizione di unità

Un′unità incorpora 10 nmol di dNTP totali in DNA precipitabile in acido in 30 minuti a 74 °C.

Note legali

L′utilizzo di questo prodotto è coperto da uno o più brevetti USA tra i seguenti e dalle corrispondenti richieste di brevetto al di fuori degli USA: US 8,404,464 e US 7,972,828. L′acquisto di questo prodotto include un′immunità limitata e non trasferibile dalle azioni giudiziarie ai sensi delle rivendicazioni di brevetto in corso.

Anticorpo concesso in licenza per l′uso nella ricerca in vitro ai sensi dei brevetti USA n. 5,338,671 e 5,587,287 e dei brevetti corrispondenti in altri paesi.
JumpStart is a trademark of Sigma-Aldrich Co. LLC

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