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NGLYFL-RO

Roche

N-Glicosidasi F

recombinant form of the gene from Flavobacterium meningosepticum

Sinonimo/i:

N-Glicosidasi F, Peptide-N-glicosidasi F, Peptide-N4-(acetil-β-glucosamminil)-asparagina ammidasi, [PNGASI F ; PEPTIDE-N-GLICOSIDASI F]

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About This Item

Classificazione EC (Enzyme Commission):
Codice UNSPSC:
12352204

Origine biologica

bacterial (Flavobacterium meningosepticum)

Livello qualitativo

Ricombinante

expressed in E. coli

Coniugato

(N-linked)

Saggio

≥90% (SDS-PAGE)

Stato

lyophilized

Attività specifica

>25000 units/mg protein

PM

35.5 kDa

Purificato mediante

electrophoresis

Confezionamento

pkg of 100 U (11365185001)
pkg of 250 U (11365193001)

Produttore/marchio commerciale

Roche

Condizioni di stoccaggio

(Keep container tightly closed in a dry and well-ventilated place.)

tecniche

activity assay: suitable

Colore

colorless

pH ottimale

7.0-8.0

Solubilità

water: soluble

Compatibilità

suitable for enzyme test

Attività estranea


Endoglycosidase F, none detected

a-Fucosidase, present
b-Galactosidase, present
b-N-Acetylhexosaminidase, present
dA(17h ≤100 units, present

Temperatura di conservazione

2-8°C

Descrizione generale

La N-glicosidasi F (PNGasi F) è un potente enzima che idrolizza il legame glicosilamminico. Essa contribuisce anche a generare un peptide privo di residui zuccherini e un oligosaccaride con un′unità di di-N-acetilchitobiosio.

La N-glicosidasi F, nota anche come PNGasi F, è un enzima asparagina amidasi che si ricava da Flavobacterium meningosepticum È diffusamente usato come strumento utile in proteomica per indagare ed analizzare i processi di N-glicosilazione.

Specificità

Idrolizza tutti i tipi di catene laterali di N-glicano da glicopeptidi e glicoproteine a meno che portino residui di fucosio con nucleo legato 1,3 αpresenti in glicoproteine di insetti e piante. Privi di attività proteolitiche contaminanti (x = H o zucchero/[i]) secondo le procedure attuali di controllo di qualità.

Applicazioni

La N-glicosidasi F è stata impiegata per la deglicosilazione delle N-glicoproteine

La N-glicosidasi F si è dimostrata in grado di liberare tutti i tipi di N-glicani legati ad asparagina, a condizione che il gruppo amminico e quello carbossilico siano impegnati in un legame peptidico e che l′oligosaccaride abbia la lunghezza minima pari ad una unità di chitobiosio. I prodotti di reazione sono ammoniaca, acido aspartico (nella catena peptidica) e l′oligosaccaride completo.
Nota: la N-glicosidasi F ricombinante è disponibile anche in soluzione.

Definizione di unità

Una unità è l′attività enzimatica che idrolizza 1 nmole di dansil fibrin glicopeptide o 0,2 nmoli di dansil fetuin glicoproteina entro 1 minuto a 37 °C e pH 7,8.

Stato fisico

Soluzione trasparente incolore dopo ricostituzione

Nota sulla preparazione

Condizioni di stoccaggio (soluzione di lavoro): Da 2 a 8 °C
La soluzione ricostituita è stabile fra 2 e 8 °C per almeno quattro settimane.

Ricostituzione

Dissolvere il contenuto rispettivamente in 0,1 mL di acqua ridistillata (confezione da 100 unità) o 0,25 mL di acqua bidistillata (250 unità per confezione) dà come risultato una concentrazione di 100 mM di tampone fosfato sodico, 25 mM di EDTA a pH 7,2.
Nota: La N-Glicosidasi F ricombinante è anche disponibile in soluzione al 50% di glicerolo.

Altre note

Esclusivamente per ricerche di life science. Non usare a scopo diagnostico.

Codice della classe di stoccaggio

13 - Non Combustible Solids

Classe di pericolosità dell'acqua (WGK)

WGK 2

Punto d’infiammabilità (°F)

does not flash

Punto d’infiammabilità (°C)

does not flash


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A L Tarentino et al.
Biochemistry, 24(17), 4665-4671 (1985-08-13)
Endo-beta-N-acetylglucosaminidase F (Endo F) and peptide:N-glycosidase F (PNGase F) were purified from cultures of Flavobacterium meningosepticum by ammonium sulfate precipitation followed by gel filtration on TSK HW-55(S). This system separated the two enzymes and provided PNGase F in a high

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