COLLB-RO
Roche
Collagenasi B
from Clostridium histolyticum
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About This Item
Prodotti consigliati
Origine biologica
Clostridium histolyticum
Livello qualitativo
Sterilità
non-sterile
Forma fisica
lyophilized
Confezionamento
pkg of 100 mg (11088807001)
pkg of 2.5 g (11088831001)
pkg of 500 mg (11088815001)
Produttore/marchio commerciale
Roche
Concentrazione
0.5-2.5 mg/mL
pH ottimale
6.0-8.0
applicazioni
sample preparation
Temperatura di conservazione
2-8°C
Descrizione generale
La collagenasi B è preparata da colture di Clostridium histolyticum per filtrazione, precipitazione con solfato di ammonio, dialisi e liofilizzazione. La collagenasi da Clostridium histolyticum è un enzima collagenolitico. Interagisce con sostanze di tipo collagene e causa la degradazione del collagene in piccoli peptidi. È molto usata nella disgregazione di vari tipi di tessuto (per esempio, polmonare, cardiaco, muscolare, osseo, adiposo, epatico, renale, cartilagineo, delle ghiandole mammarie, placentare, dei vasi sanguigni, cerebrale, tumorale) e per la preparazione di sospensioni monocellulari per implementare sistemi di coltura cellulari primari. La collagenasi B è raccomandata quando la resa e la vitalità sono importanti.
Specificità
La collagenasi degrada il collagene nativo. Clostripaina, enzimi simil-tripsina e proteasi neutre degradano anche altre proteine.
Applicazioni
La collagenasi da Clostridium Roche è stata usata per preparare cellule da molti tipi di tessuti come epatociti, adipociti, isole pancreatiche, cellule dei muscoli e dell′endotelio, ecc. Tuttavia la capacità di ogni lotto di enzima di attaccare un particolare tessuto si dovrebbe determinare empiricamente.
La collagenasi B è stata impiegata per la preparazione di cellule da aorta e tessuto di cancro colorettale di topo.
La collagenasi B è stata impiegata per la preparazione di cellule da aorta e tessuto di cancro colorettale di topo.
Specifiche
Attività enzimatica:
Attività collagenasi: >0,15 U/mg (secondo Wünsch) (+25 °C, 4-fenil-azobenzil-ossicarbonil-Pro-Leu-Gly-Pro-D-Arg come substrato)
Attività di contaminazione enzimatica: tripsina, clostripaina e attività proteolitica totale
La collagenasi B ha un′attività che va da normale ad alta e un′attività più alta della clostripaina media (solitamente >10 U/mg).
Inibitori:
Inibitori di collagenasi: EDTA, EGTA, Cis, His, DTT, 2-mercaptoetanolo
La collagenasi non è inibita da siero.
Inibitori MRP TLCK
Inibitori di tripsina: aprotinina, inibitore di tripsina (albume di uovo, soia), siero.
Attività collagenasi: >0,15 U/mg (secondo Wünsch) (+25 °C, 4-fenil-azobenzil-ossicarbonil-Pro-Leu-Gly-Pro-D-Arg come substrato)
Attività di contaminazione enzimatica: tripsina, clostripaina e attività proteolitica totale
La collagenasi B ha un′attività che va da normale ad alta e un′attività più alta della clostripaina media (solitamente >10 U/mg).
Inibitori:
Inibitori di collagenasi: EDTA, EGTA, Cis, His, DTT, 2-mercaptoetanolo
La collagenasi non è inibita da siero.
Inibitori MRP TLCK
Inibitori di tripsina: aprotinina, inibitore di tripsina (albume di uovo, soia), siero.
Definizione di unità
La collagenasi Roche è saggiata in unità Wünsch (1 μmoli di prodotto formate per minuto a +25 °C con substrato Wünsch).
Spesso l′attività della collagenasi è data in unità Mandl (1 μmoli di leucina liberate da collagene in 5 ore a +37 °C).
Purtroppo non c′è un fattore di conversione affidabile fra le due unità di attività perché l′unità Mandl dipende in parte dalla concentrazione delle proteasi contaminanti nella preparazione della collagenasi e questa è una variabile difficile da definire. Una preparazione di collagenasi più pura darebbe in realtà una attività specifica minore in unità Mandl rispetto ad una preparazione grezza. Le preparazioni da Clostridium in genere danno fattori di conversione circa 1:1800 (ad es., un particolare lotto di collagenasi da Clostridium conteneva circa 0,15 U/mg Wünsch e 250 U/mg Mandl).
Spesso l′attività della collagenasi è data in unità Mandl (1 μmoli di leucina liberate da collagene in 5 ore a +37 °C).
Purtroppo non c′è un fattore di conversione affidabile fra le due unità di attività perché l′unità Mandl dipende in parte dalla concentrazione delle proteasi contaminanti nella preparazione della collagenasi e questa è una variabile difficile da definire. Una preparazione di collagenasi più pura darebbe in realtà una attività specifica minore in unità Mandl rispetto ad una preparazione grezza. Le preparazioni da Clostridium in genere danno fattori di conversione circa 1:1800 (ad es., un particolare lotto di collagenasi da Clostridium conteneva circa 0,15 U/mg Wünsch e 250 U/mg Mandl).
Nota sulla preparazione
Attivatore: Ca2+
Concentrazione di lavoro: da 0,5 a 2,5 mg/mL
Condizioni di stoccaggio (soluzione di lavoro): da -15 a -25 °C
Roche raccomanda di ricostituire solo la quantità di liofilizzato per l′uso immediato. La soluzione ricostituita può essere conservata da -15 a -25 °C per almeno una settimana. Si raccomanda di evitare cicli ripetuti di congelamento/scongelamento perché l′attività diminuisce dopo la ricostituzione.
Concentrazione di lavoro: da 0,5 a 2,5 mg/mL
Condizioni di stoccaggio (soluzione di lavoro): da -15 a -25 °C
Roche raccomanda di ricostituire solo la quantità di liofilizzato per l′uso immediato. La soluzione ricostituita può essere conservata da -15 a -25 °C per almeno una settimana. Si raccomanda di evitare cicli ripetuti di congelamento/scongelamento perché l′attività diminuisce dopo la ricostituzione.
Ricostituzione
Ricostituzione in qualsiasi soluzione salina bilanciata (per es.: HBSS)
Altre note
Esclusivamente per ricerche di life science. Non usare a scopo diagnostico.
Avvertenze
Danger
Indicazioni di pericolo
Consigli di prudenza
Classi di pericolo
Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3
Organi bersaglio
Respiratory system
Codice della classe di stoccaggio
11 - Combustible Solids
Classe di pericolosità dell'acqua (WGK)
WGK 1
Punto d’infiammabilità (°F)
does not flash
Punto d’infiammabilità (°C)
does not flash
Certificati d'analisi (COA)
Cerca il Certificati d'analisi (COA) digitando il numero di lotto/batch corrispondente. I numeri di lotto o di batch sono stampati sull'etichetta dei prodotti dopo la parola ‘Lotto’ o ‘Batch’.
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