MABS1252

Anticorpo anti-policistina-1, clone E4 (5F4D2)

clone E4 (5F4D2), from mouse

• Sinonimo/i: Polycystin-1, Autosomal dominant polycystic kidney disease 1 protein
• Codice UNSPSC: 12352203
• eCl@ss: 32160702
• NACRES: NA.41

Proprietà

• Origine biologica: mouse
• Livello qualitativo: 100
• Forma dell’anticorpo: purified immunoglobulin
• Tipo di anticorpo: primary antibodies
• Clone: E4 (5F4D2), monoclonal
• Reattività contro le specie: human, mouse, rat
• tecniche: immunocytochemistry: suitable; immunohistochemistry: suitable (paraffin); immunoprecipitation (IP): suitable; western blot: suitable
• Isotipo: IgG1κ
• N° accesso NCBI: NP_001009944.2
• N° accesso UniProt: P98161
• Condizioni di spedizione: wet ice
• modifica post-traduzionali bersaglio: unmodified
• Informazioni sul gene: human ... PKD1(5310)

Descrizione

Descrizione generale

La policistina-1 (UniProt P98161; conosciuta anche come proteina 1 della malattia del rene policistico autosomica dominante) nell'uomo è codificata dal PKD1 (Gene ID 5310). Il cilio primario è un organulo che si trova all'interno dei microtubuli caratterizzato da sensibilità meccanica e chimica e che coordina numerosi pathway cellulari coinvolti nello sviluppo e nell'omeostasi dei tessuti, come le vie di segnalazione (Hh), PDGFRα e Wnt. Difetti della funzione ciliare causano svariati tipi di ciliopatie, come la malattia del rene policistico autosomica dominante (ADPKD). La policistina-1 (PC1) e la policistina-2 (PC2) sono grandi proteine transmembrana che colocalizzano nel cilio primario, dove hanno un ruolo importante nella trasduzione del segnale basato sul calcio. PC1 è un recettore di adesione accoppiato a proteina G atipico (aGPCR) caratterizzato da 11-domini transmembrana. PC1 subisce una scissione autoproteolitica in cis a livello di GPS, il sito proteolitico presente nella regione juxtamembrana di GPCR (aa 3012-3061), in modo dipendente dallo stadio di sviluppo: infatti nel rene in stadio embrionale iniziale PC1 è presente prevalentemente in forma non scissa ma viene prevalentemente scisso dopo la nascita. La scissione a livello di GPS produce una forma eterodimerica di PC1, il cui frammento N-terminale (NTF) rimane associato in modo non covalente al frammento C-terminale (CTF) transmembrana. Topi transgenici che esprimono PC1 non scindibile sviluppano la malattia del rene policistico in fase post-natale.

Specificità

Il clone E4 (noto anche come clone 5F4D2) riconosce il motivo extracellulare della policistina-1, costituito dal dominio della lectina di tipo C, e ha determinato l'immunocolorazione di cellule murine wild-type per PKD1 ma non di quelle knockout per questo gene (Kim, H., et al. (2014). Nat. Commun. 5:5482).

Immunogeno

Dominio della lectina di tipo C della policistina-1 umana ricombinante marcato con tag FLAG.

Epitopo: dominio della lectina di tipo C.

Applicazioni

Analisi immunoistochimica: un lotto rappresentativo di questo anticorpo diluito 1:50 ha permesso di rivelare l'immunoreattività della policistina-1 in sezioni di tessuto renale di topo.
Immunoprecipitazione: Con un lotto rappresentativo è stata ottenuta l'immunoprecipitazione della policistina-1 da lisati di tessuto polmonare di topo (per gentile concessione del Dr. Feng Qian, University of Maryland School of Medicine, Baltimore, MD, Stati Uniti).
Western blotting: un lotto rappresentativo ha rivelato l'espressione esogena della policistina-1 in lisati di cellule HEK transfettate con il cDNA di PKD1 umano o di topo, ma non in lisati di cellule HEK sottoposte a transfezione senza cDNA (mock) (per gentile concessione del Dr. Feng Qian, University of Maryland School of Medicine, Baltimore, MD, Stati Uniti).
Western blotting: un lotto rappresentativo ha rivelato il frammento N-terminale (NTF) della policistina-1 (PC1), che è prodotto dalla scissione autoproteolitica in cis a livello del dominio GPS, in lisati di cellule Hek293 transfettate con il cDNA di PKD1 full length ma non in lisati di cellule HEK sottoposte a transfezione mock (Kim, H., et al. (2014). Nat. Commun. 5: 5482).
Immunocitochimica: tramite immunocitochimica con doppia fluorescenza, un lotto rappresentativo e un anticorpo anti-Arl13b hanno determinato la co-colorazione del cilio primario all'interno di fibroblasti embrionali murini (mMEF) e di cellule derivate dal dotto collettore (CD) fissate in formaldeide 4% e permeabilizzate con Triton X-100 0,1%. Non è stata evidenziata immunoreattività della policistina-1 nei mMEF knockout per PDK1 Kim, H., et al. (2014). Nat. Commun. 5:5482).

Categoria di ricerca
Trasduzione del segnale

L'anticorpo anti-policistina-1, clone E4 (5F4D2), si usa per rivelare tale proteina nelle analisi di immunoistochimica (paraffina), immunoprecipitazione, Western blotting e immunocitochimica.

Sottocategoria di ricerca
Trasduzione del segnale nell'ambito dello sviluppo

Qualità

Valutata mediante immunoistochimica in tessuto renale umano.

Immunoistochimica: una diluizione 1:250 di questo anticorpo ha rilevato immunoreattività della policistina-1 in tessuto renale umano.

Descrizione del bersaglio

Pesi molecolari calcolati del frammento N-terminale full length/dopo scissione autoproteolitica a livello di GPS: 460,3/325,0 kDa (isoforma 1), 459,1/324,0 kDa (isoforma 2), 460,2/325,0 kDa (isoforma 3).

Stato fisico

Formato: purificato

IgG1κ monoclonali purificate di topo in tampone contenente Tris-glicina 0,1 M (pH 7,4), NaCl 150 mM con azoturo di sodio 0,05%.

Purificato con proteina G

Stoccaggio e stabilità

Stabile per 1 anno a 2-8 °C dalla data di ricevimento.

Altre note

Concentrazione: fare riferimento alla scheda tecnica specifica del lotto.

Esclusione di responsabilità

Salvo diversa indicazione nel nostro catalogo o in altra documentazione fornita dall′azienda insieme al prodotto, i nostri prodotti sono destinati esclusivamente a scopi di ricerca e non devono essere utilizzati per altre finalità, inclusi a titolo esemplificativo ma non esaustivo, fini commerciali non autorizzati, applicazioni diagnostiche in vitro, usi terapeutici ex vivo o in vivo o qualsiasi altro tipo di assunzione o applicazione rivolta agli esseri umani o agli animali.

Informazioni sulla sicurezza

• Codice della classe di stoccaggio: 12 - Non Combustible Liquids
• Classe di pericolosità dell'acqua (WGK): WGK 1
• Punto d’infiammabilità (°F): Not applicable
• Punto d’infiammabilità (°C): Not applicable