MABE1084
Anticorpo anti-complessi covalenti topoisomerasi I/DNA, clone 1.1A
clone 1.1A, from mouse
Sinonimo/i:
Topoisomerase I-DNA covalent complex, DNA topoisomerase 1-DNA covalent complex, Topo I-DNA covalent complex, TopoI cc, TopoIcc
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About This Item
Codice UNSPSC:
12352203
eCl@ss:
32160702
NACRES:
NA.41
Prodotti consigliati
Origine biologica
mouse
Livello qualitativo
Forma dell’anticorpo
purified antibody
Tipo di anticorpo
primary antibodies
Clone
1.1A, monoclonal
Reattività contro le specie
human, mouse
tecniche
ELISA: suitable
dot blot: suitable
flow cytometry: suitable
immunocytochemistry: suitable
Isotipo
IgG2bκ
N° accesso NCBI
N° accesso UniProt
Condizioni di spedizione
wet ice
modifica post-traduzionali bersaglio
unmodified
Informazioni sul gene
human ... TOP1(7150)
Descrizione generale
La DNA topoisomerasi I (EC 5.99.1.2; UniProt P11387; nomi alternativi: DNA topoisomerasi 1, Topo I) nell′uomo è codificata dal gene TOP1 (o TOPI) (Gene ID 7150). La topoisomerasi I rilassa il DNA a doppio filamento (dsDNA) alleviando la tensione torsionale di questa molecola. La sua azione si esplica attraverso il taglio selettivo di uno dei due filamenti del dsDNA per consentire all'estremità 3′-idrossi tagliata di ruotare intorno al filamento non tagliato, mentre l'estremità 5′-fosforilica del DNA tagliato forma un legame fosfodiesterico covalente con un residuo di tirosina sulla topoisomerasi I. Quindi, l'estremità 3′-idrossi tagliata attacca il legame fosfodiesterico DNA-topoisomerasi I, promuovendo la ligazione del filamento di DNA tagliato. Quindi, a ogni ciclo di taglio/ligazione catalizzato dalla topoisomerasi I viene rimosso un superavvolgimento. Le camptotecine sono molto utilizzate per il trattamento del cancro; questi farmaci si intercalano al DNA nel sito attivo della topoisomerasi I, inibendo la fase di ri-ligazione dell'enzima e spostando l'equilibrio verso i complessi covalenti topoisomerasi I-DNA e non topoisomerasi I libera e DNA. L'interazione di questi complessi covalenti topo I/DNA stabilizzati dai farmaci con le forche di replicazione in avanzamento o con i complessi di trascrizione provoca ulteriori danni al DNA e, infine, la morte cellulare.
Specificità
Il clone 1.1A riconosce specificamente i complessi covalenti topoisomerasi I/DNA, ma non la topoisomerasi I libera, non complessata con il DNA, individuando la fosforilazione in Tyr723 nel sito attivo della topoisomerasi I (Patel, A.G., et al, (2016). 44(6):2816-2826).
Immunogeno
Epitopo: Topo I con pTyr723.
Peptide lineare coniugato con KLH corrispondente alla sequenza della topoisomerasi I umana con Tyr723 fosforilata che si lega al sito attivo sul DNA.
Applicazioni
Categoria di ricerca
Epigenetica & funzione nucleare
Epigenetica & funzione nucleare
Citometria a flusso: questo anticorpo alla concentrazione di 1,0 µg/mL ha permesso di rivelare i complessi covalenti tra topoisomerasi I/DNA nelle cellule di cancro del colon umano HCT116 trattate con Topotecan.
Immunocitochimica: un lotto rappresentativo di questo anticorpo alla concentrazione di 10 µg/mL ha permesso di rivelare i complessi covalenti topoisomerasi I/DNA in cellule di carcinoma polmonare umano A549 trattate con Topotecan (gentile concessione del Dr. Scott H. Kaufmann, Mayo Clinic, Rochester, MN, USA).
Citometria a flusso: un lotto rappresentativo di questo anticorpo alla concentrazione di 10 µg/mL ha permesso di rivelare i complessi covalenti topoisomerasi I/DNA in cellule di cancro del colon umano HCT116 trattate con Topotecan (gentile concessione del Dr. Scott H. Kaufmann, Mayo Clinic, Rochester, MN, USA).
Slot Blot: un lotto rappresentativo di questo anticorpo ha rivelato i complessi covalenti topoisomerasi I/DNA, stabilizzati o meno da Topotecan (TPT), ma non la topoisomerasi I libera (non complessata con il DNA), utilizzando il metodo di slot blot su lisati frazionati con gradiente di CsCl2 ottenuti da cellule A549 trattate e non trattate con TPT (Patel, A.G., et al, (2016). 44(6):2816-2826).
Slot Blot: un lotto rappresentativo ha rivelato un aumento dei complessi covalenti topoisomerasi I/DNA dipendente dalla dose di TPT in lisati ottenuti da cellule A549 e HCT116 trattate con TPT (Patel, A.G., et al, (2016). 44(6):2816-2826).
Slot Blot: un lotto rappresentativo ha rivelato i complessi covalenti topoisomerasi I/DNA stabilizzati in lisati di cellule A549 trattate con camptotecine (CPT, SN-38, TPT) o indenoisochinoline (NSC 314622, NSC 725776, NSC 743400), ma non con analoghi nucleosidici (citarabina e gemcitabina) (Patel, A.G., et al, (2016). 44(6):2816-2826).
ELISA: un lotto rappresentativo ha permesso di rivelare il peptide immunogeno corrispondente alla sequenza della topoisomerasi I umana con Tyr723 fosforilata che si lega al sito attivo sul DNA ma non il peptide con Tyr273 fosforilata con il metodo ELISA diretto (non a sandwich) (Patel, A.G., et al, (2016). 44(6):2816-2826).
Immunocitochimica: a seguito del trattamento con Topotecan di cellule A549, con un lotto rappresentativo di questo anticorpo è stato evidenziato un drastico aumento dose-dipendente dei complessi covalenti topoisomerasi I/DNA in sede extra-nucleolare, mentre nelle cellule non trattate, i complessi, in numero minore, risultavano localizzati solo nei nucleoli (Patel, A.G., et al, (2016). 44(6):2816-2826).
Immunocitochimica: un lotto rappresentativo ha identificato una formazione temporalmente e spazialmente distinta dei foci (piccole aree di colorazione puntiforme) nucleari dei complessi covalenti topoisomerasi I/DNA rispetto a quelli di γH2AX e Rad51 in cellule A549 trattate o meno con TPT (Patel, A.G., et al, (2016). 44(6):2816-2826).
Immunocitochimica: un lotto rappresentativo di questo anticorpo alla concentrazione di 10 µg/mL ha permesso di rivelare i complessi covalenti topoisomerasi I/DNA in cellule di carcinoma polmonare umano A549 trattate con Topotecan (gentile concessione del Dr. Scott H. Kaufmann, Mayo Clinic, Rochester, MN, USA).
Citometria a flusso: un lotto rappresentativo di questo anticorpo alla concentrazione di 10 µg/mL ha permesso di rivelare i complessi covalenti topoisomerasi I/DNA in cellule di cancro del colon umano HCT116 trattate con Topotecan (gentile concessione del Dr. Scott H. Kaufmann, Mayo Clinic, Rochester, MN, USA).
Slot Blot: un lotto rappresentativo di questo anticorpo ha rivelato i complessi covalenti topoisomerasi I/DNA, stabilizzati o meno da Topotecan (TPT), ma non la topoisomerasi I libera (non complessata con il DNA), utilizzando il metodo di slot blot su lisati frazionati con gradiente di CsCl2 ottenuti da cellule A549 trattate e non trattate con TPT (Patel, A.G., et al, (2016). 44(6):2816-2826).
Slot Blot: un lotto rappresentativo ha rivelato un aumento dei complessi covalenti topoisomerasi I/DNA dipendente dalla dose di TPT in lisati ottenuti da cellule A549 e HCT116 trattate con TPT (Patel, A.G., et al, (2016). 44(6):2816-2826).
Slot Blot: un lotto rappresentativo ha rivelato i complessi covalenti topoisomerasi I/DNA stabilizzati in lisati di cellule A549 trattate con camptotecine (CPT, SN-38, TPT) o indenoisochinoline (NSC 314622, NSC 725776, NSC 743400), ma non con analoghi nucleosidici (citarabina e gemcitabina) (Patel, A.G., et al, (2016). 44(6):2816-2826).
ELISA: un lotto rappresentativo ha permesso di rivelare il peptide immunogeno corrispondente alla sequenza della topoisomerasi I umana con Tyr723 fosforilata che si lega al sito attivo sul DNA ma non il peptide con Tyr273 fosforilata con il metodo ELISA diretto (non a sandwich) (Patel, A.G., et al, (2016). 44(6):2816-2826).
Immunocitochimica: a seguito del trattamento con Topotecan di cellule A549, con un lotto rappresentativo di questo anticorpo è stato evidenziato un drastico aumento dose-dipendente dei complessi covalenti topoisomerasi I/DNA in sede extra-nucleolare, mentre nelle cellule non trattate, i complessi, in numero minore, risultavano localizzati solo nei nucleoli (Patel, A.G., et al, (2016). 44(6):2816-2826).
Immunocitochimica: un lotto rappresentativo ha identificato una formazione temporalmente e spazialmente distinta dei foci (piccole aree di colorazione puntiforme) nucleari dei complessi covalenti topoisomerasi I/DNA rispetto a quelli di γH2AX e Rad51 in cellule A549 trattate o meno con TPT (Patel, A.G., et al, (2016). 44(6):2816-2826).
L′anticorpo anti-complessi covalenti topoisomerasi I/DNA, clone 1.1A, riconosce i complessi covalenti tra topoisomerasi I e DNA e trova applicazione in immunocitochimica, citometria a flusso, Dot Blot, ELISA.
Sottocategoria di ricerca
Biologia della cromatina
Biologia della cromatina
Qualità
Valutata mediante immunocitochimica in cellule ci carcinoma polmonare umano A549 trattate con Topotecan.
Immunocitochimica: questo anticorpo alla concentrazione di 10 µg/mL ha permesso di rivelare i complessi covalenti tra topoisomerasi I e DNA nelle cellule di carcinoma polmonare umano A549 trattate con Topotecan.
Immunocitochimica: questo anticorpo alla concentrazione di 10 µg/mL ha permesso di rivelare i complessi covalenti tra topoisomerasi I e DNA nelle cellule di carcinoma polmonare umano A549 trattate con Topotecan.
Descrizione del bersaglio
Calcolato a 90,7 kDa.
Stato fisico
Formato: purificato
IgG2bκ purificate di topo in tampone contenente Tris-glicina 0,1 M (pH 7,4), NaCl 150 mM con azoturo di sodio 0,05%.
Purificato con proteina G.
Stoccaggio e stabilità
Stabile per 1 anno a 2-8 °C dalla data di ricevimento.
Altre note
Concentrazione: fare riferimento alla scheda tecnica specifica del lotto.
Esclusione di responsabilità
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Codice della classe di stoccaggio
12 - Non Combustible Liquids
Classe di pericolosità dell'acqua (WGK)
WGK 1
Punto d’infiammabilità (°F)
Not applicable
Punto d’infiammabilità (°C)
Not applicable
Certificati d'analisi (COA)
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