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ChIPAb+ REST - anticorpo per ChIP convalidato e set di primer

from rabbit

• Sinonimo/i: Chip Antibody and primer set, Neural-restrictive silencer factor ChIP, Neural-restrictive silencer factor, RE1-silencing transcription factor, X2 box repressor, neuron restrictive silencer factor, repressor binding to the X2 box, RE1-silencing transcription factor ChIP, REST ChIP, X2 box repressor ChIP
• Codice UNSPSC: 12352203
• eCl@ss: 32160702
• NACRES: NA.32

Proprietà

• Origine biologica: rabbit
• Livello qualitativo: 100
• Forma dell’anticorpo: purified immunoglobulin
• Clone: polyclonal
• Reattività contro le specie: human, rat, mouse
• Produttore/marchio commerciale: ChIPAb+; Upstate^®
• tecniche: ChIP: suitable; western blot: suitable
• N° accesso NCBI: NP_005603
• N° accesso UniProt: Q13127
• Condizioni di spedizione: dry ice

Descrizione

Descrizione generale

Tutti gli anticorpi ChIPAb+ vengono singolarmente convalidati per confermare la precipitazione della cromatina, ogni lotto, sempre. Il set di anticorpi ChIPAb+ include primer di controllo (ogni lotto testato mediante qPCR) per convalidare biologicamente i tuoi risultati di IP in un contesto locus-specifico. Per permettere ai ricercatori di convalidare i protocolli di ChIP quando usano i nostri anticorpi nel loro specifico contesto cromatinico, si forniscono anche il protocollo della qPCR e le sequenze dei primer. Ogni set include anche un anticorpo di controllo negativo per verificare la specificità della reazione di ChIP.

Il set ChIPAb+ REST include l′anticorpo anti-REST, IgG di coniglio normale e i primer di controllo che amplificano una regione di 89 pb del promotore del gene Snap25 umano. L′anticorpo anti-REST e i controlli negativi sono forniti in un formato di reazione "per ChIP" scalabile e si possono usare per convalidare funzionalmente la precipitazione della cromatina associata a REST.

Specificità

Riconosce REST, PM atteso: 125 kDa, PM osservato: 200 kDa.

Immunogeno

Epitopo: a.a. 801-1097

L′anticorpo purificato anti-REST è indotto contro una proteina di fusione con GST corrispondente agli amminoacidi 801-1097 della proteina REST umana.

Applicazioni

Categoria di ricerca
Epigenetica & funzione nucleare

Immunoprecipitazione della cromatina:
la cromatina sonicata preparata da cellule HeLa (equivalenti a 4e6 cellule/IP) è stata immunoprecipitata usando 4 µg di IgG di coniglio normale (N° Comp. PP64B) o 4 µg di anti-REST (N° Comp.CS207378) e Magna ChIP HiSens (N° Cat. 17-10460). La riuscita dell′immunoprecipitazione dei frammenti di DNA associati a REST è stata confermata mediante qPCR utilizzando i primer per ChIP, gene Snap25 umano (N° Comp. CS207379) come locus positivo e gene CDC25 come locus negativo. Figura 2: I dati sono presentati come percentuale di input di ciascun campione IP rispetto all′input di cromatina per ogni amplicone e campione ChIP come indicato.

Analisi di Western blotting:
il lisato di cellule HEK293 umane (30 ug) è stato risolto mediante elettroforesi, trasferito su una membrana di PVDF e analizzato con l′anticorpo anti-REST (diluizione 1:1.000). Le proteine sono state visualizzate mediante un anticorpo secondario coniugato con HRP e un sistema di rivelazione per chemiluminescenza. Dati per gentile concessione di Glen Corson del laboratorio di Gail Mandel presso la Oregon Health and Sciences University, Portland, OR, USA.
REST ha un peso molecolare atteso di 125 kDa. Dimensioni visualizzate a ~200 kDa.

Questa pratica combinazione di anticorpo ChIPAb+ REST convalidato & set di primer include l′anticorpo & gli specifici primer di controllo per la PCR.

Sottocategoria di ricerca
Biologia della cromatina

Istoni

Confezionamento

25 analisi per set. Uso raccomandato: ~2 μg di anticorpo per una immunoprecipitazione di cromatina (a seconda del contesto biologico).

Qualità

Immunoprecipitazione della cromatina:
la cromatina sonicata preparata da cellule HeLa (equivalenti a 4e6 cellule/IP) è stata immunoprecipitata usando 4 µg di IgG di coniglio normale (N° Comp. PP64B) o 4 µg di anti-REST (N° Comp. CS207378) e Magna ChIP^® HiSens (N° Cat. 17-10460). La riuscita dell′immunoprecipitazione dei frammenti di DNA associati a REST è stata confermata mediante qPCR utilizzando i primer per ChIP, gene Snap25 umano.

Descrizione del bersaglio

Atteso a 120 kDa, visualizzato a 200 kDa

Stato fisico

Anti-REST (policlonale di coniglio). Una microprovetta contenente 100 µL (1,0 mg/mL) di Ig policlonali purificate di coniglio in tampone contenente tampone fosfato 0,014 M, pH 7,6, NaCl 0,175 M con azoturo di sodio 0,07% e glicerolo 30%. Conservare a -20°C.

IgG di coniglio normale. Una microprovetta contenente 125 µg di IgG di coniglio in 125 µL di tampone per la conservazione contenente azoturo di sodio 0,05%. Conservare a -20°C.

Primer per ChIP, gene Snap25 umano. Una microprovetta contenente 75 μL di ciascun primer specifico 5 μM per la regione del promotore del gene Snap25 umano. Conservare a -20 °C.
FOR: AGA CTC CTT TGC AGA CAA TTT CCT
REV: CAA CAC AGA AGA TTT CCA CAA GTA GAC

Formato: purificato

Stoccaggio e stabilità

Stabile per 1 anno dalla data di ricezione a -20 °C. Raccomandazioni per la manipolazione: Una volta ricevuto il prodotto, prima di rimuovere il tappo, centrifugare la vial e mescolare delicatamente la soluzione. Suddividere in aliquote in provette per microcentrifuga e conservare a -20°C. Evitare ripetuti cicli di congelamento e scongelamento che potrebbero danneggiare le IgG e compromettere le prestazioni del prodotto.

Risultati analitici

Controllo
Include IgG di coniglio normale e i primer specifici per il gene Snap25 umano

Note legali

MAGNA CHIP is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

UPSTATE is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Esclusione di responsabilità

Salvo diversa indicazione nel nostro catalogo o in altra documentazione fornita dall′azienda insieme al prodotto, i nostri prodotti sono destinati esclusivamente a scopi di ricerca e non devono essere utilizzati per altre finalità, inclusi a titolo esemplificativo ma non esaustivo, fini commerciali non autorizzati, applicazioni diagnostiche in vitro, usi terapeutici ex vivo o in vivo o qualsiasi altro tipo di assunzione o applicazione rivolta agli esseri umani o agli animali.

Informazioni sulla sicurezza

• Codice della classe di stoccaggio: 10 - Combustible liquids