06-427

Anticorpo anti-fosfotirosina

Upstate^®, from rabbit

• Codice UNSPSC: 12352203
• eCl@ss: 32160702
• NACRES: NA.41

Proprietà

• Origine biologica: rabbit
• Livello qualitativo: 100
• Forma dell’anticorpo: affinity purified immunoglobulin
• Tipo di anticorpo: primary antibodies
• Clone: polyclonal
• Purificato mediante: affinity chromatography
• Reattività contro le specie: human
• Reattività contro le specie (prevista in base all’omologia): all (based on 100% sequence homology)
• Produttore/marchio commerciale: Upstate^®
• tecniche: immunoprecipitation (IP): suitable; western blot: suitable
• Condizioni di spedizione: wet ice
• modifica post-traduzionali bersaglio: acetylation (test)
• Informazioni sul gene: human ... PID1(55022)

Descrizione

Descrizione generale

È stato dimostrato che la fosforilazione di specifici residui di tirosina rappresenta un meccanismo primario di trasduzione del segnale durante la mitogenesi normale, la progressione del ciclo cellulare e la trasformazione oncogenica. Il suo ruolo in altri processi, come la differenziazione e la comunicazione tramite giunzioni gap, è oggetto di ricerca attiva e in divenire. Gli anticorpi che riconoscono specificamente i residui di tirosina fosforilata si sono dimostrati molto preziosi per studiare le proteine fosforilate in tirosina e le vie biochimiche in cui intervengono.

Specificità

L′immunoreattività dell'anticorpo è completamente inibita dall'uso di fenilfosfato 100 mM, un analogo della fosfotirosina. L'anticorpo anti-fosfotirosina è purificato mediante cromatografia di immunoaffinità utilizzando un gel con doppio fosfo-peptide o un gel con BSA-fosfotirosina. L'immunoreattività della fosfotirosina presente nell′antisiero viene completamente immunoadsorbita, indipendentemente dal tipo di gel usato per la purificazione, il che indica che l'anticorpo non è sequenza-specifico ma è specifico per i residui di fosfotirosina.

Immunogeno

Per ottenere anticorpi policlonali anti-fosfotirosina ad ampio spettro, i conigli sono stati immunizzati con tre immunogeni fosforilati: (1) una fosfotirosina legata covalentemente a KLH; (2) il fosfopeptide presente nella regione C-terminale della proteina c-Src (TS-T-E-P-Q-pY-Q-P-G-E-N-L; N° Cat. 12-218) legato covalentemente a KLH; (3) un fosfopeptide associato ad alta attività tirosin-chinasica nei linfociti umani (R-R-L-I-E-D-A-E-pY-A-A-R-G; N° Cat. 12-217) legato covalentemente a KLH. Tutti i fosfopeptidi aptenici fungono da substrato forte per le tirosin-fosfatasi e fanno parte di due kit colorimetrici con tirosin-fosfatasi prodotti dall′azienda Upstate, Inc. (N° Cat. 17-125, 17-126).

Applicazioni

Categoria di ricerca
Trasduzione del segnale

L′anticorpo anti-fosfotirosina rileva il livello delle tirosine fosforilate ed è stato descritto in letteratura e convalidato per l'uso in IP & WB.

Sottocategoria di ricerca
Modificazioni post-traduzionali generali

Trasduzione del segnale in neuroscienza

Western blotting: una diluizione 1:500 di un lotto rappresentativo ha rivelato la proteina fosfotirosina in 10 µg di lisato di cellule A431 trattate con EGF e lambda fosfatasi.
Immunoprecipitazione: 5 µL di un lotto rappresentativo hanno determinato l′immunoprecipitazione della fosfotirosina da 0,5 mg di lisato di cellule trattate con EGF

Qualità

Valutata mediante Western blotting su lisato di cellule A431 trattate con EGF.

Western blotting: una diluizione 1:500 di questo anticorpo ha rivelato la proteina fosfotirosina in 10 µg di lisato di cellule A431 trattate con EGF.

Descrizione del bersaglio

Vari

Stato fisico

Anticorpo policlonale purificato di coniglio in tampone contenente Tris-glicina 0,1 M (pH 7,4), NaCl 150 mM con azoturo di sodio 0,05%.

Purificazione per affinità

Stoccaggio e stabilità

Stabile per 1 anno a 2-8 °C dalla data di ricevimento.

Risultati analitici

Controllo
Controllo antigenico positivo: N° Cat. 12-302, lisato di cellule A431 stimolate con EGF. Aggiungere 2,5 µL di 2-mercaptoetanolo/100 µL di lisato e fare bollire per 5 minuti per ridurre la preparazione. Caricare 20 µg di lisato ridotto per corsia di minigel.

Altre note

Concentrazione: per la concentrazione specifica del lotto, fare riferimento al Certificato di Analisi.

Note legali

UPSTATE is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Esclusione di responsabilità

Salvo diversa indicazione nel nostro catalogo o in altra documentazione fornita dall′azienda insieme al prodotto, i nostri prodotti sono destinati esclusivamente a scopi di ricerca e non devono essere utilizzati per altre finalità, inclusi a titolo esemplificativo ma non esaustivo, fini commerciali non autorizzati, applicazioni diagnostiche in vitro, usi terapeutici ex vivo o in vivo o qualsiasi altro tipo di assunzione o applicazione rivolta agli esseri umani o agli animali.

Informazioni sulla sicurezza

• Classe di pericolosità dell'acqua (WGK): WGK 1
• Punto d’infiammabilità (°F): does not flash
• Punto d’infiammabilità (°C): does not flash