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Merck

A5441

Sigma-Aldrich

Monoklonales Anti-β-Aktin in Maus hergestellte Antikörper

clone AC-15, ascites fluid

Synonym(e):

Monoklonales Anti-β-Aktin

Anmeldenzur Ansicht organisationsspezifischer und vertraglich vereinbarter Preise


About This Item

UNSPSC-Code:
12352203
NACRES:
NA.41

Biologische Quelle

mouse

Qualitätsniveau

Konjugat

unconjugated

Antikörperform

ascites fluid

Antikörper-Produkttyp

primary antibodies

Klon

AC-15, monoclonal

Mol-Gew.

antigen 42 kDa

Enthält

15 mM sodium azide

Speziesreaktivität

sheep, carp, feline, chicken, rat, mouse, Hirudo medicinalis, rabbit, canine, pig, human, bovine, guinea pig

Darf nicht reagieren mit

Dictyostelium discoideum

Methode(n)

immunohistochemistry (formalin-fixed, paraffin-embedded sections): suitable
indirect ELISA: suitable
indirect immunofluorescence: 1:1,000-1:2,000 using cultured human or chicken fibroblasts
western blot: 1:5,000-1:10,000 using cultured human or chicken fibroblast cell extracts

Isotyp

IgG1

UniProt-Hinterlegungsnummer

Anwendung(en)

research pathology

Versandbedingung

dry ice

Lagertemp.

−20°C

Posttranslationale Modifikation Target

unmodified

Angaben zum Gen

human ... ACTB(60)
mouse ... Actb(11461)
rat ... Actb(81822)

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Allgemeine Beschreibung

Beim Anfärben von ultradünnen Kryo-Gewebeschnitten von Hühner-Kaumagen markiert der Antikörper die Verdichtungszonen (Dense Bodies) und Intermediärfilamente aus Desmin, die aufeinanderfolgende Dense Bodies verbinden, sowie die membranassoziierten Anheftungsplaques (Dense Plaques). Er färbt keine adulten Herz- und Skelettmuskeln an, außer in Spuren, wenn Kontaminationen der Probe mit anderen als Muskelzellen vorhanden sind, oder wenn embryonales Gewebe verwendet wird.
Monoklonales Anti-β-Aktin (Maus-IgG1-Isotyp) stammt aus dem AC-15-Hybridom, das durch die Fusion von Maus-Myelomzellen und Splenozyten einer immunisierten Maus hergestellt wird. Aktin ist eines der am stärksten konservierten eukaryotischen Proteine und wird als mindestens sechs Isoformen in Säugetieren und Vögeln exprimiert. Vier von ihnen repräsentieren die Differenzierungsmarker von Muskelgewebe und zwei sind in fast allen Zellen zu finden. Es gibt drei α-Aktine (α-Skelett-, α-Herz- und α-Glattmuskel), ein β-Aktin (β-Nichtmuskel) und zwei γ-Aktine (γ-Glattmuskel und γ-Nichtmuskel). Die Aktinisoformen weisen insgesamt > 90 % Sequenzhomologie auf, jedoch nur 50−60 % Homologie in ihren 18 NH2-terminalen Resten. Die NH2-terminale Aktinregion scheint eine Haupt-Antigenregion zu sein und ist möglicherweise an der Interaktion von Aktin mit anderen Proteinen wie Myosin beteiligt. Der Antikörper kann zum Anfärben von Aceton-fixierten Gefrierschnitten und EM-Präparaten sowie in Mikroinjektionsexperimenten verwendet werden. Als Fixiermittel können B5, Ethanol, Methacam oder Bouin′sche Lösung verwendet werden. Das vom Antikörper erkannte Epitop ist resistent gegenüber Formalinfixierung und Paraffineinbettung.

Spezifität

Der monoklonale Anti-β-Aktin-Antikörper erkennt ein Epitop im N-terminalen Bereich der β-Isoform von Aktin. Bei Immunblots (42 kDa), der Immunfluoreszenzfärbung kultivierter Zelllinien und bei der Immunhistochemie markiert der Antikörper spezifisch β-Aktin in einer Vielzahl von Geweben und Spezies.

Immunogen

leicht modifiziertes β-zytoplasmatisches N-terminales Aktin-Peptid, Ac-Asp-Asp-Asp-Ile-Ala-Ala-Leu-Val-Ile-Asp-Asn-Gly-Ser-Gly-Lys, konjugiert mit KLH.

Anwendung

Der monoklonale Anti-β-Aktin-Antikörper der Maus wurde in folgenden Anwendungen eingesetzt:
  • bei der Immunfluoreszenzfärbung
  • beim Immunblotting
  • in der Immunhistochemie
  • als Kontrolle für Protein-Arrays
Ein monoklonaler Maus-Anti-Aktin-Antikörper wurde als Beladungskontrolle für die Western-Blot-Analyse von Leberproteinlysaten aus Ratten verwendet.
Ein monoklonaler Maus-Anti-Aktin-Antikörper wurde als Beladungskontrolle für die Western-Blot-Analyse von immungefällten Proteinen aus Ratten-Spinalganglien-Co-Kulturen verwendet.

Biochem./physiol. Wirkung

Aktin und Myosin sind Bestandteile vieler Zelltypen und an unzähligen Zellvorgängen beteiligt, darunter Fortbewegung, Zytokinese, Zytoplasmaströmung, Sekretion und Phagozytose. Das Aktin in Zellen verschiedener Spezies und aus unterschiedlichen Geweben weist sehr ähnliche immunologische und physikalische Eigenschaften auf.

Physikalische Form

Wird als Aszitesflüssigkeit mit 15 mM Natriumazid als Konservierungsmittel geliefert.

Haftungsausschluss

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