Allgemeine Beschreibung
Aktin ist ein hochkonserviertes Protein, das einen wesentlichen Bestandteil von Zytoskelettstrukturen und kontraktilen Strukturen in sämtlichen Zelltypen darstellt. Es variiert mengenmäßig, abhängig von der Art der Differenzierung und dem Funktionszustand der Zellen und Gewebe. Aktin ist in zwei verschiedenen Aggregationsformen zu finden, entweder dem globulären oder dem fibrillären Zustand, und bei Wirbeltieren kommen mindestens sechs verschiedene Isoformen vor. Die Aktine weisen über 90 % Sequenzhomologie auf, wobei jede Isoform aber eine eindeutige NH2-terminale Sequenz hat. Die Isoformen bestehen aus drei α-Aktinen (Skelettmuskeln, Herzmuskeln, glatte Muskeln), einem β-Aktin (nicht-Muskel-β) und zwei γ-Aktinen (glatte-Muskeln-γund nicht-Muskeln-γ). ACTB (Aktin β)-Gencodes für β-Aktin. Es ist ein Haushaltsprotein des Zytoskeletts. Es ist in Zytoplasma vorhanden. Das ACTB-Gen ist auf dem humanen Chromosom 7p22.1 lokalisiert.
Monoklonales Anti-β-Aktin (Maus-IgG2a-Isotyp) stammt aus dem AC-74-Hybridom, das durch die Fusion von Maus-Myelomzellen und Milzzellen einer immunisierten Maus hergestellt wurde.
Erkennt ein Epitop im N-terminalen Bereich der β-Isoform von Aktin. Markiert spezifisch β-Aktin in einer Vielzahl von Geweben und Spezies. Bei der Immunfluoreszenzfärbung von ultradünnen Kryo-Gewebeschnitten von Hühner-Kaumagen markiert der Antikörper die Verdichtungszonen (Dense Bodies) und Intermediärfilamente aus Desmin, die aufeinanderfolgende Dense Bodies verbinden, sowie die membranassoziierten Anheftungsplaques (Dense Plaques). Der Antikörper reagiert nicht mit adulten Herz- oder Skelettmuskeln (außer in Spuren, wenn die Probe mit Nicht-Muskelzellen kontaminiert ist) oder mit β-Aktin-exprimierenden Zellen in Amöben Dictyostelium discoideum Das von dem Antikörper erkannte Epitop ist resistent gegenüber Formalinfixierung und Paraffineinbettung. Als Fixiermittel können auch B5, Methacarn, Ethanol oder Bouin′sche Lösungen verwendet werden. Der Antikörper kann als Sonde für β-Aktin verwendet werden und als interne Kontrolle beim Immunoblot dienen.
Immunogen
leicht modifiziertes β-zytoplasmatisches N-terminales Aktin-Peptid, Ac-Asp-Asp-Asp-Ile-Ala-Ala-Leu-Val-Ile-Asp-Asn-Gly-Ser-Gly-Lys, konjugiert mit KLH.
Anwendung
Als primärer Antikörper für die Western-Blot-Analyse von MDCK-Zelllysaten wurde ein monoklonaler Anti-Aktin-Antikörper verwendet.
Der monoklonale Anti-β-Aktin-Antikörper der Maus wurde in der Western-Blot-Analyse eingesetzt. Der Antikörper kann außerdem für Anwendungen in der Immunhistochemie, der indirekten Immunfluoreszenz (1:1.000) bei Verwendung von kultivierten menschlichen oder Hühnerfibroblasten) und im indirekten ELISA eingesetzt werden.
Ein monoklonaler Maus-Anti-Aktin-Antikörper wurde als Beladungskontrolle für die Western-Blot-Analyse von immungefällten Proteinen aus Ratten-Spinalganglien-Co-Kulturen verwendet.
Ein monoklonaler Maus-Anti-Aktin-Antikörper wurde als Beladungskontrolle für die Western-Blot-Analyse von immungefällten Proteinen aus Ratten-Spinalganglien-Co-Kulturen verwendet.
Der monoklonale Anti-β-Aktin-Antikörper der Maus wurde in der Western-Blot-Analyse eingesetzt. Der Antikörper kann außerdem für Anwendungen in der Immunhistochemie, der indirekten Immunfluoreszenz (1:1.000) bei Verwendung von kultivierten menschlichen oder Hühnerfibroblasten) und im indirekten ELISA eingesetzt werden.
Als primärer Antikörper für die Western-Blot-Analyse von MDCK-Zelllysaten wurde ein monoklonaler Anti-Aktin-Antikörper verwendet.
Der monoklonale Anti-β-Aktin-Antikörper wurde in der Western-Blot-Analyse eingesetzt.
Biochem./physiol. Wirkung
Die beiden an der Zellmotilität beteiligten Hauptproteine des Zytoskeletts sind Aktin und Myosin. Aktin und Myosin sind Bestandteile vieler Zelltypen und sind an Zellvorgängen wie Fortbewegung, Sekretion, Zytoplasmaströmung, Phagozytose und Zytokinese beteiligt. β-Aktin (ACTB) moduliert das Zellwachstum, die Migration und den G-Aktin-Pool. Mutationen von ACTB führen zu pleiotroper Entwicklungsstörung. Erkennt ein Epitop im N-terminalen Bereich der β-Isoform von Aktin. Markiert spezifisch β-Aktin in einer Vielzahl von Geweben und Spezies. Bei der Immunfluoreszenzfärbung von ultradünnen Kryo-Gewebeschnitten von Hühner-Kaumagen markiert der Antikörper die Verdichtungszonen (Dense Bodies) und Intermediärfilamente aus Desmin, die aufeinanderfolgende Dense Bodies verbinden, sowie die membranassoziierten Anheftungsplaques (Dense Plaques). Der Antikörper reagiert nicht mit adulten Herz- oder Skelettmuskeln (außer in Spuren, wenn die Probe mit Nicht-Muskelzellen kontaminiert ist) oder mit β-Aktin-exprimierenden Zellen in Amöben Dictyostelium discoideum Das von dem Antikörper erkannte Epitop ist resistent gegenüber Formalinfixierung und Paraffineinbettung. Als Fixiermittel können auch B5, Methacarn, Ethanol oder Bouin′sche Lösungen verwendet werden. Der Antikörper kann als Sonde für β-Aktin verwendet werden und als interne Kontrolle beim Immunoblot dienen.
Physikalische Form
Der Antikörper wird als Aszitesflüssigkeit mit 0,1 % Natriumazid als Konservierungsmittel geliefert.
Lagerung und Haltbarkeit
Für regelmäßige Verwendung bei 2-8 °C bis zu 1 Monat aufbewahren. Zur langfristigen Aufbewahrung kann die Lösung in Arbeitsaliquoten eingefroren werden. Wiederholtes Einfrieren und Auftauen wird nicht empfohlen. Eine Aufbewahrung in „frostfreien“ Gefrierschränken wird nicht empfohlen. Falls nach längerer Lagerung eine leichte Trübung eingetreten ist, die Lösung vor Gebrauch durch Zentrifugieren klären.
Haftungsausschluss
Sofern in unserem Katalog oder anderen Begleitdokumenten unserer Produkte nicht anders angegeben, sind unsere Produkte nur für Forschungszwecke vorgesehen und nicht für andere Zwecke zu verwenden, einschließlich, jedoch nicht beschränkt auf unautorisierte kommerzielle Verwendung, zur In-vitro-Diagnostik, für Ex-vivo- oder In-vivo-Therapiezwecke oder jegliche Art der Einnahme oder Anwendung bei Menschen oder Tieren.