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Merck

Glicosidases

Glicosidases para as suas necessidades de fluxo de trabalho em glicobiologia

As glicosidases, incluindo endoglicosidases e exoglicosidases, são usadas principalmente em pesquisas de glicômica para o sequenciamento de glicanos, liberação de glicanos ligados a N e O de glicoproteínas e produção de glicoproteínas. Especificamente:

  • As glicosidases, como a nossa peptídeo-N-glicosidase F recombinante, PNGase Fast, permitem a desglicosilação completa e rápida de anticorpos e proteínas de fusão a imunoglobulinas, bem como de outras glicoproteínas, para serem preparadas para análise por cromatografia ou espectrometria de massa downstream.
  • As liases de polissacarídeos e esterases de carboidratos são usadas para degradar glicosaminoglicanos (mucopolissacarídeos) e preparar componentes polissacarídeos.
  • As glicosiltransferases estão sendo estudadas para uso no desenvolvimento de glicosilação seletiva para melhorar as propriedades terapêuticas de proteínas e anticorpos, além de reduzir a imunogenicidade de tecidos xenogênicos.

Para atender às necessidades do seu fluxo de trabalho de glicobiologia, oferecemos uma ampla gama de produtos para análise funcional e estrutural de glicanos, incluindo enzimas de glicoprocessamento, glicoproteínas, proteoglicanos, glicolipídios e oligossacarídeos livres. Isso inclui ofertas de proteínas que reconhecem glicanos, incluindo lectinas e galectinas, e nossas enzimas ativas para carboidratos, abrangendo exoglicosidases, endoglicosidases, glicosiltransferases e muito mais. Com a glicosilação sendo uma das modificações pós-traducionais mais comuns e complexas, nossos kits GlycoProfile™ foram desenvolvidos para marcar e analisar os N-glicanos e O-glicanos de glicoproteínas de forma simples e rápida.

Descubra produtos ainda mais inovadores para reagentes, kits e recursos para glicômica abaixo.


Kit de desglicosilação enzimática de proteínas

Os kits de desglicosilação enzimática de proteínas (como os produtos EDEGLY e NDEGLY) contêm todas as enzimas e reagentes necessários para remover completamente das glicoproteínas todos os carboidratos ligados ao N e carboidratos simples ligados ao O. Isso inclui glicoformas ligadas ao O contendo galactose, N-acetilglicosamina e ácido siálico. Características e benefícios adicionais incluem:

  • Desglicosila até 2 mg de glicoproteínas: suficiente para o processamento downstream
  • Reação única em pH neutro: mantém a estrutura original do peptídeo
  • Ausência de degradação proteica: realiza a interrogação na estrutura do peptídeo
  • Exoglicosidases inclusas: processa glicoformas ligadas ao O para liberação
  • Remove açúcares ligados ao O contendo ácido siálico: proporciona análise de peptídeos mais precisa
  • Controle de glicoproteínas fornecido: a verificação melhora a confiança e a consistência

Kit de N-desglicosilação enzimática no gel GlycoProfile™ I

O kit de N-desglicosilação enzimática no gel GlycoProfile™ I remove de forma robusta os glicanos ligados ao N e digere amostras proteicas de géis de poliacrilamida unidimensionais ou bidimensionais para análise por MS ou HPLC. O kit funciona bem com azul de coomassie brilhante, coomassie coloidal e géis corados com prata, quando devidamente descorado. A enzima glicolítica PNGase F (peptídeo-N-glicosidase F) tem um desempenho excelente quando usada na desglicosilação de glicoproteínas e glicopeptídeos ligados ao N em gel. A tripsina de grau para proteômica digere de modo eficaz a proteína remanescente. As amostras dessalinizadas são, em seguida, concentradas para análise por MS, usando mais comumente métodos de ionização, como MALDI ou ESI, e métodos de análise, como TOF ou quadrupolo. Este kit oferece as seguintes características e benefícios:

  • Desglicosilação e digestão no gel: minimiza a manipulação da amostra
  • Enzimas altamente purificadas: previne atividade e subprodutos indesejados
  • Baixo teor de sal no tampão: elimina a interferência na análise por MS
  • Reagente de descoloração incluso: economiza tempo reduzindo o preparo adicional de reagentes

Enzimas adicionais para glicobiologia

Complementando nossos kits de desglicosilação, oferecemos enzimas glicolíticas para remoção ou degradação parcial dos glicanos. O uso de enzimas adicionais pode ser útil para certas estruturas de glicanos que resistem a estratégias universais de desglicosilação, como estruturas que a PNGase F não cliva. Além disso, a hidrólise sequencial de monossacarídeos individuais dos glicanos pode ser utilizada na análise da estrutura e função do componente glicano.





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