Marcação e modificação de proteínas

As proteínas são compostas de cadeias de polipeptídeos e suas funções biológicas são determinadas, em parte, pelo enovelamento correto, bem como o tamanho e número de grupos funcionais reativos presentes em toda a cadeia polipeptídica. A capacidade de fornecer modificações proteicas específicas para determinados sítios possibilita aos pesquisadores investigar uma ampla gama de propriedades e sua função biológica geral. As tecnologias de marcação e modificações de proteínas incluem a adição de fluoróforos, biotina e outras moléculas pequenas para examinar as interações proteicas, o enovelamento das proteínas, para investigar a estrutura geral das proteínas e sua função biológica.

Marcação com proteína fluorescente

A descoberta e a incorporação generalizada da proteína fluorescente verde (green fluorescent protein (GFP)) é um exemplo poderoso dessa tecnologia. A GFP e suas moléculas homólogas tiveram um enorme impacto em diversos campos de estudo e nossa compreensão dos processos biológicos. Por exemplo, a incorporação de etiquetas fluorescentes em anticorpos permite a detecção e a quantificação de complexos de proteínas altamente específicos nos tecidos ou a imobilização direcional de complexos anticorpo-proteína para aplicações de ELISA e Western blot. No entanto, uma desvantagem significativa do uso de GFP é que a função proteica pode ser prejudicada pela incorporação de etiquetas proteicas adicionais deste tamanho. Para contornar esse desafio, os pesquisadores podem usar etiquetas fluorescentes menores em comparação com uma GFP, biotina, ou incorporar aminoácidos não naturais com funcionalidade biortogonal.