Página inicial Produtos Biologia de proteínas Preparo de amostras proteicasPurificação de proteínas biotiniladas

Purificação de proteínas biotiniladas

Slide 1 of 4

Colunas e resinas de purificação de estreptavidina Sepharose HP Cytiva HiTrap™.

Purificação proteica de proteínas recombinantes usando cromatografia de afinidade.

Esferas magnéticas em tubo em suporte para purificação de proteínas

Produtos de esferas magnéticas PureProteome™ para purificação de proteínas

Anticorpos e proteínas biotinilados são comumente usados em pesquisa básica e na descoberta de medicamentos. Várias resinas de cromatografia de afinidade, bem como colunas pré-empacotadas e placas, estão disponíveis para ligar, isolar e purificar proteínas e anticorpos biotinilados.

Esferas de agarose e géis de afinidade
Esferas magnéticas
Placas de alta capacidade revestidas com estreptavidina SigmaScreen™
Colunas e meios para cromatografia Cytiva™ Amersham

Esferas de agarose e géis de afinidade

Esferas de agarose e géis de afinidade possibilitam a purificação de anticorpos e proteínas biotinilados usando estreptavidina ou avidina reticulada com agarose em esferas. Tanto a avidina quanto a estreptavidina se ligam à biotina com alta afinidade, embora a avidina possa exibir alto grau de ligação não específica. A agarose ExtrAvidin® usa uma avidina modificada com altíssima afinidade e especificidade para biotina. Boas para uso em purificações de pequena a grande escala, essas resinas são adequadas para purificação em colunas por fluxo de gravidade, centrifugação de baixa velocidade no processamento de lotes e procedimentos cromatográficos sob baixa pressão. Os géis de afinidade EZview™ incorporam um corante vermelho que permite ao usuário diferenciar facilmente o pélete do sobrenadante, diminuindo a perda de proteína durante a purificação do lote.

Esferas magnéticas

As esferas magnéticas de estreptavidina PureProteome™ proporcionam uma maneira rápida e reprodutível de purificar imunoglobulinas a partir de misturas complexas, como amostras de soro, plasma ou sobrenadante de cultura celular. Os anticorpos e proteínas biotinilados são purificados usando uma plataforma ou suporte magnético para separar as esferas das frações de lavagem e eluição. Este procedimento é adequado para operações de baixo rendimento usando tubos de microcentrífuga únicos, ou de rendimento mais alto, usando placas de 96 poços, com ou sem automação. As partículas magnéticas de estreptavidina também podem ser usadas para purificação de anticorpos e proteínas biotinilados.

Placas revestidas com estreptavidina SigmaScreen™ de alta capacidade

As placas revestidas com estreptavidina SigmaScreen™ de alta capacidade utilizam uma tecnologia de revestimento proprietária que proporciona uma capacidade de ligação da biotina significativamente maior que as placas revestidas com estreptavidina padrão ou ExtrAvidin. Com capacidade de ligação >300 pmol/poço (formato de 96 poços) ou >150 pmol/poço (formato de 384 poços), essas placas permitem que a proteína capturada seja eluída para ser analisada após a captura por vários métodos, como MALDI, ICAT ou SDS-PAGE. As placas revestidas com estreptavidina SigmaScreen™ de alta capacidade são fabricadas de acordo com a norma ISO 9002 em nossas instalações segundo as BPF e proporcionam alta consistência entre poços e entre placas.

Colunas e meios para cromatografia Cytiva™ Amersham

Diversas colunas de cromatografia e resinas de meio Cytiva™ Amersham estão disponíveis para purificação de anticorpos e proteínas biotinilados confiável e de alta resolução, de pequena a grande escala.

As colunas SpinTrap™ são colunas para centrífuga pré-empacotadas de uso único para purificação simples e em pequena escala de anticorpos e proteínas biotinilados.
As colunas HiTrap™ HP são pré-empacotadas com resinas de estreptavidina Sepharose™ de alto desempenho para purificação preparativa de rotina de anticorpos e proteínas biotinilados.
As placas de filtração de 96 poços MultiTrap™ fornecem um formato rápido e confiável para purificação de anticorpos e proteínas biotinilados, em pequena escala, usando placas de filtração pré-empacotadas de 96 poços passíveis de centrifugação ou filtração a vácuo, manualmente ou usando sistemas robóticos automatizados.
Os meios de estreptavidina Sepharose™ Mag são compostos por esferas magnéticas à base de Sepharose™ projetadas para simplificar o enriquecimento de proteínas-alvo por meio de aplicações de imunoprecipitação ou pull-down, e podem ser usados para purificação e triagem rápidas e em pequena escala de anticorpos e proteínas biotinilados em sobrenadantes celulares.
A resina de estreptavidina Sepharose™ de alto desempenho também está disponível separadamente para escalonamento da purificação.

Recursos de produtos relacionados

Brochura: Refine Protein Preparation
Purification or Removal of Biotin and Biotinylated Substances

Aplicações relacionadas

Purificação de proteínas

Técnicas de purificação de proteínas, reagentes e protocolos para purificar proteínas recombinantes usando métodos que incluem cromatografia de troca iônica, cromatografia de exclusão por tamanho e cromatografia por afinidade a proteínas.

Expressão de proteínas

Tecnologias de expressão proteica para expressar proteínas recombinantes nos sistemas de expressão de E. coli, insetos, leveduras e mamíferos para pesquisa básica e apoio à produção de produtos agentes terapêuticos e vacinas.

Lise e extração de proteínas

Uma visão geral dos métodos de lise celular e extração de proteínas, incluindo técnicas de solubilização em detergente, lise por congelamento e descongelamento, choque osmótico, sonicação, lise celular enzimática e ruptura mecânica, como Dounce, Polytron e homogeneização com almofariz e pilão.

“Pull-down” de proteínas

Ensaios, reagentes e protocolos de “pull-down” para investigar interações proteicas in vitro usando métodos de afinidade ou de pull-down com GST, purificação por afinidade em tandem (TAP) e de coimunoprecipitação.

Concentração de proteínas e troca de tampão

Visão geral das técnicas utilizadas para concentrar e clarificar amostras de proteínas para fluxos de trabalho de purificação, bioprocessamento e de análise. Inclui protocolos e vídeos para técnicas de filtração e ultrafiltração, enriquecimento de proteínas e dessalinização e troca de tampão usando métodos de diálise, diafiltração e cromatografia.

Eletroforese em gel

A eletroforese de proteínas em gel é usada para separar proteínas para purificação, caracterização e detecção. Métodos como PAGE nativa, SDS-PAGE, PAGE 2D e focalização isoelétrica (isoelectric focusing (IEF)) são usados no preparo para aplicações a jusante (downstream), incluindo western blot, espectrometria de massa e análise proteômica.

Western blot

Uma visão geral dos princípios e aplicações da técnica de western blot para detecção de proteínas. Inclui links para protocolos detalhados, vídeos e outros recursos para extração de proteínas, eletroforese em gel, transferência para membranas de PVDF ou nitrocelulose, além de métodos de detecção quimioluminescentes, colorimétricos e fluorescentes.

Espectrometria de massa

A espectrometria de massa (MS) é uma ferramenta analítica usada para identificar compostos, determinar estruturas químicas e avaliar abundâncias isotópicas. Na MS, as amostras são ionizadas e os íons resultantes são identificados com base em suas proporções de massa em relação à carga (m/z).

Faça login para continuar

Para continuar lendo, faça login ou crie uma conta.

Ainda não tem uma conta?