Purificação de proteínas de anticorpos
Anticorpos monoclonais e policlonais são comumente usados em pesquisa básica e de descoberta de medicamentos. Os biológicos à base de anticorpos também compreendem uma proporção crescente de novos agentes terapêuticos. A cromatografia de afinidade usando meios reticulados com Proteína A, Proteína G e Proteína L desempenha um papel importante no isolamento e produção de anticorpos purificados para fluxos de trabalho em escala laboratorial, de processos e industrial.
Esferas de agarose e géis de afinidade
Esferas de agarose e géis de afinidade possibilitam a purificação de anticorpos usando Proteína A ou Proteína G reticulada com agarose em esferas. Boas para uso em purificações de pequena a grande escala, essas resinas são adequadas para purificação em colunas por fluxo de gravidade, centrifugação de baixa velocidade no processamento de lotes e procedimentos cromatográficos sob baixa pressão. Os géis de afinidade EZview™ incorporam um corante vermelho que permite ao usuário diferenciar facilmente o pélete do sobrenadante, diminuindo a perda de proteína durante a purificação do lote. Os kits de imunoprecipitação incluem géis de afinidade, minicolunas para centrífuga e reagente de lise, e são especificamente projetados para possibilitar recuperação máxima de proteínas a partir de imunoprecipitados.
Resinas Sepharose™ Fast Flow e resinas Fast Flow de agarose
A Sepharose™ Fast Flow e a Fast Flow de agarose usam esferas ou géis de agarose altamente reticulados que podem suportar pressões mais altas em comparação com as resinas de esferas de agarose padrão. Isso torna essas resinas adequadas para métodos de purificação por cromatografia líquida de proteínas rápida (FPLC). Essas resinas são recomendadas para purificação de anticorpos de média a grande escala.
Sistema de esferas magnéticas PureProteome™
As esferas magnéticas de proteína A, proteína B e proteínas A/G PureProteome™ proporcionam uma maneira rápida e reprodutível de purificar imunoglobulinas de misturas complexas, como amostras de soro, plasma ou sobrenadante de cultura celular. Os anticorpos são purificados usando um suporte ou plataforma magnética para separar as esferas das frações de lavagem e eluição. Este procedimento é adequado para operações de baixo rendimento, usando tubos de microcentrífuga únicos, ou de rendimento mais alto, com automação.
Colunas e meios para cromatografia Cytiva™ Amersham
Diversos meios para cromatografia Cytiva™ da Amersham estão disponíveis para purificação de anticorpos monoclonais e policlonais de diferentes origens.
- As colunas GraviTrap™ são colunas de fluxo por gravidade pré-empacotadas, projetadas para purificação manual rápida e eficiente de anticorpos monoclonais e policlonais, fragmentos de anticorpo de sobrenadantes de cultura celular e fluidos biológicos.
- As colunas SpinTrap™ são colunas para centrífuga pré-empacotadas, de uso único, para purificação simples e em pequena escala de anticorpos ou enriquecimento de proteínas específicas.
- As colunas HiTrap™ HP são pré-empacotadas com resina de alto desempenho de Sepharose™ com proteína A ou proteína G para purificação preparativa de anticorpos monoclonais e policlonais, como a IgG humana. As colunas HiTrap™ MabSelect são pré-empacotadas com a resina MabSelect, um meio para bioprocessos para captura de anticorpos monoclonais (Mabs) a partir de volumes grandes de amostra.
- As placas de filtração de 96 poços MultiTrap™ fornecem um formato rápido e confiável para purificação de anticorpos em pequena escala ou enriquecimento de proteínas de interesse usando placas de filtração de 96 poços pré-empacotadas, passíveis de centrifugação ou filtração a vácuo, manualmente ou usando sistemas robóticos automatizados.
- As colunas HiScreen™ Capto L são pré-empacotadas com Capto L, uma resina de cromatografia de afinidade para bioprocessos para captura de anticorpos e fragmentos de anticorpos, como fragmentos Fab, fragmentos variáveis de cadeia única (scFv) e anticorpos de domínio (Dabs). As colunas HiScreen™ Capto L fazem parte da plataforma de desenvolvimento de processos. Essas colunas são uma excelente opção para otimização de métodos e triagem de parâmetros.
- As colunas HiScreen™ MabSelect™ são pré-empacotadas com resina MabSelect™ e fazem parte da plataforma de desenvolvimento de processos disponível junto à Cytiva. A resina MabSelect™ é uma resina para bioprocessos para captura de anticorpos monoclonais a partir de volumes grandes de amostra. Essas colunas são uma excelente opção para otimização de métodos e triagem de parâmetros para captura de anticorpos monoclonais.
- Os meios Sepharose™ Mag com proteína A e proteína G são compostos por esferas magnéticas à base de sepharose projetadas para simplificar o enriquecimento de proteínas-alvo por meio de aplicações de imunoprecipitação ou pull-down, e podem ser usados para purificação e triagem rápidas e em pequena escala de anticorpos monoclonais e policlonais a partir do soro e sobrenadantes celulares.
- Sepharose™ GammaBind e GammaBind Plus são resinas de cromatografia de afinidade com proteína G para purificar imunoglobulinas (IgGs) a partir de diversas espécies, e são usadas para analisar e purificar classes, subclasses e fragmentos de imunoglobulinas a partir de qualquer fluido biológico ou meio de cultura celular. Esta resina é particularmente adequada para procedimentos de imunoprecipitação.
- As resinas de Sepharose™ com Proteína A e Proteína G, Sepharose™ Fast Flow, Capto L e MabSelect™ também estão disponíveis separadamente para procedimentos de escalonamento.
Tabela: Afinidade da imunoglobulina à Proteína A/Proteína G/Proteína L |
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