SAE0151
Proteinase K
free of DNA contaminants, suitable for Microbiome research, lyophilized powder, ≥30 units/mg protein
Sinônimo(s):
Endopeptidase K
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About This Item
Número CAS:
Número MDL:
Código UNSPSC:
12352202
NACRES:
NA.77
Produtos recomendados
Nível de qualidade
atividade específica
30 units/mg protein
peso molecular
28.93 kDa
Características
DNA free
Condições de expedição
wet ice
temperatura de armazenamento
−20°C
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Descrição geral
Purified Proteinase K DNA free SAE0151 undergoes strict quality control testing to ensure the absence of detectable levels of contaminating DNA using 35 cycles PCR amplification of 16S and 18S rDNA using universal primer sets.
Proteinase K is a stable serine protease with broad substrate specificity. It degrades many proteins in the native state even in the presence of detergents. Proteinase K was isolated from a fungus able to grow on keratin and the enzyme can digest native keratin. The enzyme belongs to the subtilisin family with an active site catalytic triad (Asp39 -His69 -Ser224).
The predominant site of cleavage is the peptide bond adjacent to the carboxyl group of aliphatic and aromatic amino acids with blocked alpha amino groups. It is commonly used for its broad specificity. Proteinase K is usually denatured by subsequent phenol extractions.
The study of microbial communities has been revolutionized in recent years by the widespread adoption of culture independent analytical techniques such as 16S rRNA gene sequencing and metagenomics. Since DNA contamination during sample preparation is a major problem of these sequence-based approaches, DNA extraction reagents free of DNA contaminates are essential.
Proteinase K is a stable serine protease with broad substrate specificity. It degrades many proteins in the native state even in the presence of detergents. Proteinase K was isolated from a fungus able to grow on keratin and the enzyme can digest native keratin. The enzyme belongs to the subtilisin family with an active site catalytic triad (Asp39 -His69 -Ser224).
The predominant site of cleavage is the peptide bond adjacent to the carboxyl group of aliphatic and aromatic amino acids with blocked alpha amino groups. It is commonly used for its broad specificity. Proteinase K is usually denatured by subsequent phenol extractions.
The study of microbial communities has been revolutionized in recent years by the widespread adoption of culture independent analytical techniques such as 16S rRNA gene sequencing and metagenomics. Since DNA contamination during sample preparation is a major problem of these sequence-based approaches, DNA extraction reagents free of DNA contaminates are essential.
Aplicação
Útil na inativação proteolítica de nucleases durante o isolamento de DNA e RNA.
Remove endotoxinas que se ligam a proteínas catiônicas, como lisozima e ribonuclease A.
Segundo relatos, é útil no isolamento de mitocôndrias de fígado, levedura e feijão-mungo
Determinação da localização de enzimas em membranas
Tratamento de cortes de tecido embebidos em parafina para expor sítios de ligação a antígenos para marcação com anticorpos.
Digestão de proteínas de amostras de tecido cerebral para obter príons para pesquisa em encefalopatias espongiformes transmissíveis (EET).
Remove endotoxinas que se ligam a proteínas catiônicas, como lisozima e ribonuclease A.
Segundo relatos, é útil no isolamento de mitocôndrias de fígado, levedura e feijão-mungo
Determinação da localização de enzimas em membranas
Tratamento de cortes de tecido embebidos em parafina para expor sítios de ligação a antígenos para marcação com anticorpos.
Digestão de proteínas de amostras de tecido cerebral para obter príons para pesquisa em encefalopatias espongiformes transmissíveis (EET).
- Proteinase K is frequently used in molecular biology applications to digest unwanted proteins, such as nucleases from DNA or RNA preparations from microorganisms, cultured cells, and plants.
- Removes endotoxins that bind to cationic proteins such as lysozyme and ribonuclease A useful for the isolation of hepatic, yeast, and mung bean mitochondria.
- Determination of enzyme localization on membranes
- Treatment of paraffin embedded tissue sections to expose antigen binding sites for antibody labeling.
- Digestion of proteins from brain tissue samples for prions in Transmissible Spongiform Encephalopathies (TSE) research.
Ações bioquímicas/fisiológicas
A proteinase K é uma protease de serina estável e altamente reativa. Evidências provenientes de estudos da estrutura cristalina e molecular indicam que a enzima pertence à família das subtilisinas, com uma tríade catalítica no sítio ativo (Asp39-His69-Ser224). Ela é estável em uma ampla variedade de ambientes: pH, sais tamponantes, detergentes (SDS) e temperatura. Na presença de SDS a 0,1%-0,5%, a proteinase K retém sua atividade e digere diversas proteínas e nucleases em preparados de DNA, sem comprometer a integridade do DNA isolado.
Características e benefícios
Purified Proteinase K DNA free SAE0151 undergoes strict quality control testing to ensure it will be free of DNA contaminants, suitable for Microbiome research.
Definição da unidade
One unit will hydrolyze urea denatured hemoglobin to produce color equivalent to 1.0 micromole of tyrosine per minute at pH 7.5, 37°C (color per Folin-Ciocalteu reagent).
Nota de preparo
Proteinase K is active in 1% Triton X-100 and in 0.5% (w/v) SDS. SDS and urea will denature protein substrates resulting in increased digestion rates. Proteinase K itself is denatured much more slowly by these agents.
Palavra indicadora
Danger
Frases de perigo
Declarações de precaução
Classificações de perigo
Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3
Órgãos-alvo
Respiratory system
Código de classe de armazenamento
11 - Combustible Solids
Classe de risco de água (WGK)
WGK 1
Ponto de fulgor (°F)
Not applicable
Ponto de fulgor (°C)
Not applicable
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