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Roche

ELISAPLUS para detecção de morte celular

sufficient for 96 multiwell tests (11774425001), sufficient for 10 x 96 multiwell tests (11920685001)

Sinônimo(s):

ELISA

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About This Item

Código UNSPSC:
41116158

uso

sufficient for 10 x 96 multiwell tests (11920685001)
 sufficient for 96 multiwell tests (11774425001)

Nível de qualidade

100

fabricante/nome comercial

Roche

técnica(s)

ELISA: suitable

método de detecção

photometric

temperatura de armazenamento

2-8°C

Descrição geral

Use este kit para fazer a quantificação relativa de fragmentos de DNA complexados com histonas (mono e oligonucleossomos) fora do citoplasma das células após a indução da apoptose ou quando liberados de células necróticas. Como o ensaio não requer marcação antecipada das células, ele consegue detectar a degradação internucleossômica do DNA genômico durante a apoptose, mesmo nas células que não se proliferam in vitro, como células tumorais recém-isoladas. Os anticorpos usados no ensaio não são espécie-específicos, portanto o kit pode ser usado para ensaio de células de uma ampla variedade de espécies.

Especificidade

A anti-histona reage com as histonas H1, H2A, H2B, H3 e H4 de diversas espécies (por exemplo, humanos, camundongos, ratos, hamsters, vacas, gambás, Xenopus). O anti-DNA se liga a DNA de fita simples e dupla. Portanto, o ELISA permite a detecção de mono e oligonucleossomos de várias espécies, e pode ser usado para avaliar a morte celular apoptótica em muitos sistemas celulares diferentes.

Aplicação

Somente para fins de pesquisa. Não é destinado ao uso em procedimentos diagnósticos.

O imunoensaio enzimático fotométrico ELISAPLUS para detecção de morte celular é usado para determinação quantitativa in vitro dos fragmentos citoplasmáticos de DNA associados a histonas (mono e oligonucleossomos) após a morte celular induzida.
O kit contém uma solução de parada que permite ao usuário interromper a reação do substrato e correr o ensaio em condições definidas, o que significa que é adequado para uso em aplicações de alto rendimento.

Características e benefícios

  • ELISA em uma etapa
  • Alta sensibilidade: (5 × 102 células/ml)
  • Rápido desempenho: (3 a 4 horas)
  • Controle positivo incluído
  • Não é preciso marcar células antecipadamente
  • Sistema de ensaio não radioativo
  • Sem restrição de espécie
  • Fácil manuseio
  • Pouca interferência de fundo
  • Fator anticamundongo humano suprimido
  • Testado quanto à função

Embalagem

1 kit contendo 10 componentes
  • 11774425001 (1 kit com 10 componentes)
  • 11920685001 (1 kit com 10 componentes)

Especificações

Tempo de ensaio: 3 a 4 horas
Controle negativo: Dependendo das condições de cultura de células, toda cultura celular permanente em crescimento exponencial contém uma determinada quantidade de células mortas (geralmente cerca de 3-8%). No imunoensaio, essas células mortas inerentes à amostra não tratada (sem o agente indutor de morte celular) causarão um determinado valor de absorbância (controle negativo).
Controle positivo: Um complexo DNA-histona atua como controle positivo.
Material de amostra: Frações citoplasmáticas (lisados) de linhagens celulares, células ex vivo, sobrenadantes de culturas celulares e soro ou plasma

Definição da unidade

Conversão de unidades: 1 mU = 1 × 10-3 DO (1 mU = 0,001 DO).

Nota de preparo

Solução de trabalho: Preparo de soluções de trabalho

Junto com as soluções prontas para uso fornecidas com este kit, é preciso preparar as seguintes soluções de trabalho:
Observação: Use apenas água bidestilada para reconstituir os liofilizados.

Anti-histona biotina
Reconstitua o liofilizado em 450 μl de água bidestilada por 10 minutos e misture bem.
Uso: Componente do imunorreagente.
Anti-DNA peroxidase
Reconstitua o liofilizado em 450 μl de água bidestilada por 10 minutos e misture bem.
Uso: Componente do imunorreagente.
Controle positivo
Reconstitua o liofilizado em 450 μl de água bidestilada por 10 minutos e misture bem.
Uso: Etapa 1 do ELISA.
Comprimidos de ABTS
Dependendo do número de amostras testadas, dissolva 1, 2 ou 3 comprimidos do frasco 7 em 5, 10 ou 15 ml de tampão de substrato.
Uso: Etapa 5 do ELISA.
Solução de parada do ABTS
Se houver turbidez ou precipitação visível, aqueça a 37 °C sob agitação até que a solução fique transparente.
Uso: Etapa 6 do ELISA.
Condições de armazenamento (solução de trabalho): Anti-histona biotina: 2 a 8 °C por 2 meses
Comprimidos de ABTS: 1 mês armazenado ao abrigo da luz. Deixe que chegue a 15 a 25 °C antes do uso.
Solução de parada do ABTS: 2 a 8 °C até o prazo de validade impresso na etiqueta.
O limite exato de detecção de células em processo de morte/mortas em uma determinada amostra depende muito da cinética de morte celular, do agente citotóxico usado e da quantidade de células afetadas na população total de células. Usando U937/camptotecina como sistema-modelo de morte celular, o imunoensaio permite a detecção específica de mono e oligonucleossomos na fração citoplasmática de 125 equivalentes de célula/poço.

Outras notas

Somente para fins de pesquisas biológicas. Não é destinado ao uso em procedimentos diagnósticos.

Somente componentes do kit

Nº do produto
Descrição
  • Anti-histone-biotin antibody (clone H11-4)
  • Anti-DNA-POD antibody (clone MCA-33)
  • Positive Control
  • Incubation Buffer
  • Lysis Buffer
  • Substrate Buffer
  • ABTS Substrate Tablet
  • ABTS Stop Solution
  • Microplate (streptavidin-coated)
  • Adhesive Cover Foils
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Palavra indicadora

WarningDanger

Classificações de perigo

Aquatic Chronic 2 - Aquatic Chronic 3 - Eye Dam. 1 - Eye Irrit. 2 - Skin Sens. 1

Código de classe de armazenamento

8B - Non-combustible, corrosive hazardous materials

Classe de risco de água (WGK)

WGK 3

Ponto de fulgor (°C)

does not flash

Certificados de análise (COA)

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