ABS2103
Anticorpo antiBiP (GRP78), arginilado (Nt-Glu19)
from rabbit, purified by affinity chromatography
Sinônimo(s):
78 kDa glucose-regulated protein, Nt-Glu19 arginylated, BiP, Nt-Glu19 arginylated, Endoplasmic reticulum lumenal Ca(2+)-binding protein grp78, Nt-Glu19 arginylated, GRP-78, Nt-Glu19 arginylated, Heat shock 70 kDa protein 5, Nt-Glu19 arginylated, Immunogl
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About This Item
Código UNSPSC:
12352203
eCl@ss:
32160702
Produtos recomendados
fonte biológica
rabbit
Nível de qualidade
forma do anticorpo
affinity isolated antibody
tipo de produto de anticorpo
primary antibodies
clone
polyclonal
purificado por
affinity chromatography
reatividade de espécies
human, mouse
reatividade da espécie (prevista por homologia)
rat (based on 100% sequence homology), bovine (based on 100% sequence homology), nonhuman primates (based on 100% sequence homology)
técnica(s)
ELISA: suitable
dot blot: suitable
immunocytochemistry: suitable
western blot: suitable
nº de adesão NCBI
nº de adesão UniProt
Condições de expedição
ambient
modificação pós-traducional do alvo
unmodified
Informações sobre genes
human ... HSPA5(3309)
Descrição geral
Proteína regulada por glicose de 78 kDa (UniProt P11021; também conhecida como BiP, proteína grp78 de ligação a Ca(2+) luminal do retículo endoplasmático, GRP-78, proteína 5 de choque térmico de 70 kDa, proteína de ligação à cadeia pesada da imunoglobulina) é codificada pelo gene HSPA5 (também conhecido como GRP78) (ID do gene 3309) em humanos. A BiP (GRP78 ou proteína 5 de choque térmico de 70 kDa), calreticulina (CRT) e proteína dissulfeto isomerase (PDI) são fatores de enovelamento no lúmen do RE que, em conjunto com outras enzimas do sítio de modificação pós-tradução (PTM), auxiliam o processo de proteínas recém-sintetizadas antes que sejam liberadas do RE. As próprias BiP, CRT e PDI estão sujeitas à remoção do peptídeo de sinalização pós-tradução após sua síntese, expondo E19, E18 e D18 na extremidade N recém-formada, respectivamente. Os resíduos D e E da extremidade N das proteínas maduras são passíveis de arginilação catalisada pela arginina-tRNA-proteína transferase 1/ATE1, formando proteínas maduras arginiladas (R-BiP, R-CRT, R-PDI) com localização celular alterada para permitir sua participação em funções fora do retículo endoplasmático. Embora os níveis basais apenas de R-CRT e R-PDI, mas não de R-BiP, sejam detectáveis de modo geral em células não estimuladas, o aumento da expressão da arginilação N-terminal de todas as três proteínas é observado após a exposição ao dsDNA citossólico e inibição de proteassomas, indicando um papel compartilhado nas respostas imunes inatas a micróbios invasores. Além disso, a indução do estresse do RE pelo tratamento com tapsigargina potencializa de maneira sinérgica o aumento da expressão dos níveis celulares de R-BiP, R-CRT e R-PDI induzido pela inibição dos proteassomas, o que indica que o estresse do RE acelera o fornecimento de BiP, CRT e DPI luminais do RE para arginilação da extremidade N.
Especificidade
Este anticorpo policlonal de coelho detectou especificamente o peptídeo imunogênico, mas não o peptídeo controle sem arginilação na extremidade N Glu19 (Cha-Molstad, H., et al. (2015). Nat. Cell Biol. 17(7):917-929).
Imunogênio
Epítopo: extremidade N
Peptídeo linear correspondente à sequência N-terminal da BiP (proteína de ligação) humana madura arginilada (GRP78).
Aplicação
Análise de western blot: 0,5 µg/ml de um lote representativo detectou fusão com GFP de Arg-BiP(19-651), mas não Val-BiP(19-651) em 7,5 µg de lisado de células MEF transfectadas para expressar o construto da fusão com GFP de Ub-Arg-BiP(19-124) ou Ub-Val-BiP(19-124) GFP clivado de modo co-traducional em Ub e Arg-BiP(19-124)-GFP ou Val-BiP(19-124)-GFP por Ub hidrolases intracelulares.
Análise imunocitoquímica: 10 µg/ml de um lote representativo detectaram indução da arginilação de Nt-Glu19 de BiP em células HeLa tratadas (por 18 h, MG132 3 µM e tapsigargina 200 nM) (Cortesia de Yong Tae Kwon, Ph.D., Universidade Nacional de Seul, Coreia).
Análise imunocitoquímica: 10 µg/ml de um lote representativo detectaram a indução de arginilação de Nt-Glu19 de BiP em fibroblastos embrionários de camundongos (MEFs) do tipo selvagem tratados (por 18 h MG132 3 µM e tapsigargina 200 nM), mas não em MEFs com deficiência de arginina-tRNA-proteína transferase 1/ATE1 (Cortesia de Yong Tae Kwon, Ph.D., Universidade Nacional de Seul, Coreia).
Análise de western blot: 0,2 µg/ml de um lote representativo detectaram indução da arginilação de BiP Nt-Glu19 em células HeLa tratadas (por 18 h, MG132 3 µM e tapsigargina 200 nM) (Cortesia de Yong Tae Kwon, Ph.D., Universidade Nacional de Seul, Coreia).
Análise de western blot: 0,2 µg/ml de um lote representativo detectou uma banda-alvo de fusão com GFP de R-BiP(19-651) em células de MEF transfectadas para expressar Ub-R-BiP(19-651)-GFP ou Ub-BiP(19-651)-GFP, mas não Ub-V-BiP(19-651)-GFP. Em MEFs com deficiência de ATE1, a banda-alvo de R-BiP(19-651)-GFP foi detectada apenas quando as células foram transfectadas para expressar Ub-R-BiP(19-651)-GFP, mas não Ub-BiP(19-651)-GFP (Cortesia de Yong Tae Kwon, Ph.D., Universidade Nacional de Seul, Coreia).
Análise de dot blot: Um lote representativo detectou o peptídeo imunogênico, mas não o peptídeo controle sem arginilação na extremidade N Glu19 (Cha-Molstad, H., et al. (2015). Nat. Cell Biol. 17(7):917-929).
Análise por ELISA: Um lote representativo detectou o peptídeo imunogênico, mas não o peptídeo controle sem arginilação na extremidade N Glu19 (Cha-Molstad, H., et al. (2015). Nat. Cell Biol. 17(7):917-929).
Análise imunocitoquímica: Um lote representativo detectou a formação de arginilação de BiP induzida pela transfecção de poli(dA:dT)/pontos lacrimais positivos para R-BiP colocalizados com os que contêm conjugados de p62, LC3 e ubiquitina, enquanto as colorações de R-BiP e ER são mutuamente exclusivas (Cha-Molstad, H., et al. (2015). Nat. Cell Biol. 17(7):917-929).
Análise de western blot: Um lote representativo detectou a produção de fusões com cauda R-BiP(19-651) de construtos expressos de forma exógena com cauda Ub-BiP(19-N) e Ub-R-BiP(19-N), mas não Ub-V-BiP(20-N). Em células com deficiência de ATE1, a banda alvo de R-BiP(19-651)-GFP foi detectada apenas quando as células foram transfectadas para expressar Ub-R-BiP(19-651)-GFP, mas não Ub-BiP(19-651)-GF (Cha-Molstad, H., et al. (2015). Nat. Cell Biol. 17(7):917-929).
Análise de western blot: Um lote representativo detectou a indução da arginilação de Nt-Glu19 de BiP (GRP78) após a superexpressão da isoforma arginina-tRNA-proteína transferase 1 (ATE1) 1A7A ou da transfecção de vários dsDNAs, inclusive poli(dA:dT), em células HeLa. A combinação da inibição de proteassoma e indução do estresse do RE (retículo endoplasmático) por um tratamento de 18 h com MG132 10 µM e tapsigargina 100 nM integrou de forma sinérgica a eficácia dos dois medicamentos quanto à indução da arginilação de Nt-Glu18 da calreticulina celular (Cha-Molstad, H., et al. (2015). Nat. Cell Biol. 17(7):917-929).
Análise imunocitoquímica: 10 µg/ml de um lote representativo detectaram indução da arginilação de Nt-Glu19 de BiP em células HeLa tratadas (por 18 h, MG132 3 µM e tapsigargina 200 nM) (Cortesia de Yong Tae Kwon, Ph.D., Universidade Nacional de Seul, Coreia).
Análise imunocitoquímica: 10 µg/ml de um lote representativo detectaram a indução de arginilação de Nt-Glu19 de BiP em fibroblastos embrionários de camundongos (MEFs) do tipo selvagem tratados (por 18 h MG132 3 µM e tapsigargina 200 nM), mas não em MEFs com deficiência de arginina-tRNA-proteína transferase 1/ATE1 (Cortesia de Yong Tae Kwon, Ph.D., Universidade Nacional de Seul, Coreia).
Análise de western blot: 0,2 µg/ml de um lote representativo detectaram indução da arginilação de BiP Nt-Glu19 em células HeLa tratadas (por 18 h, MG132 3 µM e tapsigargina 200 nM) (Cortesia de Yong Tae Kwon, Ph.D., Universidade Nacional de Seul, Coreia).
Análise de western blot: 0,2 µg/ml de um lote representativo detectou uma banda-alvo de fusão com GFP de R-BiP(19-651) em células de MEF transfectadas para expressar Ub-R-BiP(19-651)-GFP ou Ub-BiP(19-651)-GFP, mas não Ub-V-BiP(19-651)-GFP. Em MEFs com deficiência de ATE1, a banda-alvo de R-BiP(19-651)-GFP foi detectada apenas quando as células foram transfectadas para expressar Ub-R-BiP(19-651)-GFP, mas não Ub-BiP(19-651)-GFP (Cortesia de Yong Tae Kwon, Ph.D., Universidade Nacional de Seul, Coreia).
Análise de dot blot: Um lote representativo detectou o peptídeo imunogênico, mas não o peptídeo controle sem arginilação na extremidade N Glu19 (Cha-Molstad, H., et al. (2015). Nat. Cell Biol. 17(7):917-929).
Análise por ELISA: Um lote representativo detectou o peptídeo imunogênico, mas não o peptídeo controle sem arginilação na extremidade N Glu19 (Cha-Molstad, H., et al. (2015). Nat. Cell Biol. 17(7):917-929).
Análise imunocitoquímica: Um lote representativo detectou a formação de arginilação de BiP induzida pela transfecção de poli(dA:dT)/pontos lacrimais positivos para R-BiP colocalizados com os que contêm conjugados de p62, LC3 e ubiquitina, enquanto as colorações de R-BiP e ER são mutuamente exclusivas (Cha-Molstad, H., et al. (2015). Nat. Cell Biol. 17(7):917-929).
Análise de western blot: Um lote representativo detectou a produção de fusões com cauda R-BiP(19-651) de construtos expressos de forma exógena com cauda Ub-BiP(19-N) e Ub-R-BiP(19-N), mas não Ub-V-BiP(20-N). Em células com deficiência de ATE1, a banda alvo de R-BiP(19-651)-GFP foi detectada apenas quando as células foram transfectadas para expressar Ub-R-BiP(19-651)-GFP, mas não Ub-BiP(19-651)-GF (Cha-Molstad, H., et al. (2015). Nat. Cell Biol. 17(7):917-929).
Análise de western blot: Um lote representativo detectou a indução da arginilação de Nt-Glu19 de BiP (GRP78) após a superexpressão da isoforma arginina-tRNA-proteína transferase 1 (ATE1) 1A7A ou da transfecção de vários dsDNAs, inclusive poli(dA:dT), em células HeLa. A combinação da inibição de proteassoma e indução do estresse do RE (retículo endoplasmático) por um tratamento de 18 h com MG132 10 µM e tapsigargina 100 nM integrou de forma sinérgica a eficácia dos dois medicamentos quanto à indução da arginilação de Nt-Glu18 da calreticulina celular (Cha-Molstad, H., et al. (2015). Nat. Cell Biol. 17(7):917-929).
Categoria de pesquisa
Sinalização
Sinalização
Detecte BiP (GRP78) madura arginilada usando este anticorpo policlonal de coelho antiBiP (GRP78), arginilado (Nt-Glu19), N.° do cat. ABS2103, validado para uso em Dot Blot, ELISA, imunocitoquímica e western blot.
Qualidade
Avaliado por western blot em lisado de células HEK293.
Análise de western blot: 1 µg/ml deste anticorpo detectou a indução da arginilação de Nt-Glu19 da BiP (GRP78) em 7,5 µg de lisado de células HEK293 tratadas (por 17 h com MG132 3 µM e tapsigargina 200 nM).
Análise de western blot: 1 µg/ml deste anticorpo detectou a indução da arginilação de Nt-Glu19 da BiP (GRP78) em 7,5 µg de lisado de células HEK293 tratadas (por 17 h com MG132 3 µM e tapsigargina 200 nM).
Descrição-alvo
aproximadamente 72 kDa observado. 70,62/70,63/70,62/70,63 kDa (bovino/humano/de camundongo/rato) calculado. Bandas não caracterizadas podem ser observadas em um ou mais lisados.
forma física
Anticorpo policlonal de coelho purificado em tampão contendo PBS com 0,05% de azida sódica.
Purificado por afinidade.
Armazenamento e estabilidade
Estável por 1 ano a 2-8 °C a partir da data de recebimento.
Outras notas
Concentração: consulte a ficha de informações específica do lote.
Exoneração de responsabilidade
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Código de classe de armazenamento
12 - Non Combustible Liquids
Classe de risco de água (WGK)
WGK 2
Ponto de fulgor (°F)
Not applicable
Ponto de fulgor (°C)
Not applicable
Certificados de análise (COA)
Busque Certificados de análise (COA) digitando o Número do Lote do produto. Os números de lote e remessa podem ser encontrados no rótulo de um produto após a palavra “Lot” ou “Batch”.
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Sang Mi Shim et al.
Science signaling, 11(511) (2018-01-04)
BiP and other endoplasmic reticulum (ER)-resident proteins are thought to be metabolically stable and to function primarily in the ER lumen. We sought to assess how the abundance of these proteins dynamically fluctuates in response to various stresses and how
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