17-10523
Kit de imunoprecipitação de proteínas de ligação ao RNA nuclear (nativo) EZ-Magna NuCLEAR™ RIP
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About This Item
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Nível de qualidade
Descrição geral
O kit Magna NuCLEAR RIP foi especialmente projetado para permitir a descoberta e análise de diversos RNAs associados à cromatina, como RNAs longos não codificantes, RNAs potenciadores e miRNAs. Esses RNAs associados à cromatina frequentemente regulam a expressão gênica e podem ser analisados com aplicações que incluem reação em cadeia da polimerase com transcrição reversa quantitativa (RT-PCR), análise de microarranjo (RIP-chip) e sequenciamento de próxima geração (RIP-Seq).
A imunoprecipitação de RNA (RIP) nuclear pode ser realizada usando cromatina que possui interações estabilizadas por tratamento com formaldeído (reticulada) ou cromatina que não foi tratada com reagente reticulante (nativa). Embora ambas as abordagens sejam semelhantes na medida em que são projetadas para recuperar o RNA associado à cromatina, os reagentes usados e os detalhes do protocolo e os tipos de interações normalmente detectadas são diferentes. Espera-se que a RIP nativa recupere interações mais diretas de alta afinidade entre proteínas com codificação de motivos de ligação do RNA e candidatos a RNA. Em contraste, a RIP nuclear com cromatina reticulada pode capturar complexos de maior peso molecular em configurações in vivo com afinidades possivelmente mais baixas. Para proteínas e complexos proteicos menos bem compreendidos, é comum usar ambas as abordagens.
A imunoprecipitação de RNA (RIP) nuclear pode ser realizada usando cromatina que possui interações estabilizadas por tratamento com formaldeído (reticulada) ou cromatina que não foi tratada com reagente reticulante (nativa). Embora ambas as abordagens sejam semelhantes na medida em que são projetadas para recuperar o RNA associado à cromatina, os reagentes usados e os detalhes do protocolo e os tipos de interações normalmente detectadas são diferentes. Espera-se que a RIP nativa recupere interações mais diretas de alta afinidade entre proteínas com codificação de motivos de ligação do RNA e candidatos a RNA. Em contraste, a RIP nuclear com cromatina reticulada pode capturar complexos de maior peso molecular em configurações in vivo com afinidades possivelmente mais baixas. Para proteínas e complexos proteicos menos bem compreendidos, é comum usar ambas as abordagens.
Aplicação
O kit de imunoprecipitação de proteínas de ligação ao RNA (nativo) EZ-Magna NuCLEAR RIP é projetado para análise de RNAs associados à cromatina, como lncRNA (RNAs longos não codificantes), RNAs potenciadores e miRNAs.
Embalagem
Capacidade do kit: 24 ensaios de imunoprecipitação de proteínas de ligação ao RNA usando um lisado nuclear nativo (não reticulado)
Componentes
Tampão para isolamento de núcleos; Tampão de lise para RIP; Esferas magnéticas de proteínas A/G; Tampão de lise para RIP; EDTA 0,5 M; DNase I (isenta de Rnase) 2 U/μl; Tampão de reação de DNAse I; Coquetel inibidor de proteases III, sem substâncias de origem animal; Inibidor de RNAses;Primers e anticorpos de controleAnticorpo de controle negativo de IgG normal de camundongo; Anticorpo de controle positivo antiEZH2; Primers de controle positivo NEAT1; Primers de controle negativo U1 snRNA
Informações legais
NuCLEAR is a trademark of Sigma-Aldrich Co. LLC
Exoneração de responsabilidade
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Palavra indicadora
Warning
Frases de perigo
Declarações de precaução
Classificações de perigo
Aquatic Chronic 3 - Eye Irrit. 2 - Skin Irrit. 2
Código de classe de armazenamento
10 - Combustible liquids
Classe de risco de água (WGK)
WGK 3
Certificados de análise (COA)
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