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SYBR^® Green JumpStart^™ Taq ReadyMix^™ für quantitative PCR, Kapillarformulierung

SYBR^® Green qPCR reagent for Roche LightCycler^® capillary systems

• UNSPSC-Code: 41106300
• NACRES: NA.55

Eigenschaften

• Form: liquid
• Verwendung: sufficient for 100 reactions; sufficient for 400 reactions
• Leistungsmerkmale: dNTPs included; hotstart
• Konzentration: 1 units/reaction (20 μL reaction volume)
• Methode(n): qPCR: suitable
• Farbe: colorless
• Aufnahme: purified DNA
• Kompatibilität: for use with Roche LightCycler 480
• Nachweisverfahren: SYBR^® Green
• Versandbedingung: wet ice
• Lagertemp.: −20°C

Beschreibung

Allgemeine Beschreibung

SYBR^® Green JumpStart^™ Taq ReadyMix^™, Kapillarformulierung, kombiniert die Vorteile eines Hot-Start-Enzyms, JumpStart Taq, in einem 2-fach konzentrierten ReadyMix, der speziell für den Einsatz mit Kapillarinstrumenten wie dem LightCycler^®, dem thermalen Echtzeit-Cycler von Roche, entwickelt wurde. SYBR Green JumpStart Taq ReadyMix ist eine optimierte Formulierung, die SYBR Green I Farbstoff, JumpStart Taq-DNA-Polymerase, 99 % reine Desoxynukleotide, Puffer und Stabilisatoren enthält.

SYBR Green Taq ReadyMix wird für Echtzeit-Amplifikationsexperimente mit Einzelprodukten empfohlen und kann auch zur Evaluierung von Primersequenzen vor der Herstellung fluoreszenzmarkierter Sonden eingesetzt werden. Fluoreszenzmarkierte Sonden werden nicht zur Verwendung mit SYBR Green I-Farbstoff empfohlen.

Anwendung

SYBR^® Green JumpStart^™ Taq ReadyMix^™ für die quantitative PCR, Kapillarformulierung wird in einer quantitativen Echtzeit-Polymerase-Kettenreaktion (RT-qPCR) und Reverse-Transkriptase-PCR (RT-PCR) eingesetzt.

Leistungsmerkmale und Vorteile

• Praktischer 2-fach konzentrierter ReadyMix, der speziell für den Einsatz mit Kapillarinstrumenten wie dem Roche LightCycler^® entwickelt wurde und sich ideal für durchsatzhohe Anwendungen eignet.
• Erhöhte Spezifität und Zielausbeute – JumpStart^™ Taq-Polymerase verhindert unspezifische Produkte und sorgt für genauere C_T-Werte und eine verbesserte Quantifizierung.
• Dieser Mastermix sorgt für Konsistenz bei allen Reaktionen
• Für die Verkürzung der Aufbereitungsdauer und die Minimierung der Kontamination durch mehrere Pipettierschritte konzipiert
• Der Doppelstrang-DNA-spezifische SYBR^® Green I-Fluoreszenzfarbstoff ist günstig, einfach zu verwenden und sensitiv, wodurch er sich ideal für die Quantifizierung jeder DNA-Sequenz eignet

Verpackung

Das Standardreaktionsvolumen ist 20 μL.

100RXN ist verpackt als 1 X 1 mL.
400RXN ist verpackt als 1 X 4 mL.

Ein Röhrchen 25 mM MgCl₂ ist zur Vereinfachung der Optimierung der qPCR-Reaktion enthalten.

Prinzip

SYBR Green I, ein gebräuchlicher fluoreszenter DNA-Bindungsfarbstoff, bindet die gesamte doppelsträngige DNA. Die Detektion wird durch Messung des Fluoreszenzanstiegs über den gesamten Zyklus überwacht. Das Anregungsmaximum von SYBR Green I liegt bei 494 nm und das Emissionsmaximum bei 521 nm. Die Spezifität der SYBR-basierten QPCR-Detektion von Sigma wird durch die Integration der Heißstart-vermittelten Taq-Polymerase JumpStart Taq deutlich verbessert.

Der JumpStart Taq-Antikörper inaktiviert die DNA-Polymerase bei Raumtemperatur. Wenn die Temperatur im ersten Denaturierungsschritt des Zyklierungsverfahrens auf über 70 °C erhöht wird, dissoziiert der Komplex und die Polymerase wird voll aktiv. JumpStart Taq DNA-Polymerase verhindert eine unspezifische Amplifikation, wodurch genauere C_T-Werte erzielt werden.

Um eine Reaktion vorzubereiten, fügen Sie 10 μL ReadyMix zu Primern, Template und Wasser hinzu, um ein endgültiges Reaktionsvolumen von 20 μL zu erhalten.

Einheitendefinition

Eine Einheit bindet10 nmol der gesamten dNTP innerhalb von 30 min bei 74 °C in säurefällbare DNA ein.

Rechtliche Hinweise

Die Verwendung dieses Produkts unterliegt einem oder mehreren der folgenden US-Patente und entsprechenden Patentansprüchen außerhalb der USA: 5,994,056 und 6,171,785. Der Erwerb dieses Produkts umfasst eine beschränkte, nicht übertragbare Immunität gegenüber Rechtsschutzverfahren gemäß den oben genannten Patentansprüchen für den ausschließlichen Gebrauch dieser Menge des Produkts für eigene interne Forschungsanwendungen des Käufers. Es wird weder ausdrücklich noch implizit noch durch Rechtsverwirkung ein Rechtsanspruch unter anderen Patentsprüchen (wie z. B. Vorrichtungs- oder Systemansprüche in US-Patent Nr. 6,814,934) oder ein Rechtsanspruch zur Erbringung kommerzieller Leistungen jeglicher Art übertragen, einschließlich, aber nicht beschränkt auf das Melden der Ergebnisse aus den Aktivitäten des Käufers gegen Entgelt oder andere kommerzielle Gegenleistungen. Dieses Produkt ist nur für Forschungszwecke vorgesehen. Diagnostische Anwendungen nach Roche-Patentansprüchen erfordern eine gesonderte Lizenz von Roche. Weitere Informationen über den Erwerb von Lizenzen erhalten Sie vom Director of Licensing, Applied Biosystems, 850 Lincoln Centre Drive, Foster City, California, 94404, USA.

JumpStart is a trademark of Sigma-Aldrich Co. LLC

LightCycler is a registered trademark of Roche

ReadyMix is a trademark of Sigma-Aldrich Co. LLC

SYBR is a registered trademark of Life Technologies

Sicherheitshinweise

• Lagerklassenschlüssel: 10 - Combustible liquids
• WGK: WGK 1
• Flammpunkt (°F): Not applicable
• Flammpunkt (°C): Not applicable