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Merck

P1512

Sigma-Aldrich

Thermolysin from Geobacillus stearothermophilus

Type X, lyophilized powder, 30-350 units/mg protein (E1%/280)

Synonym(e):

Protease aus Bacillus thermoproteolyticus rokko, Thermophilic-bacterial protease

Anmeldenzur Ansicht organisationsspezifischer und vertraglich vereinbarter Preise


About This Item

CAS-Nummer:
EC-Nummer:
EG-Nummer:
MDL-Nummer:
UNSPSC-Code:
12352204
eCl@ss:
32160410
NACRES:
NA.54

Biologische Quelle

Geobacillus stearothermophilus

Typ

Type X

Form

lyophilized powder

Spezifische Aktivität

30-350 units/mg protein (E1%/280)

Mol-Gew.

34.6 kDa by amino acid sequence

Aufgereinigt durch

crystallization

Versandbedingung

wet ice

Lagertemp.

−20°C

Allgemeine Beschreibung

Thermolysin is a protease that has specificity different from other proteases available for sequence investigations.

Anwendung

Eine thermostabile (thermophile) extrazelluläre Metallendopeptidase mit vier Calciumionen. Kofaktoren sind Zink und Calcium. Hydrolysiert Proteinbindungen an der N-terminalen Seite von hydrophoben Aminosäureresten. Der optimale pH-Wert beträgt 8,0 und die optimale Temperatur für Aktivität beträgt 70 °C. Beachtliche Stabilität bei einem pH-Wert von 5 bis 9,5. Thermolysin weist eine geringe Spaltungsspezifizität auf, weshalb es eine Reihe von kurzen Fragmenten erzeugt, die sich zur Sequenzierung eignen. Bevorzugte Spaltung: X-Spaltung-Y-Z, wobei X = eine beliebige Aminosäure; Y = Leu, Phe, Ile, Val, Met, Ala und Z = eine beliebige Aminosäure außer Pro. Eine Spaltung am N-Terminus von Leu wird gegenüber einer Spaltung am N-Terminus von Phe bevorzugt, die gegenüber den anderen bevorzugt wird. Wird häufig verwendet, um eine eingeschränkte Proteolyse für das Peptid-Mapping und Untersuchungen der Proteinstruktur und konformationellen Veränderungen durchzuführen.
Thermolysin has been shown to have a prosequeence that acts as an intramolecular chaperone in vivo. It has also been used in a study to investigate the effects of sodium chloride on thermal stability and catalytic activity.
Thermolysin is also commonly used for the commercial synthesis of N-(benzyloxycarbonyl)-L-aspartyl-L-phenylalanine methyl ester, the precursor for the artificial sweetener aspartame.

Qualität

Contains many extraneous enzymes.

Einheitendefinition

One unit will hydrolyze casein to produce color equivalent to 1.0 μmole (181 μg) of tyrosine per min at pH 7.5 at 37 °C (color by Folin-Ciocalteu reagent).

Physikalische Form

lyophilized powder containing calcium and sodium acetate buffer salts

Angaben zur Herstellung

The pH optimum is 8.0 and the optimal temperature for activity is 70 °C. Considerably stable from pH 5 to 9.5. Thermolysin has a low cleavage specificity, therefore, it produces a number of short fragments that are suitable for sequencing. Preferential cleavage: X-cleavage-Y-Z where X=any amino acid; Y=Leu, Phe, Ile, Val, Met, Ala and Z is any amino acid other than Pro. Cleavage N-terminal to Leu is preferred over cleavage of N-terminal to Phe which is preferred over the others.

Piktogramme

Health hazard

Signalwort

Danger

H-Sätze

Gefahreneinstufungen

Resp. Sens. 1

Lagerklassenschlüssel

11 - Combustible Solids

WGK

WGK 3

Flammpunkt (°F)

Not applicable

Flammpunkt (°C)

Not applicable

Persönliche Schutzausrüstung

dust mask type N95 (US), Eyeshields, Faceshields, Gloves


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K Inouye et al.
Biochimica et biophysica acta, 1388(1), 209-214 (1998-10-17)
Thermolysin, a thermophilic metalloproteinase, is markedly activated in the presence of high concentrations (1-5 M) of neutral salts. The activity increases in an exponential fashion with increasing salt concentration, and is enhanced 13-15 times with 4 M NaCl at pH
The use of thermolysin in amino acid sequence determination.
R P Ambler et al.
The Biochemical journal, 108(5), 893-895 (1968-08-01)
M Miyanaga et al.
Biotechnology and bioengineering, 46(6), 631-635 (1995-06-20)
N-(benzyloxycarbonyl)-L-aspartyl-L-phenylalanine methyl ester, a precursor of the synthetic sweetener, aspartame, was synthesized from N-(benzyloxycarbonyl)-L-aspartic acid and L-phenylalanine methyl ester with an immobilized thermolysin (EC 3.4.24.4) in the mixed organic solvent system of tert-amyl alcohol and ethyl acetate. A mixed solvent
Balbir K Chaal et al.
Methods in molecular biology (Clifton, N.J.), 390, 207-217 (2007-10-24)
All the algae with chlorophyll (Chl) c (haptophytes, cryptophytes, and heterokonts such as diatoms) acquired their chloroplasts by secondary endosymbiosis, where a nonphotosynthetic eukaryote host engulfed (or was invaded by) a red alga. This resulted in chloroplasts with four bounding
Haley Marshall et al.
Acta crystallographica. Section D, Biological crystallography, 68(Pt 1), 69-81 (2011-12-24)
Both crystallization and cryoprotection are often bottlenecks for high-resolution X-ray structure determination of macromolecules. Methylamine osmolytes are known stabilizers of protein structure. One such osmolyte, trimethylamine N-oxide (TMAO), has seen occasional use as an additive to improve macromolecular crystal quality

Protokolle

To standardize a procedure for the enzymatic assay of Protease using Casein as a substrate.

Unser Team von Wissenschaftlern verfügt über Erfahrung in allen Forschungsbereichen einschließlich Life Science, Materialwissenschaften, chemischer Synthese, Chromatographie, Analytik und vielen mehr..

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