GE27-0843-01

PreScission Protease

Cytiva 27-0843-01

• Synonym(e): Fusionsprotein, Entfernung von GST-Tag
• UNSPSC-Code: 41106501
• NACRES: NA.56

Eigenschaften

• Verpackung: pkg of 500 units
• Hersteller/Markenname: Cytiva 27-0843-01
• Versandbedingung: dry ice
• Lagertemp.: −70°C

Beschreibung

Allgemeine Beschreibung

PreScission Protease ist ein Fusionsprotein der 3C-Protease des humanen Rhinovirus (HRV) und GST. Es ermöglicht die Spaltung von GST-Tags auf der Säule und die Proteinreinigung in einem Schritt.

Enzymatische Spaltung auf oder außerhalb der Säule

GST-Tags und Proteasen können in einem einzigen Schritt entfernt werden, während die Fusionsproteine​noch an Glutathion-Sepharose-4B-, Glutathion-Sepharose-High-Performance- oder Glutathion-Sepharose 4 Fast Flow-Affinitätsharz gebunden sind. Eine andere Möglichkeit besteht darin, das GST-markierte Protein mit reduziertem Glutathion zu eluieren, zu spalten und die Probe dann über dasselbe Harz zu leiten, um die Protease und die Tags zu entfernen. Im Gegensatz zu anderen gängigen Proteasen wie Thrombin und Faktor Xa kann dieses GST-markierte Fusionsprotein leicht durch Bindung an ein Harz mit Affinität zu GST entfernt werden. Andere nicht rekombinante Proteasen erfordern einen zusätzlichen Reinigungsschritt mit einem anderen Harz.

Vektoren, die die Erkennungssequenz der HRV-3C-Protease codieren

Die pGEX-6P-Vektoren pGEX-6P-1, pGEX-6P-2 und pGEX-6P-3 codieren die Erkennungssequenz für diese 3C-Protease.

Anwendung

Spezifische Tieftemperaturspaltung von Fusionsprotein-Tags; Einfache säulenbasierte Spaltung während der Affinitätsaufreinigung
PreScission Protease wurde verwendet für die Eluierung von GST-markierten AT3-Proteinen bei In-vitro-Ubiquinierungsreaktionen und Vorbereitung der AT3-Ub. Sie wurde auch für die Spaltung des GST-Tags von der alpha-Enolase während der Induktion der GST-a-Enolaseexpression in dem Protease-defizienten Escherichia coli-Stamms BL21 verwendet.

Leistungsmerkmale und Vorteile

• Spezifische Spaltung – zwischen den Gln- und Gly-Resten der Erkennungssequenz LeuGluValLeuPheGln/GlyPro
• Zeitsparend –GST-markierte Proteine​können gespalten werden, während sie noch an das Affinitätsharz gebunden sind.
• Niedrige Inkubationstemperatur –ermöglicht bei niedriger Temperatur die Spaltung von Fusionsproteinen, die die Erkennungssequenz der HRV-3C-Protease enthalten.

Lagerung und Haltbarkeit

Bitte beachten Sie, dass dieses Produkt möglicherweise 90 Tage vor dem Verfallsdatum versandt wird. Für weitere Informationen zum chargenspezifischen Verfallsdatum wenden Sie sich bitte an den technischen Kundendienst.

Hinweis zur Analyse

Das Analysenzertifikat für dieses Produkt finden Sie unter www.cytiva.com.

Rechtliche Hinweise

pGEX-Vektoren
pGEX-Vektoren dürfen nur für wissenschaftliche Untersuchungen und Forschungszwecke und nicht für irgendwelche anderen Zwecke verwendet werden. Für eine Lizenz für kommerzielle Anwendungen der lizenzierten Produkte und Verfahren, die im US-Patent Nr. 5.654.176 sowie in anderen Patenten und Patentanmeldungen in anderen Ländern beansprucht werden, muss sich der Käufer vor einer solchen Verwendung direkt mit der Millipore Corp (vormals Chemicon International Inc) zwecks Verhandlungen in Verbindung setzen.

Sicherheitshinweise

• Lagerklassenschlüssel: 12 - Non Combustible Liquids
• WGK: WGK 1
• Flammpunkt (°F): Not applicable
• Flammpunkt (°C): Not applicable