D5319

Desoxyribonuklease I Rind

recombinant, expressed in Pichia pastoris, buffered aqueous glycerol solution, ≥5,000 units/mg protein

• Synonym(e): DNAse I, Desoxyribonukleat-5′-oligo-nukleotidhydrolase
• EC-Nummer: 3.1.21.1 (BRENDA, IUBMB)
• MDL-Nummer: MFCD00130918
• UNSPSC-Code: 12352204
• NACRES: NA.54

Eigenschaften

• Biologische Quelle: bovine
• Qualitätsniveau: 200
• Rekombinant: expressed in Pichia pastoris
• Assay: ≥95%
• Form: buffered aqueous glycerol solution
• Spezifische Aktivität: ≥5,000 units/mg protein
• Mol-Gew.: ~39 kDa
• Methode(n): DNA extraction: suitable
• Eignung: suitable for molecular biology
• Anwendung(en): diagnostic assay manufacturing
• Fremdaktivität: RNAse and protease, free
• Versandbedingung: dry ice
• Lagertemp.: −20°C

Beschreibung

Anwendung

DNase I von Sigma wurde in einer Studie verwendet, um durch Behandlung von nukleärem Lysat einzelne Nukleosome zu erhalten. Außerdem wurde das Enzym für die Präparierung und das Abernten von Milchdrüsen der Maus genutzt.

Ebenso wurde Desoxyribonuklease I des Rindes in einer Studie genutzt, um die initialen Aktionen von Desoxyribonuklease der Milz und des Pankreas zu vergleichen. Außerdem wurde Desoxyribonuklease I des Rindes in einer Studie verwendet, um Deoxythymidin-3′, 5′-di-p-nitrophenylphosphat als synthetisches Substrat aus Desoxyribonuklease des Rinderpankreas zu untersuchen.

Wird verwendet für das Entfernen von DNA aus Proteinproben.

Biochem./physiol. Wirkung

Dnase I ist eine Endonuklease; sie wirkt auf Phosphodiesterbindungen, die neben Pyrimidinen liegen, und erzeugt so Polynukleotide mit terminalen 5′-Phosphaten. Der optimale pH-Wert liegt zwischen 7 und 8. Zweiwertige Kationen wie Mn²⁺, Ca²⁺, Co²⁺ und Zn²⁺ aktivieren das Enzym. Eine Konzentration von 5 mM Ca²⁺ stabilisiert das Enzym gegen proteolytische Verdauung. 2-Mercaptoethanol, Chelatoren, Natriumdodecylsulfat (SDS) und Aktin hemmen bekanntlich die Enzymaktivität.

Erzeugt aus ein- und doppelsträngiger DNA mittels Verdau eine Mischung aus Mono- und Oligonukleotiden, die 5′-Phosphate und 3′-OH-Termini besitzen. Diese katalytische Aktivität ist divalent ionenabhängig. In Gegenwart von Mg²⁺ hydrolysiert DNase I jeden Strang von Doppelstrang-DNA unabhängig und nach dem Zufallsprinzip. In Gegenwart von Mn²⁺ können beide Stränge aufgespalten werden.

Leistungsmerkmale und Vorteile

• RNA-Aufreinigung durch Entfernen von DNA
• Präparation von DNA für die Nick-Translation¹
• Footprinting-Assays für die Bestimmung von DNA-Protein-Interaktionen²

Einheitendefinition

Eine Einheit erzeugt ein ΔA₂₆₀ von 0,001 pro Minute und pro Milliliter Reaktionsgemisch, wobei DNA vom Thymus des Kalbs bei einem pH-Wert von 5,0 und einer Temperatur von 25 °C verwendet wird.

Physikalische Form

Wird als Lösung in 4 mg/ml Glycin bei pH 5,0, 5 mM Calciumacetat und 50 % Glycerin geliefert

Angaben zur Herstellung

Produziert ohne Verwendung von Tierzellen oder Materialien tierischen Ursprungs

Sicherheitshinweise

• Lagerklassenschlüssel: 10 - Combustible liquids
• WGK: WGK 1
• Flammpunkt (°F): Not applicable
• Flammpunkt (°C): Not applicable