CC161-1050UG

ECMatrix-511 Silk E8 Laminin-Substrat

Xeno-free laminin-511 coating for feeder-free pluripotent stem cell cultures

• Synonym(e): ECMatrix E8 Substrate, Laminin Substrate
• UNSPSC-Code: 12352202
• NACRES: NA.81

Eigenschaften

• Beschreibung: 1050 μg (Silkworm derived)
• Form: liquid
• Verpackung: pkg of 6 X 175 μg
• Methode(n): cell culture | stem cell: suitable
• Lagertemp.: 2-8°C

Beschreibung

Allgemeine Beschreibung

„Das ECMatrix-Substrat ermöglicht einen vereinfachten Workflow für die Verarbeitung humaner iPSC. Wie sparen Zeit, indem wir die Notwendigkeit zum Vorbeschichten unserer Kulturgefäße eliminieren und gleichzeitig hochwertige pluripotente Stammzellkulturen erhalten.“ - Forscher, Cell Therapy Bioprocessing Group.

„Humane ES-Zellen, die auf dem ECMatrix-Substrat wachsen, weisen eine hohe Zellviabilität sowie Proliferation auf und konnten nach mehreren Passagen differenzieren. Außerdem spart uns das Substrat Zeit, indem es die Notwendigkeit zum Vorbeschichten von Kulturgefäßen eliminiert.“ - Leitender Stammzellenforscher, Regenerative Medicine Process Development Group.

Humane pluripotente Stammzellen (ES- und iPS-Zellen) exprimieren α6β1 als Hauptintegrinspezies und können daher unter Feeder-freien Bedingungen in Kulturgefäßen, die mit seinem Bindungspartner Laminin-511 beschichtet sind, stabil erhalten werden und wachsen effizient. Laminin-511 eignet sich aufgrund seiner großen Molekülmasse und heterotrimeren Natur jedoch nicht für die Herstellung auf großem Maßstab. Die Gruppe um Professor Kiyotoshi Sekiguchi (Matrixome, Inc.) löste dieses Problem durch das Erzeugen eines rekombinanten E8-Fragments von Laminin-511 auf großem Maßstab bei gleichzeitiger Erhaltung der vollen Integrin-Bindungsaktivität.

Anwendung

Xeno-freie Laminin-511-Beschichtung für Feeder-freie pluripotente Stammzellkulturen, 1050 μg (von der Seidenraupe)

Leistungsmerkmale und Vorteile

Das ECMatrix-511 E8 Laminin-Substrat kann zum Kultivieren von pluripotenten Stammzellen unter Feeder-freien Bedingungen eingesetzt werden und bietet gegenüber traditionellen Methoden zahlreihe zusätzliche Vorteile, zum Beispiel:

• Tier-freies, Xeno-freies Format: Gleichbleibend über alle Chargen hinweg, kein Prescreening erforderlich
• Keine Plattenvorbeschichtung erforderlich: Sparen Sie Zeit, indem Sie die Medien beim Passagieren von Zellen zugeben
• Unterstützt das Passagieren von Einzelzellen ohne ROCKi: Ausgezeichnet für CRISPR-Editing oder Klonisolierung
• Höhere Anhaftungs- und Wachstumsraten: Schneller zu Ihren Experimenten
• Einfache Handhabung: Kein Kühlen von Verbrauchsmaterialien für Zellkulturen erforderlich

Verpackung

1050 μg (6 x 175 μg)

Komponenten

6 x 175 μg ECMatrix-511 E8 Laminin-Substrat (0,5 mg/ml in PBS). In transgenen Seidenraupenkokons exprimiert.

Qualität

• Reinheit (SDS-PAGE): > 95 %
• Endotoxinprüfung: = 750 EU/mg
• Mykoplasmaprüfung: Negativ
• Sterilitätsprüfung: Negativ
• Integrin-Bindungsassay (kDa): ~ 10 nmol/l

Angaben zur Herstellung

Abhängig von der Anwendung kann entweder ein Verfahren mit oder ohne Vorbeschichtung zum Kultivieren von pluripotenten Stammzellen verwendet werden.

Verfahren ohne Vorbeschichtung
1. Zellen mit Accutase zu kleinen Klumpen oder Einzelzellen lösen.
2. ECMatrix-511 mit einer Endkonzentration von 0,25 μg/cm² zu frischen Medien geben (zum Beispiel: für einen Well einer 6-Well-Mikrotiterplatte 5 μl der 0,5-mg/ml-Stammlösung zugeben).
3. Zellen zu ECMatrix-511/Medien geben und die Zellen mit der gewünschten Dichte ausplattieren.

Verfahren mit Vorbeschichtung
1. 0,5 -mg/ml-Stammlösung mit steriler PBS verdünnen, um eine 2,5-μg/ml-Arbeitslösung herzustellen.
2. Gefäße mit ECMatrix-511 zu 0,25 μg/cm² beschichten (zum Beispiel: für einen Well einer 6-Well-Mikrotiterplatte 1 ml der 2,5-μg/ml-Arbeitslösung zugeben).
3. Für 1 Stunde bei 37 °C, 3 Stunden bei Raumtemperatur oder über Nacht bei 4 °C inkubieren.
4. Vor dem Gebrauch die restliche Flüssigkeit von der beschichteten Oberfläche entfernen (nicht abspülen).
5. Zellen mit Accutase zu kleinen Klumpen lösen.
6. Zellen mit der gewünschten Dichte ausplattieren.

Hinweis: Lassen Sie die Platten nicht trocknen. Schleudern Sie die ganze Flüssigkeit in dem Röhrchen vor dem Gebrauch kurz nach unten. Wiederholte Einfrier- und Auftauzyklen sind zu vermeiden.

Lagerung und Haltbarkeit

ECMatrix-511 E8 Laminin-Substrate sollten bei 2–8 °C gelagert werden. Mehrere Einfrier-Auftau-Zyklen vermeiden. Lichtgeschützt aufbewahren.

Haftungsausschluss

Sofern in unserem Katalog oder anderen Begleitdokumenten unserer Produkte nicht anders angegeben, sind unsere Produkte nur für Forschungszwecke vorgesehen und nicht für andere Zwecke zu verwenden, einschließlich, jedoch nicht beschränkt auf unautorisierte kommerzielle Verwendung, zur In-vitro-Diagnostik, für Ex-vivo- oder In-vivo-Therapiezwecke oder jegliche Art der Einnahme oder Anwendung bei Menschen oder Tieren.

Sicherheitshinweise

• Lagerklassenschlüssel: 12 - Non Combustible Liquids