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Merck

细胞健康分析

活/死细胞双重染色

细胞健康分析试剂、试剂盒和工具可用于测量细胞培养活力的一般和特异性指标。其中,活力检测可用作测量细胞健康的一般指标,或与细胞毒性检测一起用于评估处理条件的影响。增殖检测通常使用DNA合成和细胞分裂作为特定条件或处理下细胞代谢活性的测量指标。细胞毒性试剂盒可采用生物还原读数来评估代谢活性。

培养物污染是进行有效、可靠细胞培养的常见障碍之一。尽管某些污染物可通过对培养物进行仔细的显微镜检查而检测到,但诸如支原体等污染物无法通过视觉方法检测。因此,应使用能够可靠检测微生物污染物的试剂盒和试剂对培养物进行定期筛查。培养室需要使用能够在污染出现时将其降低最低或消除的试剂,从而增强无菌技术并形成良好的培养室规范。

我们全面的细胞健康产品线包括

细胞活力和增殖检测

可测量细胞增殖和细胞活力的检测常被用于监测用各种刺激物处理后培养物中细胞的应答和健康状况。检测方法的选择取决于所要评估的细胞数、类型以及预期的结果。细胞增殖检测可以监测一段时间内的细胞数、细胞分裂的次数、代谢活性或DNA合成。使用诸如台盼蓝钙黄绿素-AM等活性染料进行的细胞计数分析可以提供增殖率以及存活细胞的百分比。5(6)-羧基荧光素二乙酸酯N-琥珀酰亚胺酯(CFSE)是测量细胞群所经历的细胞分裂次数的常用方法。进入细胞后,CFSE会被细胞内酯酶裂解形成荧光化合物,而琥珀酰亚胺基酯基会与细胞内蛋白上的伯胺发生共价反应。每次分裂后,每个子细胞的荧光强度都会减半,使得可以通过流式细胞仪而对细胞分裂的代数进行简单的检测。

在96孔板中,MTT被活细胞代谢为甲臜盐

在96孔板中,MTT被活细胞代谢为甲臜盐

我们用于测定细胞活力和增殖的全面工具和解决方案利用了多种方法,并包括:

  • DNA合成增殖检测
  • 代谢增殖检测
  • 发光细胞活力检测
  • 荧光染料增殖检测
  • 用于3D培养的活细胞/死细胞/总细胞三重染色
  • 台盼蓝染料排除法活力计数

细胞毒性检测

可测量代谢活性的检测可适用于增殖、活力和细胞毒性的分析。四唑盐(如MTT和XTT)至有色甲䐶化合物的还原反应,或刃天青的生物还原反应,仅发生在代谢活性细胞中。活跃增殖的细胞会提高其代谢活性,而诸如暴露于毒素的受损细胞则会表现出活性的下降。

凋亡分析检测

细胞死亡对于发育和体内稳态过程中的多种正常生理性功能是必需的。肿瘤细胞能够逃避也被称为凋亡的程序性细胞死亡,这种能力是大多数类型癌症的标志。多种细胞蛋白,包括细胞表面受体、接头蛋白、蛋白酶和线粒体成分,可通过细胞凋亡而在细胞存活与死亡之间调节出一种良好的平衡。通过精心选择检测不仅能够帮助分析细胞培养条件和处理条件对细胞健康的影响,还能用于分析它们对细胞健康影响的机制。我们可提供用于早期、中期和晚期凋亡检测的全面检测产品线。

细胞污染检测和消除

维持无污染的细胞培养物是细胞研究的基础条件。支原体污染是最普遍的细胞培养问题之一,而支原体是一种形态特征为亚微米大小且不存在细胞壁的细菌,因此难以或无法通过显微镜检出且对多种抗生素具有抗性。尽管支原体通常不会引起细胞死亡,但它们可对培养的细胞造成多种影响,包括代谢异常、增殖减慢和染色体畸变。简而言之,支原体污染降低了相关细胞系的有效性,无法为生命科学研究提供有意义的数据。

DAPI或Hoechst等常见DNA检测试剂结合荧光显微镜揭示污染培养物中存在的支原体。

我们用于支原体检测和消除的工具包括:

  • LookOut®支原体PCR检测试剂盒,及其他用于可靠、灵敏检测细胞培养物中支原体的PCR和qPCR试剂盒
  • 用于通过支原体培养进行检测的胰蛋白示磷酸盐肉汤和其他试剂
  • 用于通过荧光DNA染色法进行支原体检测的DNA染料
  • 用于支原体污染消除的LookOut®支原体消除喷雾和试剂


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