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用途
sufficient for 100 reactions
sufficient for 500 reactions
品質等級
儲存期限
≤12 mo.
特點
Difficult Templates/Specialty Enzymes PCR
dNTPs included
hotstart
包裝
kit of 1.25 mL (100 x 25 μL rxn; KK5701)
kit of 6.25 mL (500 x 25 μL rxn; KK5702)
製造商/商標名
Roche
濃度
2 × ( contains 2 mM MgCl2 at 1×)
技術
PCR: suitable
輸入
crude DNA
儲存溫度
−20°C
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一般說明
第二代 KAPA2G Robust DNA 聚合酶研发用于解决多种扩增子类型(富含GC和AT的扩增子)扩增不一致的问题。KAPA2G Robust HotStart® ReadyMix™ 具有更高的持续合成能力和特异活性,可实现稳健的PCR性能,灵敏度高,增强对常见抑制剂耐受性。KAPA2G Robust DNA 聚合酶的高性能非常适合具有挑战性的PCR应用和高难样品,无需使用多种酶和方案进行优化。
應用
KAPA2G Robust HotStart® ReadyMix™ 用于:
- 扩增富含 GC-或 AT-的模板
- 扩增含有常见聚合酶链反应(PCR)抑制剂的模板(抑制剂如盐、尿素、SDS或乙醇)
- 粗制样本 PCR(粗制样本如口腔拭子,培养的哺乳动物细胞、酵母细胞或细菌细胞)
- 菌落 PCR
- DNA 提取和扩增
- 突变筛查
- 甲基化特异性PCR(MSP)扩增
- 基因分型-PCR
- 基于PCR测序
生化/生理作用
用 KAPA2G Robust HotStart® DNA 聚合酶产生的DNA片段与用野生型Taq DNA 聚合酶产生的 DNA 片段具有相同特性,可用于限制性内切酶消化,克隆和测序等常规下游分析及应用。与野生型Taq一样,KAPA2G Robust HotStar 具有5'→3'聚合酶和5'→3'核酸外切酶活性,不具有3'→5'核酸外切酶(校对)活性。KAPA2G Robust HotStart 的保真度与野生型Taq相似。错误率约为每插入1.7 x 105个核苷酸产生1个错误。KAPA2G Robust HotStart产生的PCR产物带3'-dA尾,可以克隆到TA克隆载体。
特點和優勢
高效扩增高GC和AT含量的靶标
提高对普通 PCR 抑制剂的耐受性
菌落 PCR 中无与伦比的性能
临时速记:
- 在广泛的高GC和AT含量模板中表现稳健
- 提高 PCR 成功率
提高对普通 PCR 抑制剂的耐受性
- 从粗制样品高效扩增
- 单位酶的产率和灵敏度更高
菌落 PCR 中无与伦比的性能
- 直接来自 大肠杆菌 和酵母细胞的 PCR产率更高,一致性更好
临时速记:
- KAPA2G 耐用热启动 ReadyMix PCR 试剂盒包含 KAPA2G Robust DNA 聚合酶,专为高持续性和抑制剂耐受性而设计。
- 纯化的基因组 DNA 和粗制样品(例如菌落 PCR)均可用作模板。
- 每个循环使用 15 s/kb 的扩展时间,对于困难的扩增子或模板,增加到 30-60 s/kb。
- (1X) KAPA2G 耐用热启动 ReadyMix 含有 2 mM MgCl 2 。
- 带染料KAPA2G 耐用热启动 ReadyMix包括两种惰性追踪染料,可直接上样到琼脂糖凝胶上。
- KAPA2G 耐用热启动 ReadyMix 是单方案 PCR 的理想选择,即使用单反应设置和循环方案扩增 25-65%GC ,至 1 kb 不等的片段。
- 反应产物为 3′-dA-尾,可克隆至 TA 克隆载体。
品質
每批KAPA2G耐用热启动DNA聚合酶均被证实含有< 2%的污染蛋白(安捷伦蛋白质230分析)。KAPA2G 耐用热启动 ReadyMix PCR试剂盒经过严格的质量控制测试,不含污染性的外切和内切核酸酶活性,符合关于DNA污染水平的严格要求。
準備報告
使用前务必确保产品已经完全解冻和混合。试剂可储存在4℃条件下,以供短期使用(最长1个月)。返回-20℃条件进行长期储存。如果所有成分都经过小心处理且未被污染,试剂盒在室温下放置短时间(最长3天)预计不会受到损害。不建议在室温和4℃条件下长期储存。请注意,储存在-20℃以上条件下的试剂在使用过程中受到污染时更容易降解,因此储存在这种温度条件下的风险由用户自行承担。
其他說明
仅供研究使用。不用于诊断操作。
法律資訊
HOTSTART is a registered trademark of Molecular BioProducts, Inc.
ReadyMix is a trademark of Sigma-Aldrich Co. LLC
僅套裝組件
產品號碼
描述
- KAPA2G Robust HotStart® DNA Polymerase 1U per 25 µL reaction
- MgCl2 2mM at 1X
- dNTP Mix 0.2 mM of each dNTP at 1X
訊號詞
Warning
危險聲明
危險分類
Acute Tox. 4 Oral - STOT SE 2
儲存類別代碼
12 - Non Combustible Liquids
水污染物質分類(WGK)
WGK 1
閃點(°F)
does not flash
閃點(°C)
does not flash
分析證明 (COA)
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