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用途
sufficient for 1000 reactions
sufficient for 200 reactions
sufficient for 500 reactions
sufficient for 5000 reactions
品質等級
儲存期限
≤12 mo.
特點
Difficult Templates/Specialty Enzymes PCR
dNTPs included: no
hotstart
包裝
pkg of 100 U (KK5522)
pkg of 250 U (KK5515)
pkg of 2500 U (KK5525)
pkg of 500 U (KK5517)
製造商/商標名
Roche
技術
PCR: suitable
輸入
crude DNA
儲存溫度
−20°C
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一般說明
第二代 KAPA2G Robust DNA 聚合酶的进化解决了广泛扩增子类型(富含 GC 和 AT)的不一致扩增。KAPA2G Robust HotStart PCR 试剂盒能够实现更高的过程性和比活性,这转化为稳健的 PCR 性能、高灵敏度和对常见抑制剂的耐受性改善。KAPA2G 稳健 DNA 聚合酶的高性能非常适合具有挑战性的 PCR 应用和困难的样本,无需使用多种酶和方案进行优化。
應用
KAPA2G Robust HotStart® PCR试剂盒已用于:
- 唾液样本的PCR扩增
- PCR扩增以便进行直接测序
- 巢式PCR
- 扩增富含 GC 或 AT 的模板
- 含有常见 PCR 抑制剂(例如,盐、尿素、SDS 或乙醇)的模板
- 粗制样本 PCR,例如口腔拭子,培养的哺乳动物、酵母或细菌细胞
- 菌落 PCR
- RT-PCR
生化/生理作用
KAPA2G Robust HotStart® DNA聚合酶产生的DNA片段与野生型Taq DNA聚合酶产生的DNA片段相似。KAPA2G Robust HotStart聚合酶的保真度近似于野生型Taq聚合酶;错配率为每1.7 x 105核苷酸约有1个错误。它可用于限制性内切酶消化、克隆和测序。同野生型Taq聚合酶一样,KAPA2G Robust HotStart聚合酶具有5′→3′聚合酶和5′→3′外切酶活性,但不具有3′→5′外切酶(校正)活性。
特點和優勢
高效扩增富含 GC 和 AT 的靶标
提高对普通 PCR 抑制剂的耐受性
菌落 PCR 中无与伦比的性能
快速注释:
- 在各种 GC 和 AT 富集模板中表现稳健
- 提高 PCR 成功率
提高对普通 PCR 抑制剂的耐受性
- 从粗样品中高效扩增
- 每单位酶的产量和灵敏度更高
菌落 PCR 中无与伦比的性能
- 来自大肠杆菌和酵母细胞的 PCR direct 产量更高,一致性更好
快速注释:
- KAPA2G Robust HotStart PCR Kit 包含 KAPA2G Robust HotStart DNA 聚合酶,设计用于高处理能力和抑制剂耐受性。
- 纯化的基因组 DNA 和粗样品(例如菌落 PCR)均可用作模板。
- 每 25μ 使用 0.5 UKAPA2G Robust HotStart DNA 聚合酶L 反应。更具挑战性的 PCR(GCrich,粗品)可能需要更高的酶浓度。
- 每个循环使用 15 s/kb 的延伸时间,对于困难的扩增子或模板,增加到 30-60 s/kb。
- KAPA2G 缓冲液含 1.5 mM MgCl2 (1X)。
- 可使用试剂盒中提供的 25 mM MgCl2 溶液添加额外的 MgCl2。
- KAPA2G 缓冲液 A 针对高产量、高特异性和高灵敏度进行了优化。
- 推荐将 KAPA2G 缓冲液 B 用于抑制剂污染的模板样品。
- KAPA2G GC 缓冲液推荐用于富含 GC 的 PCR ( 70%GC)。
- KAPA 增强剂 1 可与 KAPA2G 缓冲液 A 或 B 一起使用,尤其是用于富含 GC 的检测。
- 反应产物具有 3′-dA 尾式,可克隆至 TA 克隆载体。
品質
每批 KAPA2G Robust HotStart DNA 聚合酶经确认含<2% 污染蛋白 (Agilent protein 230 Assay)。KAPA2G Robust HotStart PCR kits 经过严格的质量控制测试,没有污染的外切和内切核酸酶活性,满足 DNA 污染水平方面的严格要求。
準備報告
在每次使用前,应确保产品已完全解冻并充分混合。短期使用时,可将试剂保存4°C条件下(最长1个月)。长期储存时,应将试剂放回-20°C环境中。如果所有组分均经过仔细处理且无污染,则在室温下(无意地)短时间(最多3天)放置,预计不会破坏试剂盒。不建议在室温和4°C下长期保存。请注意,储存在高于-20°C的温度下的试剂在使用过程中受到污染时更容易降解,因此在此温度下储存的风险由用户自负。
其他說明
仅用于研究目的。不用于诊断程序。
法律資訊
HOTSTART is a registered trademark of Molecular BioProducts, Inc.
僅套裝組件
產品號碼
描述
- KAPA2G Robust Standard or HotStart® DNA Polymerase 5 U/μL
- 5X KAPA2G Buffer A
- 5X KAPA2G Buffer B
- 5X KAPA2G GC Buffer with MgCl2
- 5X KAPA Enhancer 1
- MgCl2 25 mM
訊號詞
Warning
危險聲明
危險分類
Acute Tox. 4 Oral - Aquatic Chronic 3 - STOT SE 2
儲存類別代碼
12 - Non Combustible Liquids
水污染物質分類(WGK)
WGK 1
閃點(°F)
does not flash
閃點(°C)
does not flash
分析證明 (COA)
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