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形狀
solution
品質等級
用途
sufficient for 20 reactions
包裝
pkg of 40 μL
製造商/商標名
Roche
雜質
Ribonuclease, none detected (up to 20 µl using MSII-RNA)
顏色
colorless
溶解度
water: miscible
儲存溫度
−20°C
一般說明
标记效率:来自1μg 线性模板DNA的约10μg的全长地高辛标记RNA被转录。
检测时间:135分钟
样本材料
线性化质粒DNA:
待转录的DNA将会被克隆至含有SP6,T7或T3 RNA聚合酶启动子并相邻于多接头的合适转录载体的多接头位点。对于“流失”转录本的合成,质粒是通过限制性酶进行线性化的。限制性酶生成的5′-突出应当被使用;3′ 突出应当被避免。线性化的模板DNA应当通过酚氯仿抽提及乙醇沉淀进行纯化,以避免RNase的污染。对于′run around′转录环状质粒DNA会被使用。
PCR产物:
含有RNA聚合酶启动子序列的PCR片段也可被用作转录的模板。推荐在转录之前对PCR片段使用HIghPure柱进行纯化。
检测时间:135分钟
样本材料
线性化质粒DNA:
待转录的DNA将会被克隆至含有SP6,T7或T3 RNA聚合酶启动子并相邻于多接头的合适转录载体的多接头位点。对于“流失”转录本的合成,质粒是通过限制性酶进行线性化的。限制性酶生成的5′-突出应当被使用;3′ 突出应当被避免。线性化的模板DNA应当通过酚氯仿抽提及乙醇沉淀进行纯化,以避免RNase的污染。对于′run around′转录环状质粒DNA会被使用。
PCR产物:
含有RNA聚合酶启动子序列的PCR片段也可被用作转录的模板。推荐在转录之前对PCR片段使用HIghPure柱进行纯化。
通过这种方法,特定长度的DIG标记单链RNA探针通过体外转录被生成。在标准条件下,DIG-11-UTP通过SP6、T7和T3 RNA聚合酶以大约每20到25个核苷酸的间隔插入转录产物中。DIG RNA标记混合物专门设计用于优化转录缓冲液的SP6, T7和T3 RNA聚合酶。
便捷的核苷酸混合物用于基于地高辛-11-UTP的RNA标记
内含物
10x 溶液带有:10 mM ATP, CTP, GTP (各), 6.5 mM UTP, 3.5 mM DIG-11-UTP.
便捷的核苷酸混合物用于基于地高辛-11-UTP的RNA标记
内含物
10x 溶液带有:10 mM ATP, CTP, GTP (各), 6.5 mM UTP, 3.5 mM DIG-11-UTP.
特異性
热灭活:添加 2 μl 0.2 M EDTA (pH 8.0) 终止反应。
應用
利用SP6,T7及T3 RNA聚合酶通过体外转录而使用地高辛-11-UTP进行RNA标记。DIG标记RNA已用于多种杂交技术:
- Northern blots
- Southern blots
- 斑点印迹
- 菌斑或克隆提升
- RNase保护实验
- 染色体, 细胞, 及组织切片原位
特點和優勢
DIG RNA标记混合物专门设计用于来自Roche并配以优化的转录缓冲液的SP6, T7和T3 RNA聚合酶。
品質
经DIG RNA标记试剂盒和DIG核酸检测试剂盒检测的功能。
其他說明
仅用于生命科学研究。不可用于诊断。
訊號詞
Warning
危險聲明
危險分類
Acute Tox. 4 Oral
儲存類別代碼
12 - Non Combustible Liquids
水污染物質分類(WGK)
WGK 1
閃點(°F)
does not flash
閃點(°C)
does not flash
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文章
Digoxigenin (DIG) labeling methods and kits for DNA and RNA DIG probes, random primed DNA labeling, nick translation labeling, 5’ and 3’ oligonucleotide end-labeling.
條款
DIG RNA Labeling Mix Protocol & Troubleshooting
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