MABS1253

抗O-GlcNAc抗体，克隆RL1

clone RL1, from mouse

• 同義詞: β-GlcNAc, β-linked N-acetylglucosamine, O-GlcNAc, O-linked β-GlcNAc
• 分類程式碼代碼: 12352203
• eCl@ss: 32160702
• NACRES: NA.41

屬性

• 生物源: mouse
• 品質等級: 100
• 抗體表格: purified immunoglobulin
• 抗體產品種類: primary antibodies
• 無性繁殖: RL1, monoclonal
• 物種活性: human, Drosophila, Xenopus, rat
• 技術: affinity binding assay: suitable; electron microscopy: suitable; immunocytochemistry: suitable; immunofluorescence: suitable; immunohistochemistry: suitable; immunoprecipitation (IP): suitable; inhibition assay: suitable; western blot: suitable
• 同型: IgMκ
• 運輸包裝: ambient
• 目標翻譯後修改: glycosylation
• 基因資訊: human ... OGT(8473)

描述

一般說明

蛋白质通过 β-连接的 N-乙酰氨基葡萄糖（β-GlcNAc）经由丝氨酸或苏氨酸残基上的羟基部分进行的翻译后修饰称为 O-连接的 β-GlcNAc 或简称为 O-GlcNAc。O-GlcNAc是所有动植物核质区室中最丰富的翻译后修饰之一。与其他类型的蛋白质糖基化不同，O-GlcNAc仅发生在核和细胞质区室中，通常不进行进一步修饰以形成更细长的结构。此外，O-GlcNAc糖基化是一个高度动态且可逆的过程。O-GlcNAc转移酶(OGT)将O-GlcNAc附着在特定丝氨酸或苏氨酸残基的蛋白质上，而O-GlcNAcase催化从蛋白质中去除/水解O-GlcNAc。实际上，O-GlcNAc糖基化和丝氨酸/苏氨酸磷酸化之间的动态相互作用在调节细胞信号传导中起着重要作用。Tau和RNA聚合酶II（Pol II）是两种众所周知的蛋白质，它们通过O-GlcNAc糖基化进行修饰。在患阿尔茨海默氏症的人脑中，tau 被广泛磷酸化，而被 O-GlcNAcy 则非常少。类似地，当转录的延伸阶段开始时，O-GlcNAc被去除并在Poly II CTD上被O-磷酸盐取代。

特異性

克隆 RL1 & 克隆RL2 （货号MABS157号 MABS157）均靶向 O-连接的 N-乙酰基氨基葡萄糖（GlcNAc）修饰的（GlcNAcylated）蛋白。通过 β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶处理去除 GlcNAc 或通过半乳糖基转移酶处理将目标蛋白上的 GlcNAc 半乳糖基化，会极大地降低了克隆 RL1 & RL2 对目标蛋白的免疫反应性。RL1 和 RL2 对给定的 GlcNAc 修饰的蛋白的结合亲和力取决于 O-GlcNAc 和相邻的核心蛋白结构（Snow, C.M., et al. (1987).J. Cell Biol. 104(5):1143-11560; Holt, G.D., et al. (1987).J. Cell Biol. 104（5）:1157-1164）。

目标结构不是物种特异性的。

免疫原

从大鼠肝核包膜中分离出的核孔复合物-椎板部分。

應用

使用这种小鼠单克隆 Anti-O-GlcNAc，克隆 RL1（货号 MABS1253） 检测 GlcNAcylated 蛋白，经验证可用于亲和结合、电子显微镜、免疫细胞化学、免疫荧光、免疫组化、免疫沉淀、抑制和蛋白质印迹。

免疫组化分析：一个代表批次以 1:50 的稀释度在大鼠肾脏和脾脏组织切片中检测到 O-GlcNAc 修饰的胞质和核孔蛋白。

亲和力结合测定：克隆RL1 &克隆RL2（货号 MABS157）的一个代表性批次彼此部分竞争性结合固定化的 180 kDa O-GlcNAc 修饰的核被膜蛋白（Snow, C.M., et al. (1987).J. Cell Biol. 104(5):1143-11560）。

电子显微镜分析：一个代表性批次免疫定位位于孔复合物的胞质和/或核质边缘的靶蛋白，而对分离的大鼠肝核包膜的核周空间没有特异性染色（Snow, C.M., et al. (1987).J. Cell Biol. 104(5):1143-11560）。

免疫细胞化学分析：一个代表性批次通过荧光免疫细胞化学染色法检测低聚甲醛固定、Triton X-100 透化的 HeLa 细胞、NRK 正常大鼠肾上皮细胞和分离的大鼠肝核的核被膜（Yang, L., et al. (1997).J. Cell Biol. 139(5):1077-1087; Byrd, D.A., et al. (1994).J. Cell Biol. 127(6 Pt 1):1515-1526; Snow, C.M., et al. (1987).J. Cell Biol. 104(5):1143-11560）。

免疫荧光分析：一个有代表性批次通过荧光免疫组化对从三龄果蝇幼虫中分离出唾液腺（经甲醛固定、Triton X-100 透化的）中的核被膜蛋白进行染色。（Goldberg, M., et al. (1998).Mol.Cell.Biol. 18(7):4315-4323）。

免疫荧光分析：代表性批次通过荧光免疫组化法染色了甲醇固定的非洲爪蟾卵巢和大鼠肝脏冰冻切片的核被膜（Featherstone, C., et al. (1988).J. Cell Biol. 107(4):1289-1297; Snow, C.M., et al. (1987).J. Cell Biol. 104(5):1143-11560）。

免疫沉淀分析：一个有代表性的批次免疫沉淀了来自大鼠肝脏和 NRK 正常大鼠肾脏上皮细胞的盐洗过的核被膜制品中的几个核被膜蛋白。通过半乳糖基转移酶处理将核被膜蛋白上的 GlcNAc 半乳糖基化，会显着抑制了克隆 RL1 对这些核孔复合糖蛋白的免疫吸附（Snow, C.M., et al. (1987).J. Cell Biol. 104(5):1143-11560; Holt, G.D., et al. (1987).J. Cell Biol. 104(5):1157-1164）。

抑制分析：当注射到非洲爪蟾卵母细胞细胞质植物半球中时，一个代表性批次以剂量依赖性方式抑制核纤溶酶核的导入，而不影响肌红蛋白核的导入或 RNA 的输出（Featherstone, C., et al. (1988).J. Cell Biol. 107(4):1289-1297）。

蛋白质印迹分析：代表性批次在非洲爪蟾卵母细胞核提取物中和盐洗过的大鼠肝核包膜制品中检测到了几种核包膜蛋白，包括 210、180、145、100、63、58、54 和 45 kDa 的目标条带。用 β-N-乙酰葡糖胺糖苷酶处理去除 GlcNAc 大大降低了克隆 RL1 检测这些核孔复合糖蛋白的能力（Byrd, D.A., et al. (1994).J. Cell Biol. 127(6 Pt 1):1515-1526; Featherstone, C., et al. (1988).J. Cell Biol. 107(4):1289-1297; Snow, C.M., et al. (1987).J. Cell Biol. 104(5):1143-11560; Holt, G.D., et al. (1987).J. Cell Biol. 104（5）:1157-1164）。

品質

通过免疫组化在大鼠结肠组织中进行了评估。

免疫组化分析：该抗体以 1:50 的稀释度在大鼠结肠组织切片中检测到 O-GlcNAc 修饰的细胞质和核孔蛋白。

標靶描述

可变，取决于O-GlcNAc糖基化蛋白的大小。报道的分子量：〜210/180/145/100/63/58/54/45 kDa（Snow, C.M., et al. (1987).J. Cell Biol. 104(5):1143-11560; Holt, G.D., et al. (1987).J. Cell Biol. 104（5）:1157-1164）。某些裂解液可能会出现未表征的条带。

外觀

在不含防腐剂的 PBS 缓冲液中的纯化的小鼠 IgM。

形式：纯化

儲存和穩定性

自收到之日起，在 -20°C 条件下可稳定保存 1 年。
处理建议：收货后，在取下瓶盖之前，将小瓶离心并轻轻混合溶液。分装到微量离心管中，并储存于-20°C。避免反复冻融

其他說明

浓度：请参考特定批次的数据表。

安全資訊

• 儲存類別代碼: 12 - Non Combustible Liquids
• 水污染物質分類（WGK）: WGK 2
• 閃點（°F）: Not applicable
• 閃點（°C）: Not applicable