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17-10242

Sigma-Aldrich

ChIPAb+三甲基组蛋白H3(Lys9) - ChIP免疫沉淀验证抗体和引物试剂套装

clone CMA308, from mouse

同義詞:

H3K9me3, Histone H3 (tri methyl K9), H3 histone family, member T, histone 3, H3, histone cluster 3, H3

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About This Item

分類程式碼代碼:
12352203
eCl@ss:
32160702
NACRES:
NA.52

生物源

mouse

品質等級

抗體表格

purified immunoglobulin

無性繁殖

CMA308, monoclonal

物種活性

human, vertebrates

製造商/商標名

ChIPAb+
Upstate®

技術

ChIP: suitable
western blot: suitable

同型

IgG1κ

NCBI登錄號

UniProt登錄號

運輸包裝

dry ice

相關類別

一般說明

对每批、每次的全部ChIPAb+抗体的染色质沉淀进行单独验证。每个ChIPAb+抗体组均包含对照引物(通过qPCR对每个批次进行检测),以在基因座特异性环境下对IP结果进行生物学验证。提供了qPCR方案和引物序列,使研究人员能够在染色质环境中使用我们的抗体时验证ChIP方案。每组还包括阴性对照抗体,以确保ChIP反应的特异性。
ChIPAb+三甲基组蛋白H3(Lys9)套装包含三甲基组蛋白H3(Lys9)抗体、正常小鼠IgG、对照引物(用于扩增ZNF554的117bp区)。三甲基组蛋白H3(Lys9)抗体和阴性对照抗体的规格与ChIP反应次数成比例,可用于功能性验证三甲基组蛋白H3(Lys9)相关染色质的免疫沉淀。
组蛋白H3是参与真核细胞染色质结构的五种主要组蛋白之一。H3具有一个主要的球状结构域和一个长N末端的尾巴,其与核糖体核小体′串珠′结构体的结构有关。组蛋白的翻译后修饰程度较高,其中组蛋白H3是5种组蛋白中修饰最广泛的。组蛋白H3的序列变异和可变修饰状态在基因的动态及长期调控中发挥着作用。Lys9(H3K9me3)上组蛋白H3的三甲基化是研究最深入的表观遗传标记之一。H3K9me3在常染色体基因的抑制和异染色质组装的表观遗传控制中起作用,最有可能通过充当与染色质相关蛋白(例如Swi6或HP1α)结合的识别基序来发挥作用。负责H3K9三甲基化的酶是SUV39H1和Suv39h2。

特異性

基于序列相似性,预期具有广泛的物种交叉反应。
该抗体可识别在Lys9处三甲基化的组蛋白H3。浓度较高时,会与二甲基Lys9发生交叉反应,但特异性差别>27倍。1Ser10磷酸化会干扰抗体与三甲基Lys91的结合。

免疫原

对应于Lys9三甲基化人组蛋白H3的KLH标记合成肽。
表位:三甲基化Lys9

應用

染色质免疫沉淀:
代表性批次数据。
采用1 µL正常小鼠IgG或1 µL抗三甲基组蛋白H3(Lys9)抗体和Magna ChIP® G试剂盒(货号17-611),对HeLa细胞来源的、超声制备的染色质(每次IP需1 X 10E6细胞)进行染色质免疫沉淀。 以人ZNF554区域特异性ChIP引物为阳性位点,人GAPDH启动子引物为阴性位点,经qPCR反应鉴定三甲基组蛋白H3(Lys9)相关DNA片段,验证ChIP实验成功。 (图2)。 数据表示为每个IP样本扩增子值相对于染色质输入(input)扩增子值的百分比(Percent Input),ChIP样本如图所示。
实验详细信息请参阅EZ-Magna ChIP G(货号17-409)或EZ-ChIP(货号17-371)试剂盒方案。
蛋白质印迹分析:
代表性批次数据。
电泳分离重组组蛋白H3(货号14-494)(泳道1)和HeLa细胞酸提取物(泳道2),转印至PVDF膜,用抗三甲基组蛋白H3(Lys9)抗体(克隆号CMA308)(2 μg/mL)检测。 用HRP标记的山羊抗小鼠二抗和化学发光检测系统对蛋白显色。

箭头表示三甲基组蛋白H3(Lys9)(~17 kDa)。(图3)。
研究子类别
组蛋白
研究类别
表观遗传学&核功能
该ChIPAb+三甲基组蛋白H3(Lys9)-ChIP验证抗体&引物套装方便提供了抗体&PCR特异性对照引物。

包裝

每组25次测定。推荐用于:每次染色质免疫沉淀约1 μL抗体(取决于生物学背景)。

品質

染色质免疫沉淀:
代表性批次数据。
采用1 µL正常小鼠IgG或1 µL抗三甲基组蛋白H3(Lys9)抗体和Magna ChIP® G试剂盒(货号17-611),对HeLa细胞来源的、超声制备的染色质(每次IP需1 X 10E6细胞)进行染色质免疫沉淀。 以人ZNF554区域特异性ChIP引物为阳性位点,经qPCR反应鉴定三甲基组蛋白H3(Lys9)相关DNA片段,验证ChIP实验成功。 有关实验详细信息,请参阅EZ-Magna ChIPG(目录号17-409)或EZ-ChIP(目录号17-371)方案。

標靶描述

~17 kDa

外觀

形式:纯化
抗三甲基组蛋白H3(Lys9)抗体(小鼠单克隆)。1小瓶,25 µL纯化小鼠单克隆IgG1,溶于PBS,含有0.05%叠氮化钠,然后添加甘油至30%。储存于-20°C。
正常小鼠IgG。1小瓶,包含25 µg纯化IgG,溶于25 µL储存缓冲液(含0.1%叠氮化钠)中。 在-20°C下储存。
对照引物,ZNF554。1小瓶,含有75 μL的5 μM人ZNF554 3’端特异性引物。在-20°C下储存。
正向:CGG GGA AAA GCC CTA TAA AT
反向:TCC ACA TTC ACT GCA TTC GT
蛋白G纯化

儲存和穩定性

自收到之日起,在2-8°C条件下可稳定保存1年。为了最大程度地回收产品,在取下盖子之前,将原始样品瓶进行离心。避免反复冻融循环,以免损坏IgG和影响产品性能。

分析報告

对照
包括正常小鼠IgG和人ZNF554特异性引物。

法律資訊

MAGNA CHIP is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
UPSTATE is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

免責聲明

除非我们的产品目录或产品附带的其他公司文档另有说明,否则我们的产品仅供研究使用,不得用于任何其他目的,包括但不限于未经授权的商业用途、体外诊断用途、离体或体内治疗用途或任何类型的消费或应用于人类或动物。

儲存類別代碼

10 - Combustible liquids


分析證明 (COA)

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