跳转至内容
Merck
所有图片(1)

文件

ECAS9GFPPR

Sigma-Aldrich

eSpCas9-GFP蛋白质

from Streptococcus pyogenes with mutations conferring enhanced specificity, fused with enhanced GFP, recombinant, expressed in E. coli, 3X NLS

别名:

eSpCas9-EGFP, eSpCas9-GFP

登录查看公司和协议定价
所有图片(1)

About This Item

分類程式碼代碼:
12352202
NACRES:
NA.51

重組細胞

expressed in E. coli

化驗

≥90% (SDS-PAGE)

形狀

lyophilized powder

包裝

pkg of 1 kit (3 components)

報告基因

GFP

運輸包裝

wet ice

儲存溫度

−20°C

相关类别

一般說明

来源于化脓性链球菌的重组增强特异性Cas9-GFP蛋白（~192KD）是一种用于基因组工程实验的即用型试剂。当与靶标特异性的向导RNA结合时，eSpCas9-GFP蛋白可作为靶向核酸酶，用于细胞培养物的转染和通过单细胞胚胎注射加速遗传修饰动物的发育。

N端融合的增强型绿色荧光蛋白具有488 nm的激发峰和509 nm的发射峰，除了可用于流式细胞术应用之外，还可以用于观察转染的RNP复合物。  该蛋白质还包含三个不同的核定位序列，这些序列的位置可以实现最佳的活性。

應用

  • 功能基因组学
  • 靶标验证
  • 基因组编辑
  • 荧光显微镜
  • 流式细胞术

特點和優勢

  • 与野生型Cas9相比具有增强的特异性
  • 高活性
  • 可立即用于注射/转染

包裝

50 μg（≥260 pmol）装
250 μg（≥1300 pmol）装

成分

每个试剂盒包含：
  • 一瓶冻干的eSpCas9-GFP重组蛋白
  • 一瓶1x稀释缓冲液，1 mL
  • 一瓶含有甘油的1 mL无核酸酶水

原則

CRISPR/Cas被细菌和古细菌用作防御入侵病毒和质粒的防御系统。最近，来源于化脓性链球菌的II型CRISPR/Cas系统已被设计为在真核系统中起作用，其使用两种分子组分：单一Cas9蛋白和非编码向导RNA（gRNA）。可以通过单个gRNA对Cas9内切核酸酶进行编程，从而将DNA双链断裂（DSB）导向所需的基因组位置。与由锌指核酸酶（ZFN）诱导的DSB类似，细胞随后激活内源DNA修复过程[非同源末端连接（NHEJ）或同源定向修复（HDR）]，以愈合目标DSB。

新型工程化的eSpCas9（1.1）可对已经建立的CRISPR系统进行有效的靶向基因编辑，并具有更低脱靶效应的优势。如Slaymaker等人所述，SpCas9染色体结合基序中的点突变（K848A/K1003A/R1060A）可提供更高的靶上保真度，而不会降低切割效率。

重構

冻干增强特异性化脓性链球菌eSpCas9-GFP蛋白应重悬于所提供的复溶溶液，获得所需浓度。轻轻敲打试管以完全溶解冻干的粉末，在冰上孵育10分钟，然后离心试管以使内容物离心至试管底部。

其他說明

利用我们的 CRISPR选择工具 订购gRNA

访问SigmaAldrich.com/CRISPRproteins，查看我们的其他 MISSION® Cas9 蛋白

法律資訊

CRISPR 使用许可协议
MISSION is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

儲存類別代碼

11 - Combustible Solids

分析证书(COA)

输入产品批号来搜索 分析证书(COA) 。批号可以在产品标签上"批“ （Lot或Batch）字后找到。

已有该产品？

在文件库中查找您最近购买产品的文档。

访问文档库

Ian M Slaymaker et al.
Science (New York, N.Y.), 351(6268), 84-88 (2015-12-03)
The RNA-guided endonuclease Cas9 is a versatile genome-editing tool with a broad range of applications from therapeutics to functional annotation of genes. Cas9 creates double-strand breaks (DSBs) at targeted genomic loci complementary to a short RNA guide. However, Cas9 can

商品

Validating CRISPR/Cas9-mediated Gene Editing

After you have performed a CRISPR experiment it is important to determine which gRNAs performed successfully editing. There are many ways to validate CRISPR gene editing experiments. A quick and easy way to check for cutting is by using the Sigma-Aldrich® T7E1 mismatch detection kit.

实验方案

SygRNA® Synthetic CRISPR Guide RNAs

Sigma-Aldrich® sgRNA, crRNA and tracrRNA come HPLC purified as standard with our performance guarantee—even for custom designs.

Ribonucleoprotein (RNP) Protocols using SygRNA ® gRNAs and Cas9 proteins

Combine guaranteed sgRNAs with our comprehensive range of CRISPR products and tools, including Cas9 and delivery reagents, for efficient genome modification with higher specificity.

我们的科学家团队拥有各种研究领域经验，包括生命科学、材料科学、化学合成、色谱、分析及许多其他领域.

联系技术服务部门