CRISPR02

CRISPR Nickase EMX1 Positive Control

• 分類程式碼代碼: 41106609
• NACRES: NA.51

属性

• 形狀: liquid
• 品質等級: 200
• 包裝: pkg of 3 vials (50μL aliquot for each of the 3 kit components)
• 濃度: 20 ng/μL in TE buffer; DNA (1μg of plasmid DNA)
• 應用: CRISPR
• 運輸包裝: dry ice
• 儲存溫度: −20°C

说明

一般說明

经验证的CRISPR位点，可作为Cas9-D10A 切口酶系统的实验对照。一个三组份阳性对照系统由一个CMV驱动型Cas9质粒，一个靶向人类EMX1基因正义链的U6驱动型向导RNA质粒和一个靶向人类EMX1基因反义链的U6驱动型向导RNA质粒组成。

應用

Functional Genomics/Target Validation

• Creation of gene knockouts in cell lines
• Creation of knock-in cell lines with promoters, fusion tags or reporters integrated into endogenous genes

特點和優勢

使用Cas9-D10A切口酶 ，作为CRISPR编辑工作流程的实验对照。利用CRSIPR/Cas9系统对您的系统进行验证。错误匹配检测试验的阳性结果将表明您的系统是有效的。

成分

1管含1μg 表达正义链序列的质粒。1管含1μg 表达反义链序列的质粒。1管含1μg 表达Cas9-D10A的质粒。

原則

CRISPR/Cas 是细菌和古细菌的一种防御系统，可用来对抗入侵的病毒和质粒。来自酿脓链球菌的II型CRISPR/Cas系统包含两种分子元件，即一个Cas9蛋白和一个非编码向导RNA（gRNA），该系统经过基因改造而被用于真核系统中。Cas9 核酸内切酶可在单个gRNA的引导下，在指定基因组位置上引入DNA双链断裂（DSB）。与锌指核酸酶（ZFN）诱导的DSB相似，细胞随后会激活内源性DNA修复程序，即非同源性末端接合（NHEJ）或同源重组修复机制（HDR），对目标DSB进行修复。

外觀

Sigma U6-gRNA质粒可表达一个靶向人类EMX1的向导序列，以浓度为20ng/μl的50µl溶液形式提供。Sigma Cas9-D10A 切口酶质粒以浓度为20ng/μl的50µl溶液形式提供。

準備報告

Sigma CRISPR质粒产品为小量提取包装，可能不适用于转染到特殊类型的细胞中。为得到最佳结果，我们建议在转染前使用无内毒素的DNA纯化试剂盒大量提取质粒。

其他說明

文献中使用的标准转染浓度范围为≥1.0 μg/μl且≤5 uL的Cas9-D10A切口酶质粒结合≥1.0 μg/μl且≤5 ul的U6-gRNA质粒。（上述所有浓度均假设是对0.5~1百万个细胞进行核转染）

法律資訊

CRISPR专利正在申请中

安全信息

• 儲存類別代碼: 12 - Non Combustible Liquids
• 水污染物質分類（WGK）: WGK 1
• 閃點（°F）: Not applicable
• 閃點（°C）: Not applicable