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一般說明
通过过滤、硫酸铵沉淀、透析和冻干从溶组织梭菌培养物制备胶原酶B。来自溶组织梭菌的胶原酶是一种胶原分解酶。它与胶原蛋白样物质相互作用,负责将胶原蛋白降解成小肽。它广泛用于分解许多类型的组织(如肺,心脏,肌肉,骨骼,脂肪组织,肝脏,肾脏,软骨,乳腺,胎盘,血管,脑,肿瘤)和单一的准备——用于建立原代细胞培养系统的细胞悬浮液。当产量和活力很重要时,建议使用胶原酶B。
特異性
胶原酶降解天然胶原蛋白。梭菌蛋白酶、胰蛋白酶样酶和中性蛋白酶也会降解其他蛋白质。
應用
来自 Roche的梭菌胶原酶已用于制备来自许多类型组织的细胞,例如肝细胞、脂肪细胞、胰岛、上皮细胞、肌肉细胞、内皮细胞等。然而,每批酶对于破坏特定细胞的适合性。组织应根据经验确定。
胶原酶B已用于制备来自小鼠主动脉和结肠直肠癌组织的细胞。
胶原酶B已用于制备来自小鼠主动脉和结肠直肠癌组织的细胞。
規格
酶活性:
胶原酶活性:>0.15U/mg(根据Wünsch)(+ 25℃,4-苯基 - 偶氮苄基 - 氧基羰基-Pro-Leu-Gly-Pro-D-Arg作为底物)
污染酶活性:胰蛋白酶,梭菌蛋白酶和总量蛋白水解活性
胶原酶B 具有正常至高的胶原酶活性和高于平均的梭菌蛋白酶活性(通常 > 10U/mg)。
抑制剂:
胶原酶抑制剂:EDTA、EGTA、Cys、His、DTT、2-巯基乙醇
胶原酶不受血清抑制。
梭菌蛋白酶抑制剂:TLCK
胰蛋白酶抑制剂:抑肽酶、胰蛋白酶抑制剂(蛋清,大豆)、血清
胶原酶活性:>0.15U/mg(根据Wünsch)(+ 25℃,4-苯基 - 偶氮苄基 - 氧基羰基-Pro-Leu-Gly-Pro-D-Arg作为底物)
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胶原酶B 具有正常至高的胶原酶活性和高于平均的梭菌蛋白酶活性(通常 > 10U/mg)。
抑制剂:
胶原酶抑制剂:EDTA、EGTA、Cys、His、DTT、2-巯基乙醇
胶原酶不受血清抑制。
梭菌蛋白酶抑制剂:TLCK
胰蛋白酶抑制剂:抑肽酶、胰蛋白酶抑制剂(蛋清,大豆)、血清
單位定義
来自 Roche的胶原酶以Wünsch单位进行测定(每分钟在+ 25°C下用 Wünsch 底物形成 1 μmol 产物)。
通常,胶原酶活性以 Mandl 单位给出(在+ 37℃ 下 5 小时内从胶原释放的1 μmol 亮氨酸)。
遗憾的是,两个活性单位之间没有一致的转换因子,因为Mandl 单位部分取决于胶原酶制剂中污染蛋白酶的浓度,这是一个不确定的变量。较纯的胶原酶制剂实际上在Mandl单元中比粗制剂具有更低的比活性。梭菌制剂通常给出约 1:1800的转换因子(例如,特定批次的梭菌胶原酶含有约0.15 Wünsch U/mg和250 Mandl U/mg)。
通常,胶原酶活性以 Mandl 单位给出(在+ 37℃ 下 5 小时内从胶原释放的1 μmol 亮氨酸)。
遗憾的是,两个活性单位之间没有一致的转换因子,因为Mandl 单位部分取决于胶原酶制剂中污染蛋白酶的浓度,这是一个不确定的变量。较纯的胶原酶制剂实际上在Mandl单元中比粗制剂具有更低的比活性。梭菌制剂通常给出约 1:1800的转换因子(例如,特定批次的梭菌胶原酶含有约0.15 Wünsch U/mg和250 Mandl U/mg)。
準備報告
激活剂:Ca2+
工作浓度:0.5至2.5 mg/ml
储存条件(工作溶液):-15至-25°C
Roche 建议仅重悬立即使用所需的冻干量。重新配制的溶液可以在-15至-25 °C下储存长达一周。因为重新配制后活性降低了,所以要避免反复冻融。
工作浓度:0.5至2.5 mg/ml
储存条件(工作溶液):-15至-25°C
Roche 建议仅重悬立即使用所需的冻干量。重新配制的溶液可以在-15至-25 °C下储存长达一周。因为重新配制后活性降低了,所以要避免反复冻融。
重構
在任何平衡盐溶液(例如HBSS)中重悬
其他說明
仅用于生命科学研究。不可用于诊断。
訊號詞
Danger
危險分類
Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3
標靶器官
Respiratory system
儲存類別代碼
11 - Combustible Solids
水污染物質分類(WGK)
WGK 1
閃點(°F)
does not flash
閃點(°C)
does not flash
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