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生物源
mouse
品質等級
抗體表格
purified antibody
抗體產品種類
primary antibodies
無性繁殖
IF2, monoclonal
形狀
liquid
包含
≤0.1% sodium azide as preservative (100 μg only)
物種活性
human
應無反應活性
mouse
製造商／商標名
Calbiochem®
儲存條件
do not freeze
同型
IgG2b
運輸包裝
wet ice
儲存溫度
2-8°C
目標翻譯後修改
unmodified
基因資訊
human ... MDM2(4193)
mouse ... Mdm2(17246)
一般說明
可识别~90 kDa（表观分子量）MDM2蛋白。也可通过免疫印迹识别~57 kDa和~74/76 kDa的亚型。
纯化的小鼠单克隆抗体（参见应用参考文献）。可识别~90 kDa（表观分子量）MDM2蛋白。也可识别~57和~74/76 kDa的亚型。
该抗MDM2（Ab-1）小鼠mAb（IF2）经验证可用于冰冻切片、免疫印迹、免疫荧光、免疫沉淀、石蜡切片中检测MDM2（Ab-1）。
免疫原
人
人MDM2
表位：人MDM2的氨基酸26-169内
應用
冰冻切片（1-5 µg/ml，见应用参考文献）
免疫印迹（0.5-2 µg/ml，化学发光）
免疫荧光（1-5 µg/ml）
免疫沉淀（1 µg/样品）
石蜡切片（1-5 µg/ml，需要加热预处理，见应用参考文献）
免疫印迹（0.5-2 µg/ml，化学发光）
免疫荧光（1-5 µg/ml）
免疫沉淀（1 µg/样品）
石蜡切片（1-5 µg/ml，需要加热预处理，见应用参考文献）
包裝
请参考特定浓度批号的标签。
警告
毒性：标准处理（A）
外觀
溶于50 mM磷酸钠缓冲液，含0.2％明胶。
分析報告
阳性对照
OSA-CL细胞
OSA-CL细胞
其他說明
Gorgoulis, V.G., et al. 1996.J. Pathol.180, 129.
Marchetti, A., et al. 1995.J. Pathol.175, 31.
Barak, Y., et al. 1993.EMBO J.12, 461.
Ladanyi, M., et al. 1993.Cancer Res.53, 16.
Leach, F.S., et al. 1993.Cancer Res.53, 2231.
Oliner, J.D., et al. 1993.Nature362, 857.
Momand, J., et al. 1992.Cell69, 1237.
Oliner, J.D., et al. 1992.Nature358, 80.
Fakharzadeh, S.S., et al. 1991.EMBO J. 10, 1565.
Marchetti, A., et al. 1995.J. Pathol.175, 31.
Barak, Y., et al. 1993.EMBO J.12, 461.
Ladanyi, M., et al. 1993.Cancer Res.53, 16.
Leach, F.S., et al. 1993.Cancer Res.53, 2231.
Oliner, J.D., et al. 1993.Nature362, 857.
Momand, J., et al. 1992.Cell69, 1237.
Oliner, J.D., et al. 1992.Nature358, 80.
Fakharzadeh, S.S., et al. 1991.EMBO J. 10, 1565.
尽管MDM2的氨基酸序列预测蛋白质分子量约为54 kDa，但MDM2蛋白质在SDS/PAGE上迁移的表观迁移率为90 kDa。
免疫印迹方案
MDM2（Ab-1）可用于通过蛋白质印迹法检测MDM2，该蛋白质先前已通过SDS/PAGE分离并电泳转移到硝酸纤维素膜上。蛋白质与单克隆抗体反应，并使用HRP标记的山羊抗小鼠抗体和化学发光检测进行可视化。
材料
设备：
•电泳仪
• 电印迹仪
• Rocker platform
溶液和试剂
• 抗-MDM2（Ab-1）小鼠mAb（IF2）目录编号OP46或OP46T
• HRP偶联山羊抗小鼠IgG重链和轻链（例如目录编号401215）
• 化学发光检测系统
• ELB缓冲液（包括蛋白酶抑制剂混合物，例如0.5 µg/ml亮肽素, 1 µg/ml胃酶抑素， 1 mM EDTA和0.2 mM PMSF）：50 mM Hepes pH 7.0，250 mM NaCl，0.5 mM EDTA，0.1% Nonidet P-40替代物
• SDS-PAGE（7%丙烯酰胺）
• 磷酸盐缓冲盐水（PBS）pH 7.4；1升：0.2 g KCl，0.2 g KH2PO4，8 g NaCl，1.15 g Na2HPO4
• PBS/0.1% Tween®-20洗涤剂（PBST）
• PBST中3%脱脂奶粉的
程序
1.在ELB缓冲液中裂解细胞。（或者，细胞可以在RIPA缓冲液中裂解或直接在1X Laemmli样品缓冲液中裂解）。
2.使用7%丙烯酰胺凝胶电泳50-100 µg裂解物。
3.使用电印迹仪将蛋白质样品从聚丙烯酰胺凝胶转移到硝酸纤维素膜上。
4.室温下通过摇摆将膜在含3%脱脂奶粉的PBST中封闭1 h。使用约1 ml/cm2的膜。
5.将膜与溶于3%脱脂奶粉/PBST中的1 µg/mL抗MDM2（Ab-1）小鼠mAb（IF2）在室温下摇晃孵育1小时。
6.室温下在PBST中摇动洗涤膜3次，每次15分钟。
7.将膜与HRP标记的山羊抗小鼠IgG重链和轻链抗体（根据供应商’说明稀释）在3%脱脂奶粉/PBST中于室温下孵育1小时。
8.室温下在PBST中摇动洗涤膜4次，每次15分钟。
9.根据生产商的说明，使用化学发光检测试剂显影膜。
10.将膜暴露于膜10分钟。根据需要调整后续暴露时间。
免疫印迹方案
MDM2（Ab-1）可用于通过蛋白质印迹法检测MDM2，该蛋白质先前已通过SDS/PAGE分离并电泳转移到硝酸纤维素膜上。蛋白质与单克隆抗体反应，并使用HRP标记的山羊抗小鼠抗体和化学发光检测进行可视化。
材料
设备：
•电泳仪
• 电印迹仪
• Rocker platform
溶液和试剂
• 抗-MDM2（Ab-1）小鼠mAb（IF2）目录编号OP46或OP46T
• HRP偶联山羊抗小鼠IgG重链和轻链（例如目录编号401215）
• 化学发光检测系统
• ELB缓冲液（包括蛋白酶抑制剂混合物，例如0.5 µg/ml亮肽素, 1 µg/ml胃酶抑素， 1 mM EDTA和0.2 mM PMSF）：50 mM Hepes pH 7.0，250 mM NaCl，0.5 mM EDTA，0.1% Nonidet P-40替代物
• SDS-PAGE（7%丙烯酰胺）
• 磷酸盐缓冲盐水（PBS）pH 7.4；1升：0.2 g KCl，0.2 g KH2PO4，8 g NaCl，1.15 g Na2HPO4
• PBS/0.1% Tween®-20洗涤剂（PBST）
• PBST中3%脱脂奶粉的
程序
1.在ELB缓冲液中裂解细胞。（或者，细胞可以在RIPA缓冲液中裂解或直接在1X Laemmli样品缓冲液中裂解）。
2.使用7%丙烯酰胺凝胶电泳50-100 µg裂解物。
3.使用电印迹仪将蛋白质样品从聚丙烯酰胺凝胶转移到硝酸纤维素膜上。
4.室温下通过摇摆将膜在含3%脱脂奶粉的PBST中封闭1 h。使用约1 ml/cm2的膜。
5.将膜与溶于3%脱脂奶粉/PBST中的1 µg/mL抗MDM2（Ab-1）小鼠mAb（IF2）在室温下摇晃孵育1小时。
6.室温下在PBST中摇动洗涤膜3次，每次15分钟。
7.将膜与HRP标记的山羊抗小鼠IgG重链和轻链抗体（根据供应商’说明稀释）在3%脱脂奶粉/PBST中于室温下孵育1小时。
8.室温下在PBST中摇动洗涤膜4次，每次15分钟。
9.根据生产商的说明，使用化学发光检测试剂显影膜。
10.将膜暴露于膜10分钟。根据需要调整后续暴露时间。
法律資訊
CALBIOCHEM is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
TWEEN is a registered trademark of Croda International PLC
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儲存類別代碼
10 - Combustible liquids
水污染物質分類（WGK）
nwg
閃點（°F）
Not applicable
閃點（°C）
Not applicable
Yongliang Hu et al.
Oncogene, 38(5), 731-746 (2018-09-05)
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