ZRB2227

Anti-phospho-ULK1-Ser555 Antibody, clone 1E17 ZooMAb^® Rabbit Monoclonal

recombinant, expressed in HEK 293 cells

• Synonim(y): Kinaza serynowo-treoninowa ULK1; Homolog białka związanego z autofagią 1; ATG1; hATG1; Kinaza podobna do Unc-51 1
• Kod UNSPSC: 12352203
• NACRES: NA.43

Właściwości

• pochodzenie biologiczne: rabbit
• Poziom jakości: 200
• rekombinowane: expressed in HEK 293 cells
• białko sprzężone: unconjugated
• forma przeciwciała: purified antibody
• rodzaj przeciwciała: primary antibodies
• klon: 1E17, recombinant monoclonal
• opis: 1E17 Clone
• linia produktu: ZooMAb^® learn more
• Formularz: lyophilized
• masa cząsteczkowa: calculated mol wt 114.90 kDa; observed mol wt ~160 kDa
• oczyszczone przez: using Protein A
• reaktywność gatunkowa: human
• reaktywność gatunkowa (przewidywana na podstawie homologii): monkey
• opakowanie: antibody small pack of 25 μL
• charakterystyka ekologicznej alternatywy: Waste Prevention; Designing Safer Chemicals; Design for Energy Efficiency; Learn more about the Principles of Green Chemistry.
• rozszerzona walidacja: recombinant expression; Learn more about Antibody Enhanced Validation
• sustainability: Greener Alternative Product
• metody: affinity binding assay: suitable; immunocytochemistry: suitable; peptide synthesis: suitable; western blot: suitable
• izotyp: IgG
• sekwencja epitopowa: Internal
• numer dostępu Protein ID: NP_003556
• numer dostępu UniProt: O75385
• kategoria ekologicznej alternatywy: Aligned,
• Warunki transportu: ambient
• temp. przechowywania: 2-8°C
• docelowa modyfikacja potranslacyjna: phosphorylation (pSer555)
• informacje o genach: human ... ULK1(8408)

Opis

Opis ogólny

Jesteśmy zaangażowani w dostarczanie bardziej ekologicznych produktów alternatywnych, które są zgodne z co najmniej jedną z 12 zasad zielonej chemii. To przeciwciało nie zawiera konserwantów, jest produkowane bez szkody dla zwierząt i wyjątkowo stabilne, aby umożliwić wysyłkę i przechowywanie w razie potrzeby, a tym samym jest zgodne z "Zapobieganiem powstawaniu odpadów", "Projektowaniem bezpieczniejszych chemikaliów" i "Projektowaniem pod kątem efektywności energetycznej". Kliknij tutaj, aby uzyskać więcej informacji.

Przeciwciała 10889 reprezentują całkowicie nową generację rekombinowanych przeciwciał monoklonalnych.

Każde przeciwciało 10889 jest wytwarzane przy użyciu naszego zastrzeżonego rekombinowanego systemu ekspresji, oczyszczane do jednorodności i precyzyjnie dozowane w celu uzyskania solidnej i wysoce powtarzalnej spójności między partiami. Do użytku badaczy udostępniane są wyłącznie klony o najwyższej wydajności. Każde przeciwciało jest walidowane pod kątem wysokiej swoistości i powinowactwa w wielu zastosowaniach, w tym w najczęściej używanym zastosowaniu. Przeciwciała 10889 są niezawodnie dostępne i gotowe do wysyłki, gdy są potrzebne.

Specyficzność

Klon 1E17 to rekombinowane królicze przeciwciało monoklonalne 10889, które specyficznie wykrywa fosforylację ULK1 na serynie 555.

Immunogen

Liniowy peptyd sprzężony z KLH odpowiadający 10 aminokwasom otaczającym fosfoserynę 555 ludzkiego ULK1.

Zastosowanie

Testy kontroli jakości

Oceniane metodą Western Blotting w komórkach MCF7, głodzonych przez noc i traktowanych oligomycyną.

Analiza Western Blotting: Rozcieńczenie 1:1000 z reprezentatywnej partii wykryło fosfo-ULK1-Ser555 w komórkach MCF7 głodzonych surowicą przez noc i traktowanych oligomycyną (0,5 mM)

Testowane aplikacje

Test inhibicji peptydowej: Wykrywanie pasma docelowego w lizatach z komórek MCF7, głodzonych surowicą i traktowanych oligomycyną (0,5 mM), było uniemożliwione przez wstępne zablokowanie reprezentatywnej partii immunogennym fosfopeptydem, ale nie odpowiadającym mu niefosfopeptydem.

Analiza immunocytochemiczna (ICC): Rozcieńczenie 1:100 tego przeciwciała wykryło fosfo-ULK1-Ser555 w komórkach MCF7 pozbawionych surowicy.

Affinity Binding Assay: Reprezentatywna partia tego przeciwciała związała fosfo-ULK1-Ser555 z KD wynoszącym 1,1 x 10-7 w teście wiązania powinowactwa.

Uwaga: Rzeczywiste optymalne rozcieńczenia robocze muszą być określone przez użytkownika końcowego jako próbki, a warunki eksperymentalne mogą się różnić w zależności od użytkownika końcowego.

Opis wartości docelowych

Kinaza serynowo-treoninowa ULK1 (UniProt: O75385; znana również jako EC:2.7.11.1, Autophagy-related protein 1 homolog, ATG1, hATG1, Unc-51-like kinase 1) jest kodowana przez gen ULK1 (znany również jako KIAA0722) (Gene ID: 8408) u człowieka. ULK1 jest wszechobecnie wyrażaną kinazą białkową serynowo-treoninową, która bierze udział w autofagii w odpowiedzi na głód. Podczas głodu jest zlokalizowana w strukturach punkcikowatych, głównie reprezentujących błonę izolacyjną, która sekwestruje część cytoplazmy, powodując tworzenie autofagosomu. W komórkach ULK1 ulega konstytutywnej ekspresji w kompleksie z co najmniej trzema białkami: ATG13, FIP200 i ATG101. Interakcja ULK1 z ATG13 lub FIP200 zwiększa aktywność i stabilność kinazy ULK1. ULK1 ulega autofosforylacji w warunkach bogatych w składniki odżywcze i ulega defosforylacji podczas głodzenia lub po leczeniu rapamycyną. W warunkach wystarczającej ilości składników odżywczych jest fosforylowany przez MTOR/mTOR, co zakłóca interakcję z AMPK i zapobiega aktywacji ULK1. W odpowiedzi na ograniczenie składników odżywczych jest fosforylowany i aktywowany przez AMPK, co prowadzi do aktywacji autofagii. Fosforylacja Ser555 przez AMPK ma kluczowe znaczenie dla autofagii wywołanej głodem i dla przeżycia komórek w warunkach niskiego poziomu składników odżywczych i energii. ULK1 może również działać jako regulator AMPK poprzez pośredniczenie w fosforylacji podjednostek AMPK PRKAA1, PRKAB2 i PRKAG1, prowadząc do negatywnej regulacji aktywności AMPK. Pod warunkiem wystarczającej ilości składników odżywczych, wysoka aktywność mTOR zapobiega aktywacji ULK1 poprzez fosforylację ULK1 i zakłóca jego interakcję z AMPK. Domena kinazy białkowej ULK1 jest zlokalizowana w aminokwasach 16-278. To rekombinowane przeciwciało monoklonalne 10889, wygenerowane przez naszą zastrzeżoną technologię, oferuje znacznie zwiększoną swoistość, powinowactwo, powtarzalność i stabilność w porównaniu z konwencjonalnymi przeciwciałami monoklonalnymi. (Ref.: Zachari, M., and Ganley, IG. (2017). Essays Biochem. 61(6); 585-596; Kim, J., et al. (2011). Nat. Cell Biol. 13(2); 132-141; Egan, DF., et al. (2011). Science. 331(6016). 456-461).

Postać fizyczna

Oczyszczone rekombinowane królicze przeciwciało monoklonalne IgG, liofilizowane w PBS z 5% trehalozą, o normalnym wyglądzie gruboziarnistej lub półprzezroczystej żywicy. Składniki PBS/trehaloza w preparacie ZooMAb mogą mieć wygląd półstały (żel przypominający kulki) po liofilizacji. Jest to zjawisko normalne. Należy postępować zgodnie z zalecaną procedurą rekonstytucji zawartą w arkuszu danych, aby rozpuścić półstały, przypominający kulki materiał o wyglądzie żelu. Otrzymany roztwór przeciwciała jest całkowicie stabilny i funkcjonalny, co potwierdzają pełne testy funkcjonalne. Nie zawiera biocydów ani konserwantów, takich jak azydek, ani żadnych produktów ubocznych pochodzenia zwierzęcego. Większe opakowania są dostarczane jako wielokrotności 25 μL.

Przechowywanie i stabilność

Zaleca się przechowywanie liofilizowanego produktu w temperaturze 2-8°C. Przed rekonstytucją fiolki należy krótko mikrowirować, aby odwirować materiał na dno fiolki. Każdą fiolkę należy odtworzyć, dodając 25 μl przefiltrowanej wody laboratoryjnej lub PBS. Odtworzone przeciwciała można przechowywać w temperaturze 2-8°C lub -20°C w celu długotrwałego przechowywania. Unikać wielokrotnego zamrażania.

Informacje prawne

ZooMAb is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Oświadczenie o zrzeczeniu się odpowiedzialności

O ile nie określono inaczej w naszym katalogu lub innej dokumentacji firmy dołączonej do produktu(-ów), nasze produkty są przeznaczone wyłącznie do użytku badawczego i nie mogą być wykorzystywane do żadnych innych celów, w tym między innymi do nieautoryzowanych zastosowań komercyjnych, zastosowań diagnostycznych in vitro, zastosowań terapeutycznych ex vivo lub in vivo lub jakiegokolwiek rodzaju konsumpcji lub zastosowania u ludzi lub zwierząt.

Ta strona może zawierać tekst przetłumaczony maszynowo.

Informacja o środkach bezpieczeństwa

• Kod klasy składowania: 11 - Combustible Solids
• Klasa zagrożenia wodnego (WGK): WGK 1
• Temperatura zapłonu (°F): Not applicable
• Temperatura zapłonu (°C): Not applicable