HPCT-05-wt

12020703, human kidney, Epithelial

• Kod UNSPSC: 41106514

Właściwości

• Nazwa produktu: HPCT-05-wt, 12020703
• pochodzenie biologiczne: human kidney
• tryb wzrostu: Adherent
• kariotyp: Not specified
• morfologia: Epithelial
• receptory: Not specified

Opis

Pochodzenie linii komórkowej

Ludzka komórka kanalika proksymalnego, nerka, kompatybilna z transportem elektrolitów, duży antygen T SV40

Opis linii komórkowej

HPCT-05-wt został opracowany z pierwotnych hodowli komórek nabłonka kanalików proksymalnych pochodzących od 50-letniego mężczyzny, które zostały zakażone konstruktem retrowirusowym z defektem replikacji kodującym antygen T typu dzikiego wirusa simian virus 40 large. Komórki tworzące elektrycznie oporne monowarstwy zostały wyselekcjonowane i rozszerzone w hodowli. Komórki HPCT-05-wt tworzą spolaryzowane, oporne monowarstwy nabłonkowe z mikrokosmkami wierzchołkowymi, kompleksami połączeń ścisłych, licznymi mitochondriami, dobrze rozwiniętymi kompleksami Golgiego, rozległym retikulum endoplazmatycznym, zwojami podstawno-bocznej błony plazmatycznej i pierwotnym cilium. Linia komórkowa HPCT-05-wt wykazuje aktywność transportową bursztynianu, fosforanu i Na,K-trifosfatazy adenozyny (ATPazy), a także mechanizmy transportu jonów regulowane przez kwaśny dipeptyd i adenozynotrifosforan. Zidentyfikowano transkrypty dla kotransportera ^Na+-węglanu, izoformy 3 wymiennika ^Na+-H+, Na,^K-ATPazy, receptora hormonu przytarczyc, receptora naskórkowego czynnika wzrostu i receptora wazopresyny V2. Ponadto zidentyfikowano również i mMunoreaktywny kotransporter fosforanu sodu typu II, receptor wazopresyny V1a i CLIC-1 (NCC27). Chromosomu Y nie można było wykryć w tej linii komórkowej za pomocą analizy krótkich powtórzeń tandemowych (STR) -PCR podczas badania w ECACC. Znanym zjawiskiem jest to, że chromosom Y może ulec rearanżacji lub utracie w hodowanych komórkach, co skutkuje brakiem wykrycia. Linia komórkowa jest identyczna ze źródłem dostarczonym przez deponenta na podstawie analizy STR-PCR. HPCT-05-wt różnicuje się w konfluencji, gdy jest hodowany na mikroporowatym podłożu. Komórki powinny być wysiewane w ilości 105 komórek/cm2 na pokrytych kolagenem 30 mM płytkach hodowlanych Millicell-CM (0,4 μm, Millipore) w temperaturze 37 °C. EGF i surowica powinny zostać usunięte z wierzchołkowej strony komory. Podczas różnicowania komórki tworzą spolaryzowane oporne monowarstwy nabłonkowe z mikrokosmkami wierzchołkowymi, kompleksami ścisłych połączeń, licznymi mitochondriami, dobrze rozwiniętymi kompleksami Golgiego, rozległym retikulum endoplazmatycznym, zwojami podstawno-bocznej błony plazmatycznej i pierwotnym cilium.

Profil DNA

Dane STR-PCR:

Amelogenina: X
CSF1PO: 10
D13S317: 9
D16S539: 11,13
D5S818: 12,13
D7S820: 9,12
THO1: 6,9.3
TPOX: 8,10
vWA: 14,17

pożywka hodowlana

>3015 Keratinocyte Medium II (S0196) + >3015 Keratinocyte Growth Supplement (S9945) + L-glutamina (G7513) + 5 ng/ml ludzkiego rekombinowanego naskórkowego czynnika wzrostu + 5% FBS / FCS (F2442). Alternatywny skład pożywki można znaleźć w Orosz et al., 2004 PMID: 14748622.

Rutyna subkultury

Rozdzielić subkonfluentne hodowle (70-80%) w stosunku 1:3 do 1:6 przy użyciu 0,25% trypsyny/EDTA; 5%_CO2; 37 °C. Sugerowana gęstość wysiewu 2-4 x 10 000 ^komórek/cm2. Gęstość nasycenia wynosi około 12 x 10 000 ^komórek/cm2. Kolby muszą być wstępnie pokryte kolagenem typu I (C3867) rozcieńczonym w stosunku 1:100 z pożywką bez surowicy. Powłoka jest nakładana na noc w temperaturze 37 °C, a następnie kolba jest płukana PBS przed użyciem.

Inne uwagi

W przypadku przesyłek w regionie Azji i Pacyfiku mogą obowiązywać dodatkowe opłaty za transport i obsługę. Więcej informacji można uzyskać u lokalnego przedstawiciela działu obsługi klienta.

Informacje prawne

Stemline is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Ta strona może zawierać tekst przetłumaczony maszynowo.