HTS075M
Preparat membranowy ChemiScreen
Rekombinowany ludzki muskarynowy receptor acetylocholiny M5
Human M5 GPCR membrane preparation for Radioligand binding Assays & GTPγS binding.
Zaloguj sięWyświetlanie cen organizacyjnych i kontraktowych
About This Item
Kod UNSPSC:
41106514
eCl@ss:
32161000
NACRES:
NA.84
Polecane produkty
pochodzenie biologiczne
human
Poziom jakości
rekombinowane
expressed in Chem-1 cells
producent / nazwa handlowa
ChemiScreen
Chemicon®
metody
ligand binding assay: suitable (GTPγS)
radioligand binding assay (RLBA): suitable
numer dostępu NCBI
numer dostępu UniProt
Warunki transportu
dry ice
informacje o genach
human ... CHRM5(1133)
Opis ogólny
Pełnej długości ludzki cDNA CHRM5, kodujący M5
Rodzina receptorów muskarynowych acetylocholiny składa się z pięciu GPCR, które pośredniczą w niektórych funkcjach neurotransmisyjnych acetylocholiny w OUN i na obwodzie. Receptor M5, wraz z receptorami M1 i M3, sygnalizuje poprzez Gq/11, a następnie uwalnia Ca++ z ER (Caulfield i Birdsall, 1998). Chociaż M5 ulega ekspresji w OUN na stosunkowo niskim poziomie, wydaje się być jedynym muskarynowym receptorem acetylocholiny ulegającym ekspresji w neuronach dopaminergicznych śródmózgowia i wykazano, że pośredniczy w uwalnianiu dopaminy z tych neuronów. Receptor M5 ulega również ekspresji w naczyniach krwionośnych w mózgu i na obwodzie, a badania na myszach z nokautem M5 wykazały, że M5 pośredniczy w rozszerzającym naczynia krwionośne działaniu acetylocholiny na mikronaczynia mózgowe. Dalsze badania na myszach z nokautem M5 wskazują również na rolę M5 w nagradzającym działaniu kokainy i morfiny (Wess, 2004). Preparaty błonowe M5 firmy Chemicon są surowymi preparatami błonowymi wykonanymi z naszych zastrzeżonych stabilnych rekombinowanych linii komórkowych w celu zapewnienia wysokiego poziomu ekspresji powierzchniowej GPCR; dlatego są idealnymi narzędziami HTS do badań przesiewowych interakcji M5 z jego ligandami. Preparaty błonowe wykazują Kd 0,16 nM dla[3H]-chlorku metylu skopolaminy (NMS). Przy 10 μg/basen M5 Membrane Prep i 1 nM[3H]-NMS uzyskano ponad 5-krotny stosunek sygnału do tła.
Zastosowanie
Test wiązania radioligandu i wiązanie GTPγS.
Działania biochem./fizjol.
GPCR Class: A
Protein Target: M5
Target Sub-Family: Acetylcholine (muscarinic)
Jakość
Bmax: 2.49 pmol/mg; Kd: 0.16nM
1 unit = 10 μg
1 unit = 10 μg
Charakterystyka techniczna
Warunki indukcji
Membrany są mieszane z radioaktywnym ligandem i nieznakowanym konkurentem (patrz rysunki 1 i 2 dla badanych stężeń) w buforze wiążącym na niewiążącej 96-dołkowej płytce i inkubowane przez 1-2 h. Przed filtracją 96-dołkowa płytka filtracyjna GF/C jest powlekana 0,33% polietylenoiminą przez 30 min, a następnie przemywana 50 mM HEPES, pH 7,4, 0,5% BSA. Reakcja wiązania jest przenoszona na płytkę filtracyjną i przemywana 3 razy (1 ml na studzienkę na przemywanie) buforem do przemywania. Płytka jest suszona i liczona. Bufor wiążący: 50 mM Hepes, pH 7,4, 5 mM MgCl2, 1 mM CaCl2, 0,2% BSA, filtrowany i przechowywany w temperaturze 4°C Radioligand: [3H] NMS (Perkin Elmer#:NEX-636 )
Bufor płuczący: 50 mM Hepes, pH 7,4, 500 mM NaCl, 0,1% BSA, filtrowany i przechowywany w temperaturze 4°C.
Jedno opakowanie zawiera membrany wystarczające na co najmniej 200 testów (jednostek), gdzie jednostka to ilość membrany, która da ponad 5-krotny stosunek sygnału do tła ze znakowanym 3H NMS przy 1 nM.
Membrany są mieszane z radioaktywnym ligandem i nieznakowanym konkurentem (patrz rysunki 1 i 2 dla badanych stężeń) w buforze wiążącym na niewiążącej 96-dołkowej płytce i inkubowane przez 1-2 h. Przed filtracją 96-dołkowa płytka filtracyjna GF/C jest powlekana 0,33% polietylenoiminą przez 30 min, a następnie przemywana 50 mM HEPES, pH 7,4, 0,5% BSA. Reakcja wiązania jest przenoszona na płytkę filtracyjną i przemywana 3 razy (1 ml na studzienkę na przemywanie) buforem do przemywania. Płytka jest suszona i liczona. Bufor wiążący: 50 mM Hepes, pH 7,4, 5 mM MgCl2, 1 mM CaCl2, 0,2% BSA, filtrowany i przechowywany w temperaturze 4°C Radioligand: [3H] NMS (Perkin Elmer#:NEX-636 )
Bufor płuczący: 50 mM Hepes, pH 7,4, 500 mM NaCl, 0,1% BSA, filtrowany i przechowywany w temperaturze 4°C.
Jedno opakowanie zawiera membrany wystarczające na co najmniej 200 testów (jednostek), gdzie jednostka to ilość membrany, która da ponad 5-krotny stosunek sygnału do tła ze znakowanym 3H NMS przy 1 nM.
Postać fizyczna
Płyn w buforze opakowaniowym: 50 mM Tris pH 7,4, 10% glicerol i 1% BSA bez konserwantów. Metoda pakowania: Białko membranowe dostosowano do 0,5 mg/mL w 1 mL buforu do pakowania, szybko zamrożono i przechowywano w temperaturze -80°C.
Przechowywanie i stabilność
Przechowywać zamrożone w temperaturze -70°C przez okres do 2 lat. Nie zamrażać i nie rozmrażać.
Informacje prawne
CHEMICON is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
Oświadczenie o zrzeczeniu się odpowiedzialności
Unless otherwise stated in our catalog or other company documentation accompanying the product(s), our products are intended for research use only and are not to be used for any other purpose, which includes but is not limited to, unauthorized commercial uses, in vitro diagnostic uses, ex vivo or in vivo therapeutic uses or any type of consumption or application to humans or animals.
Ta strona może zawierać tekst przetłumaczony maszynowo.
Kod klasy składowania
10 - Combustible liquids
Klasa zagrożenia wodnego (WGK)
WGK 2
Certyfikaty analizy (CoA)
Poszukaj Certyfikaty analizy (CoA), wpisując numer partii/serii produktów. Numery serii i partii można znaleźć na etykiecie produktu po słowach „seria” lub „partia”.
Masz już ten produkt?
Dokumenty związane z niedawno zakupionymi produktami zostały zamieszczone w Bibliotece dokumentów.
International Union of Pharmacology. XVII. Classification of muscarinic acetylcholine receptors.
M P Caulfield et al.
Pharmacological reviews, 50(2), 279-290 (1998-07-02)
Muscarinic acetylcholine receptor knockout mice: novel phenotypes and clinical implications.
Wess, Jurgen
Annual Review of Pharmacology and Toxicology, 44, 423-450 (2004)
Nasz zespół naukowców ma doświadczenie we wszystkich obszarach badań, w tym w naukach przyrodniczych, materiałoznawstwie, syntezie chemicznej, chromatografii, analityce i wielu innych dziedzinach.
Skontaktuj się z zespołem ds. pomocy technicznej