HTS028M
ChemiSCREEN Preparat błonowy Rekombinowany ludzki receptor somatostatyny sst2
Human sst2 GPCR membrane preparation for Radioligand binding Assays & GTPγS binding.
Zaloguj sięWyświetlanie cen organizacyjnych i kontraktowych
About This Item
Kod UNSPSC:
41106514
eCl@ss:
32161000
NACRES:
NA.41
Polecane produkty
pochodzenie biologiczne
human
Poziom jakości
rekombinowane
expressed in Chem-1 cells
producent / nazwa handlowa
ChemiScreen
Chemicon®
metody
ligand binding assay: suitable (GTPγS)
radioligand binding assay (RLBA): suitable
numer dostępu NCBI
numer dostępu UniProt
Warunki transportu
dry ice
Opis ogólny
Pełnej długości ludzki cDNA kodujący SSTR2
Somatostatyna (sst) jest wielofunkcyjnym peptydem o dwóch biologicznie aktywnych formach, sst-14 i sst-28, które są syntetyzowane w neuronach w mózgu, a także w tkankach obwodowych, takich jak trzustka i jelita (Gillies, 1997). SST wywiera zróżnicowany wachlarz efektów, które obejmują hamowanie wydzielania hormonalnego, modulację neurotransmisji i regulację proliferacji komórek poprzez stymulację rodziny pięciu receptorów sprzężonych z białkiem G. Receptor somatostatyny sst2 mRNA ulega ekspresji głównie w ośrodkowym układzie nerwowym. Badanie z wykorzystaniem myszy z nokautem sst2 wykazało zwiększone zachowanie związane z lękiem, podczas gdy aktywność lokomotoryczna i eksploracyjna była zmniejszona w sytuacjach wywołujących stres (w połączeniu ze wzrostem uwalniania przysadkowego ACTH, regulatora odpowiedzi na stres) (Viollet i in., 2000). Na obwodzie hamowanie uwalniania glukagonu przez sst w wysepkach myszy odbywa się głównie za pośrednictwem sst2 (Strowski i in., 2000). Ponadto endogenna sst działa poprzez sst2 w celu hamowania wydzielania kwasu żołądkowego poprzez hamowanie aktywności gastryny (Martinez i in., 1998). Preparaty błonowe sst2 firmy Millipore są surowymi preparatami błonowymi wykonanymi z naszych zastrzeżonych stabilnych rekombinowanych linii komórkowych w celu zapewnienia wysokiego poziomu ekspresji powierzchniowej GPCR; dlatego są idealnymi narzędziami HTS do badań przesiewowych agonistów i antagonistów sst2. Preparaty błonowe wykazują Kd 0,95 nM dla[125I]-Somatostatyny 14. Przy 0,75 nM[125I]-Somatostatyny 14, preparat membranowy sst2 o objętości 5 μg/dołek zazwyczaj daje ponad 20-krotny stosunek sygnału do tła.
Zastosowanie
Test wiązania radioligandu i wiązanie GTPγS.
Działania biochem./fizjol.
GPCR Class: A
Protein Target: sst2
Target Sub-Family: Somatostatin
Jakość
Table 1. Signal:background and specific binding values obtained in a competition binding assay with varying amounts of sst2 Receptor membrane prep.
SPECIFICATIONS: 1 unit = 5 μg
Bmax for [125I]-Somatostatin binding: 18.9 pmol/mg protein
Kd for [125I]-Somatostatin binding: ~0.95 nM
| 10 µg/well | 5 µg/well | |
|---|---|---|
| Signal:Background | 16.2 | 36.2 |
| Specific Binding (cpm) | 58438 | 54632 |
SPECIFICATIONS: 1 unit = 5 μg
Bmax for [125I]-Somatostatin binding: 18.9 pmol/mg protein
Kd for [125I]-Somatostatin binding: ~0.95 nM
Charakterystyka techniczna
Warunki inkubacji
ZALECANE WARUNKI BADAŃ: Membrany miesza się z radioaktywnym ligandem i nieznakowanym konkurentem (patrz rysunki 1 i 2 dla badanych stężeń) w buforze wiążącym w niewiążącej 96-dołkowej płytce i inkubuje przez 1-2 h. Przed filtracją 96-dołkowa płytka zbiorcza FC (Millipore nr kat. MAHF C1H) jest powlekana 0,33% polietylenoiminą przez 30 minut, a następnie przemywana 50 mM HEPES, pH 7,4, 0,5% BSA. Reakcja wiązania jest przenoszona na płytkę filtracyjną i płukana 3 razy (1 ml na studzienkę na płukanie) buforem płuczącym. Płytka jest suszona i liczona.
Bufor wiążący: 50 mM Hepes, pH 7,4, 5 mM MgCl2, 1 mM CaCl2, 0,2% BSA, filtrowany i przechowywany w temperaturze 4°C.
Radioligand:[125I]-Somatostatyna 14. (Perkin Elmer NEX-389 )
Bufor płuczący: 50 mM Hepes, pH 7,4, 500 mM NaCl, 0,1% BSA, filtrowany i przechowywany w temperaturze 4°C.
Jedno opakowanie zawiera membrany wystarczające na co najmniej 200 testów (jednostek), gdzie jednostka to ilość membrany, która da ponad 20-krotny stosunek sygnału do tła ze znakowaną 125I somatostatyną 14 w stężeniu 0,75 nM.
ZALECANE WARUNKI BADAŃ: Membrany miesza się z radioaktywnym ligandem i nieznakowanym konkurentem (patrz rysunki 1 i 2 dla badanych stężeń) w buforze wiążącym w niewiążącej 96-dołkowej płytce i inkubuje przez 1-2 h. Przed filtracją 96-dołkowa płytka zbiorcza FC (Millipore nr kat. MAHF C1H) jest powlekana 0,33% polietylenoiminą przez 30 minut, a następnie przemywana 50 mM HEPES, pH 7,4, 0,5% BSA. Reakcja wiązania jest przenoszona na płytkę filtracyjną i płukana 3 razy (1 ml na studzienkę na płukanie) buforem płuczącym. Płytka jest suszona i liczona.
Bufor wiążący: 50 mM Hepes, pH 7,4, 5 mM MgCl2, 1 mM CaCl2, 0,2% BSA, filtrowany i przechowywany w temperaturze 4°C.
Radioligand:[125I]-Somatostatyna 14. (Perkin Elmer NEX-389 )
Bufor płuczący: 50 mM Hepes, pH 7,4, 500 mM NaCl, 0,1% BSA, filtrowany i przechowywany w temperaturze 4°C.
Jedno opakowanie zawiera membrany wystarczające na co najmniej 200 testów (jednostek), gdzie jednostka to ilość membrany, która da ponad 20-krotny stosunek sygnału do tła ze znakowaną 125I somatostatyną 14 w stężeniu 0,75 nM.
Postać fizyczna
Płyn w buforze opakowaniowym: 50 mM Tris pH 7,4, 10% glicerol i 1% BSA bez konserwantów.
Metoda pakowania: Białko membranowe dostosowano do 1 mg/ml w 1 ml buforu do pakowania, szybko zamrożono i przechowywano w temperaturze -80°C
Metoda pakowania: Białko membranowe dostosowano do 1 mg/ml w 1 ml buforu do pakowania, szybko zamrożono i przechowywano w temperaturze -80°C
Przechowywanie i stabilność
Przechowywać zamrożone w temperaturze -70°C przez okres do 2 lat. Nie zamrażać i nie rozmrażać.
Informacje prawne
CHEMICON is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
Oświadczenie o zrzeczeniu się odpowiedzialności
RESEARCH USE ONLY. This product is regulated in France when intended to be used for scientific purposes, including for import and export activities (Article L 1211-1 paragraph 2 of the Public Health Code). The purchaser (i.e. enduser) is required to obtain an import authorization from the France Ministry of Research referred in the Article L1245-5-1 II. of Public Health Code. By ordering this product, you are confirming that you have obtained the proper import authorization.
Unless otherwise stated in our catalog or other company documentation accompanying the product(s), our products are intended for research use only and are not to be used for any other purpose, which includes but is not limited to, unauthorized commercial uses, in vitro diagnostic uses, ex vivo or in vivo therapeutic uses or any type of consumption or application to humans or animals.
Unless otherwise stated in our catalog or other company documentation accompanying the product(s), our products are intended for research use only and are not to be used for any other purpose, which includes but is not limited to, unauthorized commercial uses, in vitro diagnostic uses, ex vivo or in vivo therapeutic uses or any type of consumption or application to humans or animals.
Ta strona może zawierać tekst przetłumaczony maszynowo.
Kod klasy składowania
12 - Non Combustible Liquids
Klasa zagrożenia wodnego (WGK)
WGK 2
Temperatura zapłonu (°F)
Not applicable
Temperatura zapłonu (°C)
Not applicable
Certyfikaty analizy (CoA)
Poszukaj Certyfikaty analizy (CoA), wpisując numer partii/serii produktów. Numery serii i partii można znaleźć na etykiecie produktu po słowach „seria” lub „partia”.
Masz już ten produkt?
Dokumenty związane z niedawno zakupionymi produktami zostały zamieszczone w Bibliotece dokumentów.
Nasz zespół naukowców ma doświadczenie we wszystkich obszarach badań, w tym w naukach przyrodniczych, materiałoznawstwie, syntezie chemicznej, chromatografii, analityce i wielu innych dziedzinach.
Skontaktuj się z zespołem ds. pomocy technicznej