CC1028
ADAMTS-4, rekombinowany, znakowany His
This His Tagged Recombinant ADAMTS4 is used to study the degradation of extracellular matrix proteoglycans, to screen for inhibitors of proteoglycan hydrolysis and to characterize inhibitor actions.
Synonim(y):
Aggrecanase 1
Zaloguj sięWyświetlanie cen organizacyjnych i kontraktowych
About This Item
Kod UNSPSC:
12352204
eCl@ss:
32160405
NACRES:
NA.41
Polecane produkty
pochodzenie biologiczne
human
Poziom jakości
rekombinowane
expressed in baculovirus
Formularz
liquid
producent / nazwa handlowa
Chemicon®
numer dostępu NCBI
numer dostępu UniProt
Warunki transportu
dry ice
informacje o genach
human ... ADAMTS4(9507)
Opis ogólny
ADAMTS (a disintegrin and metalloproteinase with thrombospondin motif) to nowa rodzina zewnątrzkomórkowych proteinaz (Tang, 2001). Obecnie u ssaków zidentyfikowano dziewięciu członków rodziny (Tang, 2001). ADAMTS4 został po raz pierwszy oczyszczony z pożywki kondycjonowanej chrząstki nosowej bydła stymulowanej IL-1, a ludzki ADAMTS4-cDNA został sklonowany z biblioteki cDNA ludzkiego serca (Tortorella, 1999). Dojrzała ADAMTS4 składa się z prodomeny, która nadaje opóźnienie proenzymowi, domeny katalitycznej, domeny dezintegryny i C-końcowej sekwencji z motywem trombospondyny typu 1. Prodomena jest najprawdopodobniej odcinana przez enzym typu furin, zanim aktywna ADAMTS4 zostanie uwolniona z komórek. Aktywna ADAMTS4 składa się z 625 aminokwasów (F213 - K837) o obliczonym Mr 67 943 (Tortorella, 1999).
ADAMTS4 hydrolizuje agrekan, główny proteoglikan chrząstki stawowej (Tortorella, 1999). Ponieważ agrekan jest również trawiony przez 2 innych członków rodziny ADAMTS, ADAMTS1 (Kuno, 2000) i ADAMTS5 (Abbaszade, 1999), produkty degradacji agrekanu występujące w normalnej, reumatoidalnej i zwyrodnieniowej chrząstce stawowej (Lark, 1997) mogą powstawać w wyniku działania jednej z 3 proteinaz. Wyizolowana ADAMTS4 hydrolizuje agrekan w 5 różnych miejscach (Tortorella, 2000a). Cztery miejsca rozszczepienia znajdują się w regionie bogatym w siarczan chondroityny między domenami kulistymi G2 i G3, podczas gdy jedno miejsce znajduje się w polipeptydzie w kształcie pręta między domenami kulistymi G1 i G2. Motyw trombospondyny w ADAMTS4 wydaje się być krytyczny dla rozpoznawania i rozszczepiania substratu agrekanu (Tortorella, 2000b). ADAMTS4 hydrolizuje również inne lektyny, takie jak brevican (Nakamura, 2000) i versican (Sandy, 2001).
ADAMTS4 jest hamowany przez TIMP 3 (Hashimoto, 2001) i przez N-końcową domenę TIMP 3 (Kashigawa, 2001) z wartościami Ki w zakresie nanomolarnym. Hamowanie przez TIMP 1,2 i 4 jest znacznie słabsze (Hashimoto, 2001).
ADAMTS4 hydrolizuje agrekan, główny proteoglikan chrząstki stawowej (Tortorella, 1999). Ponieważ agrekan jest również trawiony przez 2 innych członków rodziny ADAMTS, ADAMTS1 (Kuno, 2000) i ADAMTS5 (Abbaszade, 1999), produkty degradacji agrekanu występujące w normalnej, reumatoidalnej i zwyrodnieniowej chrząstce stawowej (Lark, 1997) mogą powstawać w wyniku działania jednej z 3 proteinaz. Wyizolowana ADAMTS4 hydrolizuje agrekan w 5 różnych miejscach (Tortorella, 2000a). Cztery miejsca rozszczepienia znajdują się w regionie bogatym w siarczan chondroityny między domenami kulistymi G2 i G3, podczas gdy jedno miejsce znajduje się w polipeptydzie w kształcie pręta między domenami kulistymi G1 i G2. Motyw trombospondyny w ADAMTS4 wydaje się być krytyczny dla rozpoznawania i rozszczepiania substratu agrekanu (Tortorella, 2000b). ADAMTS4 hydrolizuje również inne lektyny, takie jak brevican (Nakamura, 2000) i versican (Sandy, 2001).
ADAMTS4 jest hamowany przez TIMP 3 (Hashimoto, 2001) i przez N-końcową domenę TIMP 3 (Kashigawa, 2001) z wartościami Ki w zakresie nanomolarnym. Hamowanie przez TIMP 1,2 i 4 jest znacznie słabsze (Hashimoto, 2001).
Postać molekularna: Rekombinowany ludzki ADAMTS4 delta580-837 jest wytwarzany przy użyciu systemu ekspresji bakulowirusa i oczyszczany z supernatantów hodowli komórek owadzich. Białko składa się z aminokwasów od F213 do A579 pełnej długości ADAMTS4 i C-końcowego znacznika His6. Obliczony Mr wynosi 40 366 Da.
Inhibitory: ADAMTS4 jest hamowany przez tkankowe inhibitory metaloproteinaz macierzy 3 (TIMP 3) i w mniejszym stopniu przez inne inhibitory tkankowe. Aktywność enzymu jest również hamowana przez chelatory dwuwartościowych związków, takie jak EDTA i syntetyczne inhibitory metaloproteinaz.
Zastosowania: Rekombinowany ADAMTS4 jest używany do badania degradacji proteoglikanów macierzy zewnątrzkomórkowej, do badań przesiewowych w kierunku inhibitorów hydrolizy proteoglikanów i do scharakteryzowania działania inhibitorów. Enzym może również służyć jako standard w testach enzymatycznych i immunochemicznych.
Inhibitory: ADAMTS4 jest hamowany przez tkankowe inhibitory metaloproteinaz macierzy 3 (TIMP 3) i w mniejszym stopniu przez inne inhibitory tkankowe. Aktywność enzymu jest również hamowana przez chelatory dwuwartościowych związków, takie jak EDTA i syntetyczne inhibitory metaloproteinaz.
Zastosowania: Rekombinowany ADAMTS4 jest używany do badania degradacji proteoglikanów macierzy zewnątrzkomórkowej, do badań przesiewowych w kierunku inhibitorów hydrolizy proteoglikanów i do scharakteryzowania działania inhibitorów. Enzym może również służyć jako standard w testach enzymatycznych i immunochemicznych.
Źródło produktu: Rekombinowany ludzki ADAMTS-4 δ580-837 jest wytwarzany przy użyciu systemu ekspresji bakulowirusa i oczyszczany z supernatantu hodowli komórek owadzich. Białko zawiera aminokwasy F213 ... A579 pełnej długości ADAMTS-4 i C-końcowy His6tag. Obliczony MW wynosi 40 kDa.
Opakowanie
w 25 μL
Postać fizyczna
ADAMTS4 jest rozpuszczony w 50 mM Tris-HCI, pH 7,5, 150 mM NaCl, 5 mM CaCl2, 0,05% Brij-35.
Przechowywanie i stabilność
Przechowywać białko w temperaturze -70°C przez rok od daty otrzymania. Enzym może być przechowywany w temperaturze -20°C przez kilka tygodni, a w lodzie przez kilka dni. Należy unikać wielokrotnego zamrażania i rozmrażania.
Komentarz do analizy
Aktywność specyficzna: Aktywność agrekanazy ADAMTS4 jest określana za pomocą rekombinowanej domeny międzyglobularnej agrekanu znakowanej His (Aggrecan-IGD1 firmy Chemicon). ADAMTS4 hydrolizuje miejsce "aggrecanase" w tej domenie (wiązanie peptydowe E373 -A374 w ludzkim aggrecan). Rekombinowany substrat jest inkubowany w stężeniu 0,1 μM z 1 nM ADAMTS4 w 50 mM Tris-HCI, pH 7,5, 150 mM NaCl, 5 mM CaCl2, 1 μM leupeptyny, 1 μM pepstatyny, 1 mM Pefabloc, 0,05% Brij 35 przez 15 minut w 37°C. Rozszczepienie w miejscu "aggrecanase" szacuje się na podstawie wyglądu C-końca ARGSVIL. Przy użyciu poliklonalnych przeciwciał neoepitopowych do końca ARGS fragment jest utrwalany na mikropłytce i oznaczany ilościowo za pomocą przeciwciała anty-His-tag. W określonych warunkach rekombinowany ADAMTS4 hydrolizuje 0,15 nM substratu/min na nM skróconego ADAMTS4. W odniesieniu do mg enzymu wartość ta wynosi 3,7 nmoli zhydrolizowanego substratu/min na mg ADAMTS4.
Rekombinowany ADAMTS4 pojawia się jako główne białko o masie około 42 000 Da w SDS-PAGE (>90% całkowitego białka). Ze względu na aktywność autoproteolityczną w preparacie enzymatycznym mogą być widoczne mniejsze pasma ADAMTS4.
Informacje prawne
CHEMICON is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
Ta strona może zawierać tekst przetłumaczony maszynowo.
Kod klasy składowania
12 - Non Combustible Liquids
Klasa zagrożenia wodnego (WGK)
WGK 1
Temperatura zapłonu (°F)
Not applicable
Temperatura zapłonu (°C)
Not applicable
Certyfikaty analizy (CoA)
Poszukaj Certyfikaty analizy (CoA), wpisując numer partii/serii produktów. Numery serii i partii można znaleźć na etykiecie produktu po słowach „seria” lub „partia”.
Masz już ten produkt?
Dokumenty związane z niedawno zakupionymi produktami zostały zamieszczone w Bibliotece dokumentów.
M Tortorella et al.
The Journal of biological chemistry, 275(33), 25791-25797 (2000-05-29)
Aggrecanase-1 (ADAMTS-4) is a member of the a disintegrin and metalloprotease with thrombospondin motifs (ADAMTS) protein family that was recently identified. Aggrecanase-1 is one of two ADAMTS cartilage-degrading enzymes purified from interleukin-1-stimulated bovine nasal cartilage (Tortorella, M. D., Burn, T.
Novel LC8 mutations have disparate effects on the assembly and stability of flagellar complexes.
Pinfen Yang,Chun Yang,Maureen Wirschell,Stephanie Davis
The Journal of Biological Chemistry null
Morten A Karsdal et al.
Arthritis research & therapy, 10(3), R63-R63 (2008-06-03)
Physiological and pathophysiological cartilage turnover may coexist in articular cartilage. The distinct enzymatic processes leading to irreversible cartilage damage, compared with those needed for continuous self-repair and regeneration, remain to be identified. We investigated the capacity of repair of chondrocytes
Jean C Rousseau et al.
BMC musculoskeletal disorders, 9, 74-74 (2008-05-30)
Rheumatoid arthritis (RA) is a chronic auto-immune disease with extensive articular cartilage destruction. Aggrecan depletion, mediated by aggrecanases is one of the first signs of early cartilage erosion. We investigated, whether measurement of aggrecan and fragments thereof in serum, could
M Kashiwagi et al.
The Journal of biological chemistry, 276(16), 12501-12504 (2001-03-30)
The proteoglycan aggrecan is an important major component of cartilage matrix that gives articular cartilage the ability to withstand compression. Increased breakdown of aggrecan is associated with the development of arthritis and is considered to be catalyzed by aggrecanases, members
Nasz zespół naukowców ma doświadczenie we wszystkich obszarach badań, w tym w naukach przyrodniczych, materiałoznawstwie, syntezie chemicznej, chromatografii, analityce i wielu innych dziedzinach.
Skontaktuj się z zespołem ds. pomocy technicznej