Przejdź do zawartości
Merck
Wszystkie zdjęcia(4)

Kluczowe dokumenty

17-651

Sigma-Aldrich

ChIPAb+ Monomethyl-Histone H4 (Lys20) - przeciwciało i zestaw primerów zweryfikowane pod kątem ChIP

from rabbit, purified by affinity chromatography

Synonim(y):

H4K20me1, histon H4 (mono metyl K20), rodzina histonów H4, członek A, histon 1, H4a, klaster histonów 1, H4a

Zaloguj sięWyświetlanie cen organizacyjnych i kontraktowych


About This Item

Kod UNSPSC:
12352203
eCl@ss:
32160702
NACRES:
NA.52

pochodzenie biologiczne

rabbit

Poziom jakości

forma przeciwciała

affinity purified immunoglobulin

klon

polyclonal

oczyszczone przez

affinity chromatography

reaktywność gatunkowa

human, vertebrates, plant

producent / nazwa handlowa

ChIPAb+
Upstate®

metody

ChIP: suitable
western blot: suitable

numer dostępu NCBI

numer dostępu UniProt

Warunki transportu

dry ice

Opis ogólny

Wszystkie przeciwciała ChIPAb+ są indywidualnie walidowane pod kątem wytrącania chromatyny, w każdej partii, za każdym razem. Każdy zestaw przeciwciał ChIPAb+ zawiera startery kontrolne (testowane co partię za pomocą qPCR) w celu biologicznej walidacji wyników IP w kontekście specyficznym dla locus. Protokół qPCR i sekwencje starterów są dostarczane, umożliwiając badaczom walidację protokołów ChIP przy użyciu naszego przeciwciała w kontekście chromatyny. Każdy zestaw zawiera również ujemne przeciwciało kontrolne, aby zapewnić specyficzność reakcji ChIP.
Zestaw ChIPAb+ Monomethyl-Histone H4 (Lys20) zawiera przeciwciało Anti-monomethyl-Histone H4 (Lys20), przeciwciało kontroli ujemnej (oczyszczone królicze IgG) oraz startery qPCR, które amplifikują produkt PCR o długości 212 par zasad w regionie kodującym ludzkiego GAPDH. Przeciwciała monometylo-histonowe H4 (Lys20) i przeciwciała kontroli ujemnej są dostarczane w skalowalnym rozmiarze reakcji "na ChIP" i mogą być stosowane do funkcjonalnej walidacji wytrącania chromatyny związanej z monometylo-histonem H4 (Lys20).

Specyficzność

Nie testowano na innych gatunkach. Sekwencja immunogenu jest identyczna u wielu gatunków zwierząt i roślin, więc spodziewana jest szeroka reaktywność krzyżowa.
Rozpoznaje histon H4 o masie cząsteczkowej ~11 kDa.

Immunogen

Epitop: n.d. 15-24
Immunogenem był syntetyczny peptyd odpowiadający aminokwasom 15-24 histonu H4, monometylowany na Lys20.

Zastosowanie

Immunoprecypitacja chromatyny:
Sonikowaną chromatynę przygotowaną z komórek HeLa (2 X106 równoważników komórek na IP) poddano immunoprecypitacji chromatyny przy użyciu 4 μg przeciwciała kontroli ujemnej lub przeciwciała Anti-Monomethyl-Histone H4
(Lys20) i zestawu Magna ChIP A Kit (nr kat. 17-610). Pomyślną immunoprecypitację fragmentów DNA związanych z monometylo-histonem H4 (Lys20) zweryfikowano za pomocą qPCR przy użyciu starterów ChIP regionu kodującego GAPDH w porównaniu ze starterami kontrolnymi odpowiadającymi promotorowi GAPDH (patrz rysunki). Dane przedstawiono jako procentowy wkład każdej próbki IP w stosunku do chromatyny wejściowej, z immunoprecypitowanym DNA z przeciwciała kontroli ujemnej pokazanym jako (-) i monometylo-histonem H4 (Lys20) pokazanym jako (+).
Szczegółowe informacje dotyczące eksperymentu można znaleźć w protokole EZ-Magna ChIP A (nr kat. 17-408) lub EZ-ChIP (nr kat. 17-371).

Analiza Western Blot:
0,1 μg/mL białek wizualizowano przy użyciu koziego przeciwciała drugorzędowego przeciw królikowi sprzężonego z HRP i systemu detekcji chemiluminescencji (patrz rysunki).

Test blokowania peptydów:
40 μg peptydu histonu H4 zawierającego monometylo-Lys20 zniosło wykrywanie histonu H4 przez anty-monometylo-Histon H4 (Lys20) w analizie immunoblot kwaśnych ekstraktów komórek HeLa (patrz rysunki).
Zestaw ChIPAb+ Monomethyl-Histone H4 (Lys20) -ChIP Validated Antibody & Primer Set zawiera przeciwciało i specyficzne kontrolne startery PCR.
Research Category
Epigenetics & Nuclear Function
Research Sub Category
Chromatin Biology

Histones

Opakowanie

25 testów w zestawie. Zalecane użycie: ~4 μg przeciwciała na immunoprecypitację chromatyny (w zależności od kontekstu biologicznego).

Jakość

Chromatin Immunoprecipitation:
Sonicated chromatin prepared from HeLa cells (1 X 106 cell equivalents per IP) were subjected to chromatin immunoprecipitation using 4 μg of either a negative control antibody or Anti-monomethyl-Histone H4 (Lys20) antibody and the Magna ChIP A Kit (Cat. # 17-610). Successful immuno-precipitation of monomethyl-histone H4 (Lys20)-associated DNA fragments was verified by qPCR using ChIP Primers GAPDH Coding region (Please see figures).
Please refer to the EZ-Magna ChIP A (Cat. # 17-408) or EZ-ChIP (Cat. # 17-371) protocol for experimental details.

Opis wartości docelowych

~11 kDa

Postać fizyczna

Przeciwciało przeciw monometylo-histonowi H4 (Lys20) (królicze IgG poliklonalne). Jedna fiolka zawierająca 100 μg przeciwciała oczyszczonego metodą powinowactwa w 100 μl 0,1 M Tris-Glicyny (pH 7,4), 15 mM NaCl i 0,05% NaN3. Przechowywać w temperaturze -20°C.

Normalne królicze IgG. Jedna fiolka zawierająca 125 μg oczyszczonej króliczej IgG w 125 μl buforu do przechowywania. Przechowywać w temperaturze -20°C.

Primery ChIP Region kodujący GAPDH. Jedna fiolka zawierająca 75 μL po 5 μM każdego primera specyficznego dla regionu kodującego ludzkiego GAPDH. Przechowywać w temperaturze -20°C.
FOR: GGC TCC CAC CTT TCT CAT CC
REV: GGC CAT CCA CAG TCT TCT GG

Przechowywanie i stabilność

Przechowywać przez 1 rok w temperaturze -20°C od daty otrzymania. Zalecenia dotyczące postępowania: Po pierwszym rozmrożeniu, a przed zdjęciem korka, odwirować fiolkę i delikatnie wymieszać roztwór. Rozdzielić do probówek mikrowirówkowych i przechowywać w temperaturze -20°C. Unikać powtarzających się cykli zamrażania/rozmrażania, które mogą uszkodzić IgG i wpłynąć na działanie produktu.

Komentarz do analizy

Kontrola
Zawiera królicze przeciwciało IgG kontroli ujemnej i startery kontrolne specyficzne dla ludzkiego regionu kodującego GAPDH.

Informacje prawne

UPSTATE is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Oświadczenie o zrzeczeniu się odpowiedzialności

Unless otherwise stated in our catalog or other company documentation accompanying the product(s), our products are intended for research use only and are not to be used for any other purpose, which includes but is not limited to, unauthorized commercial uses, in vitro diagnostic uses, ex vivo or in vivo therapeutic uses or any type of consumption or application to humans or animals.
Ta strona może zawierać tekst przetłumaczony maszynowo.

Kod klasy składowania

12 - Non Combustible Liquids

Temperatura zapłonu (°F)

Not applicable

Temperatura zapłonu (°C)

Not applicable


Certyfikaty analizy (CoA)

Poszukaj Certyfikaty analizy (CoA), wpisując numer partii/serii produktów. Numery serii i partii można znaleźć na etykiecie produktu po słowach „seria” lub „partia”.

Masz już ten produkt?

Dokumenty związane z niedawno zakupionymi produktami zostały zamieszczone w Bibliotece dokumentów.

Odwiedź Bibliotekę dokumentów

Chungyu Chang et al.
Current protocols in microbiology, 58(1), e111-e111 (2020-09-01)
This article describes several established approaches for genetic manipulation of Corynebacterium diphtheriae, the causative agent of diphtheria that is known to have provided key evidence for Koch's postulates on the germ theory. First, it includes a detailed gene deletion method
Hua-Rong Zhou et al.
Oncology reports, 37(5), 2663-2671 (2017-04-26)
The present study was designed to investigate the relationship among epigenetic changes in Wnt antagonists, histone H4K20me1 and the expression of tumor-suppressor genes in acute leukemia (AL) to better understand the pathogenesis of leukemia. Quantitative reverse transcription polymerase chain reaction
Karin Meier et al.
PLoS genetics, 8(5), e1002676-e1002676 (2012-05-10)
Mutations in the l(3)mbt tumour suppressor result in overproliferation of Drosophila larval brains. Recently, the derepression of different gene classes in l(3)mbt mutants was shown to be causal for transformation. However, the molecular mechanisms of dL(3)mbt-mediated gene repression are not
Xavier Brenachot et al.
Molecular metabolism, 3(6), 619-629 (2014-08-28)
Overfeeding causes rapid synaptic remodeling in hypothalamus feeding circuits. Polysialylation of cell surface molecules is a key step in this neuronal rewiring and allows normalization of food intake. Here we examined the role of hypothalamic polysialylation in the long-term maintenance

Nasz zespół naukowców ma doświadczenie we wszystkich obszarach badań, w tym w naukach przyrodniczych, materiałoznawstwie, syntezie chemicznej, chromatografii, analityce i wielu innych dziedzinach.

Skontaktuj się z zespołem ds. pomocy technicznej