17-10054
ChIPAb+ Histone H2B - przeciwciało z walidacją ChIP i zestaw primerów
from rabbit
Synonim(y):
H2B, histon H2B, rodzina histonów H2B, członek Q, histon 2, H2be, klaster histonów 2, H2be
Zaloguj sięWyświetlanie cen organizacyjnych i kontraktowych
About This Item
Kod UNSPSC:
12352203
eCl@ss:
32160702
NACRES:
NA.32
pochodzenie biologiczne
rabbit
Poziom jakości
klon
polyclonal
reaktywność gatunkowa
yeast, chicken, Saccharomyces cerevisiae, Xenopus, human
producent / nazwa handlowa
ChIPAb+
Upstate®
metody
ChIP: suitable
immunoprecipitation (IP): suitable
western blot: suitable
numer dostępu NCBI
numer dostępu UniProt
Warunki transportu
dry ice
Powiązane kategorie
Opis ogólny
Histon H2B jest jednym z 5 głównych białek histonowych zaangażowanych w strukturę chromatyny w komórkach eukariotycznych. Posiadający główną domenę globularną i długi N-końcowy ogon H2A jest zaangażowany w strukturę nukleosomów o strukturze "koralików na sznurku".
Wszystkie przeciwciała ChIPAb+ są indywidualnie walidowane pod kątem wytrącania chromatyny, w każdej partii, za każdym razem. Każdy zestaw przeciwciał ChIPAb+ zawiera startery kontrolne (testowane co partię za pomocą qPCR) w celu biologicznej walidacji wyników IP w kontekście specyficznym dla locus. Protokół qPCR i sekwencje starterów są dostarczane, umożliwiając badaczom walidację protokołów ChIP przy użyciu naszego przeciwciała w kontekście chromatyny. Każdy zestaw zawiera również ujemne przeciwciało kontrolne, aby zapewnić specyficzność reakcji ChIP.
Zestaw ChIPAb+ Histone H2B zawiera przeciwciało Histone H2B, króliczą IgG z kontrolą ujemną oraz startery qPCR, które amplifikują region 110 bp ludzkiego promotora β-globiny. Histon H2B i kontrole negatywne są dostarczane w skalowalnym rozmiarze reakcji "na ChIP" i mogą być wykorzystane do funkcjonalnej walidacji wytrącania chromatyny związanej z Histonem H2B.
Zestaw ChIPAb+ Histone H2B zawiera przeciwciało Histone H2B, króliczą IgG z kontrolą ujemną oraz startery qPCR, które amplifikują region 110 bp ludzkiego promotora β-globiny. Histon H2B i kontrole negatywne są dostarczane w skalowalnym rozmiarze reakcji "na ChIP" i mogą być wykorzystane do funkcjonalnej walidacji wytrącania chromatyny związanej z Histonem H2B.
Specyficzność
Inne nie testowane.
Oczekiwana szeroka reaktywność krzyżowa między gatunkami na podstawie homologii sekwencji.
Rozpoznaje i jest specyficzny dla histonu H2B, MW ~15 kDa. Dodatkowe pasmo o masie ~23 kDa jest wykrywane w niektórych próbkach, co prawdopodobnie odpowiada ubikwitynie histonu H2B.
Immunogen
Sprzężony z KLH, syntetyczny peptyd odpowiadający aminokwasom 118-126 (CG-AVTKYTSSK) ludzkiego histonu H2B, z N-końcowym CG dodanym do celów koniugacji.
Zastosowanie
Immunoprecypitacja chromatyny:
Sonikowaną chromatynę przygotowaną z komórek HeLa (1 X106 równoważników komórek na IP) poddano immunoprecypitacji chromatyny przy użyciu 1 µL normalnej króliczej IgG lub 1 µL anty-histonu H2B i zestawu Magna ChIP A (nr kat. 17-610).
Pomyślna immunoprecypitacja fragmentów DNA związanych z histonem H2B została zweryfikowana przez qPCR przy użyciu starterów ChIP, ludzkiej β-globiny dla testu pozytywnego i ludzkich starterów GAPDH jako testu negatywnego (patrz rysunki).
Dane przedstawiono jako procentowy wkład każdej próbki IP w stosunku do chromatyny wejściowej dla każdego amplikonu i próbki ChIP, jak wskazano.
Szczegółowe informacje dotyczące eksperymentu można znaleźć w protokole EZ-Magna ChIP A (nr kat. 17-408) lub EZ-ChIP (nr kat. 17-371).
Analiza Western Blot:
Reprezentatywne dane partii.
Rekombinowany histon H2B Xenopus, histony rdzenia kurczaka i ekstrakt kwasowy z komórek HeLa traktowanych maślanem sodu lub kolcemidem zostały rozdzielone za pomocą elektroforezy, przeniesione na nitrocelulozę i sondowane anty-histonem H2B (rozcieńczenie 1:5000).
Białka wizualizowano przy użyciu koziego przeciwciała drugorzędowego przeciw królikowi sprzężonego z HRP i systemu detekcji chemiluminescencji (patrz rysunki).
Sonikowaną chromatynę przygotowaną z komórek HeLa (1 X106 równoważników komórek na IP) poddano immunoprecypitacji chromatyny przy użyciu 1 µL normalnej króliczej IgG lub 1 µL anty-histonu H2B i zestawu Magna ChIP A (nr kat. 17-610).
Pomyślna immunoprecypitacja fragmentów DNA związanych z histonem H2B została zweryfikowana przez qPCR przy użyciu starterów ChIP, ludzkiej β-globiny dla testu pozytywnego i ludzkich starterów GAPDH jako testu negatywnego (patrz rysunki).
Dane przedstawiono jako procentowy wkład każdej próbki IP w stosunku do chromatyny wejściowej dla każdego amplikonu i próbki ChIP, jak wskazano.
Szczegółowe informacje dotyczące eksperymentu można znaleźć w protokole EZ-Magna ChIP A (nr kat. 17-408) lub EZ-ChIP (nr kat. 17-371).
Analiza Western Blot:
Reprezentatywne dane partii.
Rekombinowany histon H2B Xenopus, histony rdzenia kurczaka i ekstrakt kwasowy z komórek HeLa traktowanych maślanem sodu lub kolcemidem zostały rozdzielone za pomocą elektroforezy, przeniesione na nitrocelulozę i sondowane anty-histonem H2B (rozcieńczenie 1:5000).
Białka wizualizowano przy użyciu koziego przeciwciała drugorzędowego przeciw królikowi sprzężonego z HRP i systemu detekcji chemiluminescencji (patrz rysunki).
Zestaw ChIPAb+ Histone H2B zawiera przeciwciało Histone H2B, króliczą IgG kontroli ujemnej i startery qPCR, które amplifikują region 110 bp ludzkiego promotora β-globiny.
Research Category
Epigenetics & Nuclear Function
Epigenetics & Nuclear Function
Research Sub Category
Histones
Histones
Opakowanie
25 testów w zestawie. Zalecane użycie: ~1 μL przeciwciała na immunoprecypitację chromatyny (w zależności od kontekstu biologicznego).
Jakość
Chromatin Immunoprecipitation:
Sonicated chromatin prepared from HeLa cells (1 X 106 cell equivalents per IP) were subjected to chromatin immunoprecipitation using either 1 µL of Normal Rabbit IgG or 1 µL of Anti-Histone H2B and the Magna ChIP® A Kit (Cat. # 17-610).
Successful immunoprecipitation of Histone H2B associated DNA fragments was verified by qPCR using ChIP Primers, human β-globin (Please see figures).
Please refer to the EZ-Magna ChIP A (Cat. # 17-408) or EZ-ChIP (Cat. # 17-371) protocol for experimental details.
Sonicated chromatin prepared from HeLa cells (1 X 106 cell equivalents per IP) were subjected to chromatin immunoprecipitation using either 1 µL of Normal Rabbit IgG or 1 µL of Anti-Histone H2B and the Magna ChIP® A Kit (Cat. # 17-610).
Successful immunoprecipitation of Histone H2B associated DNA fragments was verified by qPCR using ChIP Primers, human β-globin (Please see figures).
Please refer to the EZ-Magna ChIP A (Cat. # 17-408) or EZ-ChIP (Cat. # 17-371) protocol for experimental details.
Opis wartości docelowych
~15 kDa
Postać fizyczna
Anty-histon H2B (króliczy poliklonalny). Jedna fiolka zawierająca 25 µL oczyszczonego króliczego poliklonalnego białka A w buforze zawierającym 0,02 M bufor fosforanowy, pH 7,6, 0,25 M NaCl i 0,1% azydek sodu oraz 30% glicerol. Przechowywać w temperaturze -20°C.
Normalne królicze IgG. Jedna fiolka zawierająca 125 μg oczyszczonej króliczej IgG w 125 μL buforu do przechowywania. Przechowywać w temperaturze -20°C.
Primery ChIP, β-globina. Jedna fiolka zawierająca 75 μL po 5 μM każdego primera specyficznego dla ludzkiego promotora β-globiny. Przechowywać w temperaturze -20°C.
FOR: AGG ACA GGT ACG GCT GTC ATC
REV: TTT ATG CCC AGC CCT GGC TC
Normalne królicze IgG. Jedna fiolka zawierająca 125 μg oczyszczonej króliczej IgG w 125 μL buforu do przechowywania. Przechowywać w temperaturze -20°C.
Primery ChIP, β-globina. Jedna fiolka zawierająca 75 μL po 5 μM każdego primera specyficznego dla ludzkiego promotora β-globiny. Przechowywać w temperaturze -20°C.
FOR: AGG ACA GGT ACG GCT GTC ATC
REV: TTT ATG CCC AGC CCT GGC TC
Format: Oczyszczony
Protein A purified
Przechowywanie i stabilność
Przechowywać przez 1 rok w temperaturze -20°C od daty otrzymania. Zalecenia dotyczące postępowania: Po pierwszym rozmrożeniu, a przed zdjęciem korka, odwirować fiolkę i delikatnie wymieszać roztwór. Rozdzielić do probówek mikrowirówkowych i przechowywać w temperaturze -20°C. Unikać powtarzających się cykli zamrażania/rozmrażania, które mogą uszkodzić IgG i wpłynąć na działanie produktu. Uwaga: Zmienność temperatur w zamrażarce poniżej -20°C może powodować zamarzanie roztworów zawierających glicerol podczas przechowywania.
Komentarz do analizy
Kontrola
Zawiera kontrolę ujemną, normalne królicze przeciwciało IgG i startery specyficzne dla ludzkiej β-globiny.
Zawiera kontrolę ujemną, normalne królicze przeciwciało IgG i startery specyficzne dla ludzkiej β-globiny.
Informacje prawne
MAGNA CHIP is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
UPSTATE is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
Oświadczenie o zrzeczeniu się odpowiedzialności
Unless otherwise stated in our catalog or other company documentation accompanying the product(s), our products are intended for research use only and are not to be used for any other purpose, which includes but is not limited to, unauthorized commercial uses, in vitro diagnostic uses, ex vivo or in vivo therapeutic uses or any type of consumption or application to humans or animals.
Ta strona może zawierać tekst przetłumaczony maszynowo.
Kod klasy składowania
10 - Combustible liquids
Certyfikaty analizy (CoA)
Poszukaj Certyfikaty analizy (CoA), wpisując numer partii/serii produktów. Numery serii i partii można znaleźć na etykiecie produktu po słowach „seria” lub „partia”.
Masz już ten produkt?
Dokumenty związane z niedawno zakupionymi produktami zostały zamieszczone w Bibliotece dokumentów.
Jiwon Hwang et al.
mBio, 2(2), e00023-e00011 (2011-03-31)
Elongins B and C are members of complexes that increase the efficiency of transcriptional elongation by RNA polymerase II (RNAPII) and enhance the monoubiquitination of histone H2B, an epigenetic mark of actively transcribed genes. Here we show that, in addition
Shaun D McCullough et al.
Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America, 109(52), 21319-21324 (2012-12-14)
Spinocerebellar ataxia type 7 (SCA7) is an autosomal-dominant neurodegenerative disorder that results from polyglutamine expansion of the ataxin-7 (ATXN7) protein. Remarkably, although mutant ATXN7 is expressed throughout the body, pathology is restricted primarily to the cerebellum and retina. One major
Xianjiang Lan et al.
Molecular and cellular biology, 35(10), 1777-1787 (2015-03-11)
Spinocerebellar ataxia type 7 (SCA7) is a debilitating neurodegenerative disease caused by expansion of a polyglutamine [poly(Q)] tract in ATXN7, a subunit of the deubiquitinase (DUB) module (DUBm) in the SAGA complex. The effects of ATXN7-poly(Q) on DUB activity are
Guang Yang et al.
Nucleic acids research, 48(6), 3001-3013 (2020-01-23)
Nucleosomal histones are barriers to the DNA repair process particularly at DNA double-strand breaks (DSBs). However, the molecular mechanism by which these histone barriers are removed from the sites of DNA damage remains elusive. Here, we have generated a single
Nasz zespół naukowców ma doświadczenie we wszystkich obszarach badań, w tym w naukach przyrodniczych, materiałoznawstwie, syntezie chemicznej, chromatografii, analityce i wielu innych dziedzinach.
Skontaktuj się z zespołem ds. pomocy technicznej