07-081

Przeciwciało anty-fosfo (Ser10)-acetylo (Lys14)-histonowe H3

Upstate^®, from rabbit

• Synonim(y): H3K14me3S10P, histon H3 (acetyl K14, fosfo S10), rodzina histonów H3, członek T, histon 3, H3, klaster histonów 3, H3
• Kod UNSPSC: 12352203
• eCl@ss: 32160702
• NACRES: NA.41

Właściwości

• pochodzenie biologiczne: rabbit
• Poziom jakości: 100
• forma przeciwciała: affinity purified immunoglobulin
• rodzaj przeciwciała: primary antibodies
• klon: polyclonal
• oczyszczone przez: affinity chromatography
• reaktywność gatunkowa: eukaryotes, mouse, human
• producent / nazwa handlowa: Upstate^®
• metody: ChIP: suitable (ChIP-seq); immunocytochemistry: suitable; western blot: suitable
• izotyp: IgG
• numer dostępu NCBI: NP_003484
• numer dostępu UniProt: Q16695
• Warunki transportu: dry ice
• docelowa modyfikacja potranslacyjna: phosphorylation (pSer10), acetylation (Lys14)
• informacje o genach: human ... HIST1H3F(8968)

Opis

Opis ogólny

Histon H3.1 (UniProt: Q16695; znany również jako H3K14AcS10P, Histone H3 (acetyl K14, phospho S10), H3 histone family member T, Histone 3, H3, Histone cluster 3, H3) jest kodowany przez HIST3H3 (znany również jako HIST1H3A, H3FA, HIST1H3B, H3FL, HIST1H3C, H3FC, HIST1H3D, H3FB, HIST1H3E, H3FD, HIST1H3F, H3FI, HIST1H3G, H3FH, HIST1H3H, H3FK, HIST1H3I, H3FF, HIST1H3J, H3FJ, HIST3H3, H3FT, H3T, MGC126886) gen (Gene ID: 8350, 8351, 8352, 8353, 8354, 8355, 8356, 8357, 8358, 8968) u człowieka. Histon H3 ma dwa główne warianty, H3.1 i H3.3, które wykazują różne wzorce lokalizacji genomowej u zwierząt. Kompleksy H3.1 i H3.3 posiadają również różne chaperony histonowe, CAF-1 i HIRA, które odgrywają ważną rolę w pośredniczeniu w montażu nukleosomów zależnych i niezależnych od syntezy DNA. Doniesiono, że histon H3.1 służy jako kanoniczny histon, który jest włączany podczas replikacji DNA, podczas gdy H3.3 działa jako histon zastępczy, który może być włączony poza fazą S podczas procesów zaburzających chromatynę, takich jak transkrypcja. Histon H 3.1 jest podstawowym składnikiem nukleosomu, który występuje tylko u ssaków i jest zwykle wzbogacony w acetylację lizyny 15 i demetylację lizyny 10 (HeK9Me2). Ulega ekspresji podczas fazy S, a następnie ekspresja znacznie spada wraz ze spowolnieniem podziałów komórkowych podczas procesu różnicowania. Wykazano, że ekspresja histonu H 3.1 jest zależna od replikacji. Stwierdzono również jego obecność w miejscu uszkodzenia DNA wywołanego promieniowaniem UV. Wykazano również, że tetramery H3.1/H4 nie ulegają rozszczepieniu i pozostają nienaruszone podczas zależnego od replikacji odkładania wariantu H3.1. Fosforylacja seryny 10 przez kinazę aurora B pośredniczy w dysocjacji białek HP1 (CBX1, CBX3 i CBX5) od heterochromatyny i ta fosforylacja jest uważana za istotny mechanizm regulacyjny dla transformacji komórek nowotworowych. Wykazano, że acetylacja lizyny 14 histonu H3 (H3K14ac) ma kluczowe znaczenie dla aktywacji punktu kontrolnego uszkodzeń DNA poprzez bezpośrednią regulację zagęszczania chromatyny i rekrutację kompleksu białek remodelujących chromatynę RSC (Remodels the Structure of Chromatin). Nukleosomy z H3K14ac wykazują wyższe powinowactwo do oczyszczonego RSC. (Ref.: Stroud, H., et al (2012). Proc. Natl. Acad. Sci. USA 109(14); 5370-75; Dunn, MR., and Smerdon MJ (2014). J. Biol. Chem. 289(12);8353-63)..

Specyficzność

Oczekiwana szeroka reaktywność krzyżowa gatunków.

Rozpoznaje histon H3 fosforylowany przy serynie 10 i acetylowany przy lizynie 14, Mr 17 kDa. Niezidentyfikowane białko jest również widoczne w niektórych liniach komórkowych, Mr 40 kDa.

Immunogen

Syntetyczny peptyd sprzężony z KLH odpowiadający aminokwasom 7-20 ludzkiego histonu H3 (ARK[pS]TGGAcKAPRKQL-C).

Zastosowanie

Analiza Western Blot:
Rozcieńczenia 1:2000-1:10 000 poprzedniej partii wykrywały fosforylowany i acetylowany histon H3 w białkach ekstrahowanych kwasem z pozbawionych surowicy komórek myszy 10T1/2 poddanych działaniu 50ng/ml EGF przez 12,5 minuty. Western blotting tej partii do białek ekstrahowanych kwasem opisany powyżej był preferencyjnie konkurowany przez peptydy w następującej kolejności: fosfoacetylo-H3 (7-20) > prosty łańcuch H3 (7-20) > fosfo-H3 (7-20) lub acetylo-H3 (7-20).
Analiza inhibicji peptydowej: Rozcieńczenie 1:500 z reprezentatywnej partii zostało użyte z HeLa AE do analizy blokady peptydowej.
Immunoprecypitacja chromatyny:
Poprzednie partie tego przeciwciała zostały zgłoszone przez niezależne laboratorium do immunoprecypitacji chromatyny. (Cheung, P., 2000.)

Immunocytochemia:
Poprzednia partia tego przeciwciała wykryła fosforylowany i acetylowany histon H3 w komórkach stymulowanych przez EGF; zgodnie z raportem niezależnego laboratorium. (Cheung, P., 2000.)

Anti-phospho (Ser10)-acetyl (Lys14)-Histone H3, Nr kat. 07-081, jest wysoce specyficznym króliczym przeciwciałem poliklonalnym skierowanym przeciwko histonowi H3 fosforylowanemu na serynie 10 i acetylowanemu na lizynie 14 i zostało przetestowane do stosowania w immunocytochemii, teście inhibicji peptydowej, ChIP-seq i chromatynie immunologicznej.

Kategoria badawcza
Epigenetyka i funkcje jądrowe

Podkategoria badawcza
Histony

Jakość

Routinely evaluated by Western Blot on HeLa acid extract.

Western Blot Analysis:
1:500 dilution of this lot detected phospho acetyl Histone H3 on 10 μg of HeLa acid extract.

Opis wartości docelowych

17 kDa

Postać fizyczna

Chromatografia immunopowinowactwa i chromatografia odwrotnego powinowactwa.

Oczyszczone królicze poliklonalne IgG w buforze zawierającym 0,2 M Tris-glicyny, pH 7,4, 0,15 M NaCl, 0,05% azydku sodu, przed dodaniem glicerolu do 30%.

Przechowywanie i stabilność

Przechowywać przez 1 rok w temperaturze -20°C od daty otrzymania.
Zalecenia dotyczące postępowania: Po pierwszym rozmrożeniu, a przed zdjęciem korka, odwirować fiolkę i delikatnie wymieszać roztwór. Rozdzielić do probówek mikrowirówkowych i przechowywać w temperaturze -20°C. Unikać powtarzających się cykli zamrażania/rozmrażania, które mogą uszkodzić IgG i wpłynąć na działanie produktu. Uwaga: Zmienność temperatur w zamrażarce poniżej -20°C może powodować zamarzanie roztworów zawierających glicerol podczas przechowywania.

Komentarz do analizy

Kontrola
Białka ekstrahowane kwasem z komórek 10T1/2 pozbawionych surowicy.

Inne uwagi

Stężenie: Stężenie specyficzne dla danej partii można znaleźć w certyfikacie analizy.

Informacje prawne

UPSTATE is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Oświadczenie o zrzeczeniu się odpowiedzialności

O ile nie określono inaczej w naszym katalogu lub innej dokumentacji firmy dołączonej do produktu(-ów), nasze produkty są przeznaczone wyłącznie do użytku badawczego i nie mogą być wykorzystywane do żadnych innych celów, w tym między innymi do nieautoryzowanych zastosowań komercyjnych, zastosowań diagnostycznych in vitro, zastosowań terapeutycznych ex vivo lub in vivo lub jakiegokolwiek rodzaju konsumpcji lub zastosowania u ludzi lub zwierząt.

Ta strona może zawierać tekst przetłumaczony maszynowo.

Informacja o środkach bezpieczeństwa

• Kod klasy składowania: 10 - Combustible liquids
• Klasa zagrożenia wodnego (WGK): WGK 1