미생물 배양 배지 제조
미생물 배양 배지 제조는 미생물의 성장과 분화를 지원하는 아가(agar) 또는 브로스(broth)를 만들기 위해 영양소, 삼투압 균형을 완충하고 유지하는 물질, 선택적 억제제 또는 지시약을 혼합하는 과정입니다. 미생물 배양 배지 제조는 미생물학적 검사의 부패성 및 병원성 미생물의 정기 모니터링에서 일상적인 작업입니다.
배양 배지의 유형
미생물 배양 배지는 모든 또는 특정 유형의 미생물체를 위해 최적의 성장 조건을 제공해야 합니다. 배지의 정밀한 조성은 배양되는 종 그리고 응용분야 목표에 따라 달라집니다. 배지 pH는 미생물체에 따라서 조정되어야 합니다. 미생물 배양 배지는 화학적 성분, 물리적 특성 및 기능과 같은 여러 파라미터를 근거로 분류됩니다. 이러한 파라미터에 의해 정의되는 배지 유형이 아래에 설명되어 있습니다.
관련 기술 문서
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관련 프로토콜
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- ISO published revised EN ISO 11290-1 and EN ISO 11290-2 standards in 2017. In Part 1, a horizontal method for the detection of Listeria monocytogenes and Listeria spp. is specified, and in Part 2, the enumeration of these organisms in food, animal feed and environmental samples is described.
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화학적 조성에 따른 미생물 배양 배지의 분류
합성(규명) 배지는 시아노박테리아 및 광합성 원생생물과 같은 광독립영양생물을 배양하기 위해 일반적으로 이용되는 규명된 화학제제가 포함된 배지입니다. 미생물 대사 시험을 위해 연구에서 폭넓게 이용됩니다.
복합 배지는 다른 미생물체의 영양 요건을 만족하는, 펩톤, 육류 추출물 및 효모 추출물과 같은 규명되지 않은 화학 성분을 포함하는 배지입니다. 복잡한 영양 요건을 가진 까다로운 미생물 배양에 사용됩니다.
물리적 특성에 근거한 미생물 배양 배지
고형 배지는 1-7% 아가(agar)-아가(agar) 또는 10-20% 젤라틴을 사용하여 액상 브로스(broth)를 고형화합니다. 고형 배지는 각기 다른 미생물을 분리하고, 순배양물을 성립하며, 아가 사면(slant)을 만들고 아가 고층을 만들기 위해 이용합니다.
액상 배지는 고형화 제제를 포함하지 않습니다. 접종 및 배양 이후, 세포는 작은 덩어리 또는 브로스(broth) 혼탁의 형태로 가시화됩니다.
제조법에 근거한 미생물 배양 배지
즉석 사용 배지는 즉석 사용 형태 또는 다시 녹인 후 보조제를 첨가하여 즉석 사용 형태로 플레이트, 병, 튜브 또는 기타 용기에 공급되는 고형 또는 액상 배지입니다.
상용 탈수 제형으로부터 제조된 배지는 사용 전에 재수화 및 공정이 필요한 건조 형태의 배지이며, 그 결과 완전 배지 또는 사용 전에 보충제를 추가해야 하는 불완전 배지일 수 있습니다.
개별 성분으로부터 제조된 배지는 전적으로 개별 성분만 사용하여 미생물학 실험실에서 생산한 배지입니다.
주문형 배지는 수일간 연구소에서 이용할 수 있는 고농도 멸균 배양 배지를 유지하는 시스템으로 생산됩니다. 멸균수로 희석하면 오토클레이브 없이 필요에 따라 필요한 양의 즉시 사용 가능한 배지를 생산할 수 있습니다.
미생물 배양 배지의 제조
탈수된 상업용 제제의 배지 준비는 제조업체의 지침에 따라 수행되어야 합니다. 펩톤, 효모 추출물, 아가(agar), 버퍼 물질 및 항생제와 같은 기본 성분의 제형은 배지의 일관성을 위해 변형됩니다. 필요한 양의 탈수 배지 또는 개별 성분을 증류수에 계속 저어준 후 가열(필요한 경우)하여 용해시킵니다. 아가(agar)를 포함하는 배지는 가열하기 전에 적절한 교반으로 충분히 적셔야 합니다. pH를 조정해야 하며 배지는 오토클레이브의 습열에 의한 멸균을 위해 적절한 용기에 분배됩니다. 열에 민감한 물질(예: 단백질, 효소)은 멤브레인 필터를 이용해 멸균됩니다.
배양 배지는 조성의 변경을 방지하기 위해 특정 온도에 보관되어야 하며, 제품 유효기간보다 장기간 보관하지 말아야 합니다. 미생물 감염으로부터 배양 배지를 보호하기 위해 무균 제조 및 보관이 필수적입니다. 저장 중 수분 손실을 최소화하기 위해 불투과성 포장을 하여 그리고/또는 5°C ± 3°C에서 저장합니다. 산화 또는 항미생물 손실과 같은 화학적 분해를 지연시키기 위해 빛, 열 및 탈수화로부터 보호합니다.
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